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大肠杆菌LTB-Stx2B融合蛋白的表达及其诱导小鼠体液免疫的研究

摘要第1-19页
Abstract第19-24页
1 引言第24-74页
   ·犊牛腹泻概述第24-36页
     ·病毒性腹泻第26-30页
     ·细菌性腹泻第30-33页
     ·寄生虫性腹泻第33-36页
   ·犊牛大肠杆菌性腹泻第36-48页
     ·病原学第36-40页
     ·流行特点第40-43页
     ·临床症状及病理变化第43-45页
     ·防治第45-48页
   ·大肠杆菌毒力因子第48-63页
     ·粘附素第48-51页
     ·肠毒素第51-59页
     ·志贺毒素第59-63页
   ·大肠杆菌疫苗的研究进展第63-71页
     ·灭活苗第63-65页
     ·亚单位疫苗第65-67页
     ·核酸疫苗第67-69页
     ·活载体疫苗第69-71页
   ·研究目的与意义第71-74页
2 材料和方法第74-94页
   ·实验材料第74-77页
     ·菌株、质粒、实验动物及细胞系第74页
     ·主要试剂第74-75页
     ·主要仪器第75-77页
   ·实验方法第77-94页
     ·ltb 与 stx2b 融合基因的构建第77-81页
     ·重组蛋白 LTB-Stx2B 的表达与鉴定第81-85页
     ·重组蛋白 Stx2B 的表达与鉴定第85-87页
     ·重组蛋白纯化第87-88页
     ·实验动物分组及免疫第88-90页
     ·免疫抗体检测第90-91页
     ·体内中和试验第91-93页
     ·体外中和试验第93-94页
3 结果与分析第94-116页
   ·ltb-stx2b 融合基因的构建第94-96页
     ·ltb 基因的扩增第94页
     ·stx2b 基因的扩增第94-95页
     ·ltb-stx2b 基因扩增第95-96页
     ·ltb-stx2b 重组基因序列的测定第96页
   ·重组蛋白 LTB-Stx2B 的表达第96-103页
     ·重组 E.coli Rossetta/pET-30a-LTB-Stx2B 的表达第96-99页
     ·重组 E.coli Rossetta/pCold I-LTB-Stx2B 的表达第99-103页
   ·重组蛋白 Stx2B 的表达与鉴定第103-105页
     ·stx2b 基因的扩增第103-104页
     ·stx2b 重组基因序列的测定第104页
     ·重组表达质粒 pCold I-Stx2B 的鉴定第104-105页
     ·重组 E.coli Rosetta/pCold-I-Stx2B 的表达与鉴定第105页
   ·免疫原的制备第105-106页
   ·免疫抗体的检测第106-111页
   ·体内中和试验第111-113页
     ·LT 和 Stx2 对小鼠的 LD50 的测定第111页
     ·LT 的小鼠体内中和试验第111-112页
     ·Stx2 的体内中和试验第112-113页
   ·体外中和试验第113-116页
     ·Stx2 对 Vero 细胞的毒性作用第113-114页
     ·Stx2 对 Vero 细胞 CD50 测定第114页
     ·Stx2 的中和效价第114-116页
4 讨论第116-129页
   ·融合 PCR 技术第116-118页
   ·不同免疫原的免疫效力评价第118-121页
   ·初乳对新生犊牛的重要性第121-124页
   ·亚单位疫苗在牛病上的应用研究第124-129页
5 结论第129-130页
致谢第130-132页
参考文献第132-162页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第162页

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