摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-28页 |
第一节 HOX基因家族、trxG基因家族和fsh基因的研究概述 | 第12-22页 |
1 Hox基因家族和trxG基因家族简介 | 第12-17页 |
·Hox基因家族简介 | 第12-16页 |
·Hox基因的结构 | 第12-13页 |
·Hox基因的功能 | 第13-15页 |
·Ubx基因简介 | 第15-16页 |
·TrxG基因家族简介 | 第16-17页 |
2 fsh基因简介 | 第17-22页 |
·fsh基因的结构 | 第17-20页 |
·fsh基因BET转录因子的ET结构域 | 第18-19页 |
·fsh基因BET转录因子的Bromodomain结构域 | 第19-20页 |
·fsh基因的功能 | 第20-22页 |
第二节 青虾分子遗传学研究进展概述 | 第22-26页 |
1 青虾分子标记的开发 | 第22-23页 |
2 青虾性状相关标记的筛选 | 第23页 |
3 青虾遗传连锁图谱的构建 | 第23页 |
4 青虾基因文库的构建与EST序列开发 | 第23-24页 |
5 青虾转录组测序 | 第24页 |
6 青虾基因克隆与表达 | 第24-26页 |
·青虾卵巢相关基因克隆与表达 | 第25页 |
·青虾精巢相关基因克隆与表达 | 第25-26页 |
·青虾蜕皮相关基因克隆与表达 | 第26页 |
·青虾其他基因克隆与表达 | 第26页 |
第三节 本研究的目的与意义 | 第26-28页 |
第二章 青虾fsh基因全长cDNA的克隆及序列分析 | 第28-62页 |
1 实验材料 | 第28-29页 |
·实验虾 | 第28页 |
·主要试剂 | 第28-29页 |
·仪器 | 第29页 |
2 实验方法 | 第29-43页 |
·青虾总RNA的提取 | 第29-31页 |
·实验用品的预处理 | 第29页 |
·总RNA的提取 | 第29-30页 |
·总RNA的浓度测定和质量检测 | 第30-31页 |
·青虾fsh cDNA基因扩增所用引物设计 | 第31页 |
·青虾fsh基因中间片段的获得及验证 | 第31-33页 |
·青虾fsh基因的克隆方案 | 第31-32页 |
·基因筛查 | 第32页 |
·引物设计 | 第32页 |
·验证中间片段的扩增 | 第32-33页 |
·青虾fsh基因的3′RACE | 第33-36页 |
·引物的设计 | 第33-34页 |
·3′端反转录 | 第34页 |
·3′端扩增 | 第34-36页 |
·青虾fsh基因的5′RACE | 第36-40页 |
·引物的设计 | 第36页 |
·Total RNA的处理 | 第36-39页 |
·5′端扩增 | 第39-40页 |
·PCR产物的克隆 | 第40-43页 |
·感受态的制备 | 第40-41页 |
·PCR产物的回收 | 第41页 |
·连接 | 第41-42页 |
·转化 | 第42页 |
·重组克隆的筛选 | 第42页 |
·重组克隆的鉴定 | 第42-43页 |
·序列的测定及分析 | 第43页 |
3 结果与分析 | 第43-58页 |
·青虾fsh基因中间片段序列 | 第43页 |
·青虾fsh基因3'端序列 | 第43-44页 |
·青虾fsh基因5'端序列 | 第44页 |
·青虾fsh基因全长cDNA序列结构特征 | 第44-46页 |
·生物信息学分析 | 第46-52页 |
·理化性质分析 | 第46-47页 |
·信号肽预测 | 第47页 |
·跨膜区预测 | 第47-48页 |
·疏水性分析 | 第48页 |
·亚细胞定位预测 | 第48-49页 |
·二级结构预测 | 第49页 |
·保守结构域预测 | 第49-50页 |
·三级结构预测 | 第50-51页 |
·功能位点分析结果 | 第51-52页 |
·同源性分析 | 第52-56页 |
·系统发育分析 | 第56-58页 |
4 讨论 | 第58-62页 |
·Bromodomain结构域 | 第58-59页 |
·蛋白结构 | 第59-60页 |
·系统进化 | 第60-62页 |
第三章 青虾fsh基因的时空表达分析 | 第62-74页 |
1 实验材料 | 第62-63页 |
·实验虾 | 第62-63页 |
·主要试剂 | 第63页 |
·仪器 | 第63页 |
2 实验方法 | 第63-68页 |
·青虾胚胎发育形态观察 | 第63-65页 |
·青虾fsh基因时空表达的荧光定量PCR分析 | 第65-68页 |
·引物设计及检验 | 第66页 |
·总RNA的提取 | 第66页 |
·cDNA第一链的合成 | 第66-67页 |
·RT-PCR反应 | 第67-68页 |
·Real-time荧光定量PCR分析 | 第68页 |
3 结果 | 第68-70页 |
·青虾各样本总RNA的检测 | 第68页 |
·荧光定量引物的验证 | 第68页 |
·青虾fsh基因在胚胎发育期、幼体发育期和后幼体发育期的表达 | 第68-69页 |
·青虾fsh基因在成体不同组织中的表达 | 第69-70页 |
4 讨论 | 第70-74页 |
·胚胎不同发育时期表达差异 | 第70-71页 |
·幼体、幼虾不同发育时期表达差异 | 第71-72页 |
·成体不同组织表达差异 | 第72-74页 |
全文结论 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-86页 |
附录 实验试剂及配置 | 第86-88页 |
致谢 | 第88-90页 |
已发表或已接受的论文 | 第90页 |