| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 符号与缩略语说明 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1. 芳氧苯氧丙酸类除草剂概述 | 第12-15页 |
| ·芳氧苯氧丙酸类除草剂的的简介 | 第12-14页 |
| ·芳氧苯氧丙酸类除草剂的的危害机理 | 第14页 |
| ·芳氧苯氧丙酸类除草剂的生物降解 | 第14-15页 |
| 2. 除草剂精恶唑禾草灵概述 | 第15-22页 |
| ·精恶唑禾草灵的基本特性及作用方式 | 第15-16页 |
| ·精恶唑禾草灵的生态毒性 | 第16-17页 |
| ·精恶唑禾草灵的降解行为 | 第17-19页 |
| ·精恶唑禾草灵在水中的降解 | 第17-18页 |
| ·精恶唑禾草灵在土壤中的降解 | 第18-19页 |
| ·精恶唑禾草灵的微生物降解 | 第19页 |
| ·酯酶的研究 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 精恶唑禾草灵降解菌的分离鉴定及生物学特性研究 | 第22-34页 |
| 1. 材料和方法 | 第22-26页 |
| ·培养基与试剂 | 第22页 |
| ·精恶唑禾草灵降解菌的分离 | 第22-23页 |
| ·精恶唑禾草灵的检测方法 | 第23页 |
| ·降解菌株的培养特征及生理生化鉴定 | 第23页 |
| ·降解菌株16S rRNA基因序列的扩增及测序 | 第23-25页 |
| ·降解菌株系统发育地位的确定 | 第25页 |
| ·菌体生长量的测定 | 第25-26页 |
| 2. 结果与讨论 | 第26-33页 |
| ·精恶唑禾草灵降解菌的分离 | 第26页 |
| ·降解菌株的菌落形态及生理生化特征 | 第26-27页 |
| ·菌株JPL-2的16S rRNA基因序列扩增及鉴定 | 第27-29页 |
| ·环境条件对JPL-2生长的影响 | 第29-33页 |
| 3. 小结 | 第33-34页 |
| 第三章 精恶唑禾草灵降解菌株JPL-2的降解特性研究 | 第34-40页 |
| 1. 材料与方法 | 第34-35页 |
| ·供试菌株 | 第34页 |
| ·培养基与试剂 | 第34页 |
| ·精恶唑禾草灵含量的检测方法 | 第34页 |
| ·菌体生长量的测定 | 第34页 |
| ·种子液的制备 | 第34-35页 |
| 2. 结果与讨论 | 第35-38页 |
| ·精恶唑禾草灵的降解和菌株JPL-2生长的关系 | 第35页 |
| ·温度对菌株JPL-2降解精恶唑禾草灵的影响 | 第35页 |
| ·初始pH对菌株JPL-2降解精恶唑禾草灵的影响 | 第35-37页 |
| ·农药初始浓度对菌株JPL-2降解精恶唑禾草灵的影响 | 第37页 |
| ·接种量对菌株JPL-2降解精恶唑禾草灵的影响 | 第37-38页 |
| 3. 小结 | 第38-40页 |
| 第四章 精恶唑禾草灵水解酶基因feh的克隆与表达 | 第40-58页 |
| 第一节 精恶唑禾草灵水解酶基因feh的克隆 | 第40-46页 |
| 1. 材料与方法 | 第40-43页 |
| ·培养基与试剂 | 第40页 |
| ·菌株与质粒 | 第40页 |
| ·菌体基因组DNA的提取 | 第40-41页 |
| ·质粒DNA的小量提取 | 第41页 |
| ·基因组DNA的部分酶切与酶切片段的回收 | 第41页 |
| ·超级感受态细胞的制备 | 第41-42页 |
| ·基因组文库的构建 | 第42页 |
| ·酶连及酶连产物的转化 | 第42-43页 |
| ·基因序列的测定和分析 | 第43页 |
| 2. 结果与讨论 | 第43-46页 |
| ·菌株JPL-2基因组DNA的部分酶切 | 第43-44页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第44-45页 |
| ·阳性克隆序列测定及ORF分析 | 第45-46页 |
| 第二节 精恶唑禾草灵水解酶基因(feh)的高效表达 | 第46-57页 |
| 1 材料与方法 | 第46-52页 |
| ·培养基与试剂 | 第46页 |
| ·菌株与质粒 | 第46页 |
| ·菌体基因组DNA的提取 | 第46-47页 |
| ·质粒DNA的小量提取 | 第47页 |
| ·精恶唑禾草灵的检测方法 | 第47页 |
| ·E.coli BL21普通感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第47页 |
| ·精恶唑禾草灵水解酶基因的PCR扩增 | 第47-48页 |
| ·PCR产物的纯化及酶切 | 第48页 |
| ·载体的制备 | 第48页 |
| ·表达载体的构建 | 第48页 |
| ·酶连及酶连产物的转化 | 第48页 |
| ·精恶唑禾草灵水解酶的诱导表达 | 第48-49页 |
| ·精恶唑禾草灵水解酶的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第49-50页 |
| ·FEH的Ni~(2+)亲和层析纯化 | 第50-51页 |
| ·温度对FEH的影响 | 第51页 |
| ·pH对FEH的影响 | 第51-52页 |
| ·金属离子对FEH的影响 | 第52页 |
| 2. 结果与讨论 | 第52-57页 |
| ·feh基因的扩增及重组表达载体的构建 | 第52-53页 |
| ·feh在E coli BL21中的表达及表达产物的纯化和SDS-PAGE分析 | 第53-55页 |
| ·温度对FEH的影响 | 第55-56页 |
| ·pH对FEH活性和稳定性的影响 | 第56页 |
| ·金属离子对FEH活性的影响 | 第56-57页 |
| 本章小结 | 第57-58页 |
| 全文总结 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录一 文中所用培养基及试剂配方 | 第66-69页 |
| 附录二 相关DNA序列 | 第69-73页 |
| 附录三 攻读硕士学位期间发表或已接收的论文 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
