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青虾雌性不育同源异型基因(fsh)全长cDNA克隆及时空表达分析

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
第一章 文献综述第12-28页
 第一节 HOX基因家族、trxG基因家族和fsh基因的研究概述第12-22页
  1 Hox基因家族和trxG基因家族简介第12-17页
   ·Hox基因家族简介第12-16页
     ·Hox基因的结构第12-13页
     ·Hox基因的功能第13-15页
     ·Ubx基因简介第15-16页
   ·TrxG基因家族简介第16-17页
  2 fsh基因简介第17-22页
   ·fsh基因的结构第17-20页
     ·fsh基因BET转录因子的ET结构域第18-19页
     ·fsh基因BET转录因子的Bromodomain结构域第19-20页
   ·fsh基因的功能第20-22页
 第二节 青虾分子遗传学研究进展概述第22-26页
  1 青虾分子标记的开发第22-23页
  2 青虾性状相关标记的筛选第23页
  3 青虾遗传连锁图谱的构建第23页
  4 青虾基因文库的构建与EST序列开发第23-24页
  5 青虾转录组测序第24页
  6 青虾基因克隆与表达第24-26页
   ·青虾卵巢相关基因克隆与表达第25页
   ·青虾精巢相关基因克隆与表达第25-26页
   ·青虾蜕皮相关基因克隆与表达第26页
   ·青虾其他基因克隆与表达第26页
 第三节 本研究的目的与意义第26-28页
第二章 青虾fsh基因全长cDNA的克隆及序列分析第28-62页
 1 实验材料第28-29页
   ·实验虾第28页
   ·主要试剂第28-29页
   ·仪器第29页
 2 实验方法第29-43页
   ·青虾总RNA的提取第29-31页
     ·实验用品的预处理第29页
     ·总RNA的提取第29-30页
     ·总RNA的浓度测定和质量检测第30-31页
   ·青虾fsh cDNA基因扩增所用引物设计第31页
   ·青虾fsh基因中间片段的获得及验证第31-33页
     ·青虾fsh基因的克隆方案第31-32页
     ·基因筛查第32页
     ·引物设计第32页
     ·验证中间片段的扩增第32-33页
   ·青虾fsh基因的3′RACE第33-36页
     ·引物的设计第33-34页
     ·3′端反转录第34页
     ·3′端扩增第34-36页
   ·青虾fsh基因的5′RACE第36-40页
     ·引物的设计第36页
     ·Total RNA的处理第36-39页
     ·5′端扩增第39-40页
   ·PCR产物的克隆第40-43页
     ·感受态的制备第40-41页
     ·PCR产物的回收第41页
     ·连接第41-42页
     ·转化第42页
     ·重组克隆的筛选第42页
     ·重组克隆的鉴定第42-43页
   ·序列的测定及分析第43页
 3 结果与分析第43-58页
   ·青虾fsh基因中间片段序列第43页
   ·青虾fsh基因3'端序列第43-44页
   ·青虾fsh基因5'端序列第44页
   ·青虾fsh基因全长cDNA序列结构特征第44-46页
   ·生物信息学分析第46-52页
     ·理化性质分析第46-47页
     ·信号肽预测第47页
     ·跨膜区预测第47-48页
     ·疏水性分析第48页
     ·亚细胞定位预测第48-49页
     ·二级结构预测第49页
     ·保守结构域预测第49-50页
     ·三级结构预测第50-51页
     ·功能位点分析结果第51-52页
   ·同源性分析第52-56页
   ·系统发育分析第56-58页
 4 讨论第58-62页
   ·Bromodomain结构域第58-59页
   ·蛋白结构第59-60页
   ·系统进化第60-62页
第三章 青虾fsh基因的时空表达分析第62-74页
 1 实验材料第62-63页
   ·实验虾第62-63页
   ·主要试剂第63页
   ·仪器第63页
 2 实验方法第63-68页
   ·青虾胚胎发育形态观察第63-65页
   ·青虾fsh基因时空表达的荧光定量PCR分析第65-68页
     ·引物设计及检验第66页
     ·总RNA的提取第66页
     ·cDNA第一链的合成第66-67页
     ·RT-PCR反应第67-68页
     ·Real-time荧光定量PCR分析第68页
 3 结果第68-70页
   ·青虾各样本总RNA的检测第68页
   ·荧光定量引物的验证第68页
   ·青虾fsh基因在胚胎发育期、幼体发育期和后幼体发育期的表达第68-69页
   ·青虾fsh基因在成体不同组织中的表达第69-70页
 4 讨论第70-74页
   ·胚胎不同发育时期表达差异第70-71页
   ·幼体、幼虾不同发育时期表达差异第71-72页
   ·成体不同组织表达差异第72-74页
全文结论第74-76页
参考文献第76-86页
附录 实验试剂及配置第86-88页
致谢第88-90页
已发表或已接受的论文第90页

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