| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 缩略语 | 第14-16页 |
| 上篇 文献综述 | 第16-55页 |
| 第一章 禾谷镰孢菌研究进展 | 第17-35页 |
| 1 禾谷镰孢菌是引起小麦赤霉病的主要病原物 | 第17-19页 |
| 2 禾谷镰孢菌分子生物学研究概况 | 第19-22页 |
| ·禾谷镰孢菌功能基因研究 | 第19-21页 |
| ·禾谷镰孢菌转录组、蛋白质组和代谢组研究 | 第21页 |
| ·禾谷镰孢菌效应因子和致病因子 | 第21-22页 |
| 3 禾谷镰孢菌产生的真菌毒素 | 第22-24页 |
| ·禾谷镰孢菌毒素分子生物学 | 第22-23页 |
| ·毒素降解策略 | 第23-24页 |
| 4 小麦赤霉病的综合治理 | 第24-27页 |
| ·抗菌性的转基因技术 | 第24页 |
| ·生物防治 | 第24-25页 |
| ·抗性育种 | 第25页 |
| ·农业防治 | 第25页 |
| ·化学防治 | 第25-27页 |
| 5 禾谷镰孢菌未来研究方向 | 第27-28页 |
| 参考文献 | 第28-35页 |
| 第二章 徽管及对微管蛋白结合药物的抗药性 | 第35-55页 |
| 1 微管和微管蛋白的结构特点与功能 | 第35-38页 |
| 2 以微管蛋白为靶标的抗有丝分裂药物 | 第38-39页 |
| 3 微管系统对微管结合剂的规避 | 第39-43页 |
| ·基因突变与抗药性 | 第40-41页 |
| ·微管结合蛋白与抗药性 | 第41-42页 |
| ·肌动蛋白与抗药性 | 第42页 |
| ·β-Ⅲ微管蛋白与抗药性 | 第42-43页 |
| 4 苯并咪唑类杀菌剂及抗药性研究进展 | 第43-48页 |
| ·主要品种 | 第44页 |
| ·作用机理 | 第44-45页 |
| ·抗药性机制研究 | 第45-47页 |
| ·禾谷镰孢菌对多菌灵的抗药性 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 下篇 研究内容 | 第55-136页 |
| 第三章 基于定点突变的禾谷镰孢菌β_2-微管蛋白基因与苯并咪唑类杀菌剂的结合位点研究 | 第56-80页 |
| 摘要 | 第56-57页 |
| 1 材料与方法 | 第57-71页 |
| ·菌株 | 第57-58页 |
| ·禾谷镰孢菌分子生物学操作方法 | 第58-66页 |
| ·禾谷镰孢菌基因组DNA提取(CTAB法) | 第58页 |
| ·禾谷镰孢菌基因组RNA提取 | 第58-59页 |
| ·PCR反应体系 | 第59页 |
| ·qRT-PCR | 第59-60页 |
| ·禾谷镰孢菌原生质体转化方法 | 第60-61页 |
| ·Southern杂交 | 第61-66页 |
| ·β_2-微管蛋白基因体外人工点突变 | 第66-69页 |
| ·突变片段的构建 | 第66-67页 |
| ·基于同源置换法的β_2-微管蛋白基因点突变 | 第67-68页 |
| ·突变体的验证 | 第68-69页 |
| ·突变体的生物学特性测定 | 第69-70页 |
| ·对苯并咪唑类杀菌剂的敏感性测定 | 第69页 |
| ·菌丝生长及菌落和菌丝形态观察 | 第69页 |
| ·无性生殖及分生孢子形态观察测定 | 第69-70页 |
| ·有性生殖能力测定 | 第70页 |
| ·致病力测定 | 第70页 |
| ·β_2-微管蛋白基因同源模建 | 第70-71页 |
| 2 结果与分析 | 第71-75页 |
| ·突变体的验证 | 第71-72页 |
| ·突变体的生物学特性 | 第72-73页 |
| ·突变体对苯并咪唑类杀菌剂的敏感性 | 第72-73页 |
| ·突变体的生物学特性 | 第73页 |
| ·β_2-微管蛋白基因同源模建 | 第73-75页 |
| 3 讨论 | 第75-77页 |
| ABSTRACT | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-80页 |
| 第四章 禾谷镰孢菌β_1-微管蛋白基因功能及与多菌灵抗药性关系的研究 | 第80-100页 |
| 摘要 | 第80-81页 |
| 1 材料与方法 | 第81-86页 |
| ·菌株 | 第81-82页 |
| ·β_1-微管蛋白基因敲除 | 第82-85页 |
| ·β_1-微管蛋白基因敲除载体的构建 | 第82-84页 |
| ·原生质体转化 | 第84页 |
| ·敲除突变体的验证 | 第84-85页 |
| ·β_2-微管蛋白基因过表达 | 第85-86页 |
| ·β_2-微管蛋白基因过表达载体的构建 | 第85页 |
| ·原生质体转化 | 第85-86页 |
| ·过表达突变体的验证 | 第86页 |
| ·qRT-PCR | 第86页 |
| ·β_1-微管蛋白基因同源模建 | 第86页 |
| 2 结果与分析 | 第86-94页 |
| ·敲除突变体的获得 | 第86-87页 |
| ·过表达突变体的获得 | 第87-88页 |
| ·β_2-微管蛋白基因表达水平 | 第88-89页 |
| ·突变体的生物学特性及对多菌灵的敏感性 | 第89-93页 |
| ·β_1-微管蛋白氨基酸序列及结构特性 | 第93-94页 |
| 3 讨论 | 第94-97页 |
| ABSTRACT | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-100页 |
| 第五章 禾谷镰孢菌β_2-微管蛋白定点突变与敲除对其基因表达谱的影响 | 第100-136页 |
| 摘要 | 第100-102页 |
| 1 材料与方法 | 第102-110页 |
| ·菌株 | 第102页 |
| ·RNA提取 | 第102页 |
| ·文库构建及深度测序 | 第102-104页 |
| ·测序数据的分析 | 第104-108页 |
| ·数据处理 | 第104-105页 |
| ·测序质量评估 | 第105-106页 |
| ·基因表达注释 | 第106页 |
| ·基因表达量的标准化 | 第106页 |
| ·差异基因的筛选 | 第106-107页 |
| ·Gene Ontology功能显著性富集分析 | 第107-108页 |
| ·Pathway显著性富集分析 | 第108页 |
| ·qRT-PCR | 第108-110页 |
| 2 结果 | 第110-126页 |
| ·测序评估 | 第110-112页 |
| ·Clean Tag拷贝数分布统计 | 第110-111页 |
| ·测序饱和度分析 | 第111-112页 |
| ·测序质量评估 | 第112页 |
| ·测序结果汇总 | 第112-114页 |
| ·差异表达基因(Differentially Expressed Genes,DEGs)分析 | 第114-116页 |
| ·Pathway显著性富集分析 | 第116页 |
| ·GO功能富集分析 | 第116-120页 |
| ·转录因子 | 第120-121页 |
| ·蛋白激酶 | 第121-122页 |
| ·ABC转运蛋白(ATP-Binding Cassette transporter) | 第122-124页 |
| ·测序结果的实时定量PCR验证 | 第124-125页 |
| ·实时定量PCR检测异戊二烯途径和单端孢霉烯途径基因的表达 | 第125-126页 |
| 3 讨论 | 第126-130页 |
| ABSTRACT | 第130-131页 |
| 参考文献 | 第131-136页 |
| 全文结论 | 第136-138页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第138-140页 |
| 致谢 | 第140-141页 |
