| 中文摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-44页 |
| ·细胞周期背景知识 | 第16-26页 |
| ·细胞周期概述 | 第16-17页 |
| ·细胞周期依赖性激酶(Cdks) | 第17-18页 |
| ·Cdks 激酶活性的调节 | 第18-20页 |
| ·细胞周期检验点 | 第20-22页 |
| ·Cdks 与癌症的关系 | 第22-26页 |
| ·细胞凋亡背景知识 | 第26-36页 |
| ·细胞凋亡概述 | 第26页 |
| ·Caspase 家族 | 第26-28页 |
| ·细胞凋亡通路 | 第28-31页 |
| ·Bcl-2 家族 | 第31-32页 |
| ·IAPs 家族 | 第32-33页 |
| ·Smac 与 IAPs 的关系 | 第33-34页 |
| ·PARP 蛋白质 | 第34-36页 |
| ·Cdk2 作为癌症的治疗靶点 | 第36-38页 |
| ·Cdk2 调控细胞周期进程 | 第36-37页 |
| ·Cdk2 作为抗癌靶标 | 第37-38页 |
| ·Cdks 抑制剂临床研究现状 | 第38-39页 |
| ·Xylocydine 及嘌呤核苷类似物的研究现状 | 第39-40页 |
| ·论文研究目的及设计思路 | 第40-44页 |
| ·论文研究目的 | 第40-41页 |
| ·论文设计思路 | 第41-44页 |
| 第二章 Xylocydine 改造位点的确定及其衍生物对 Cyclin A-Cdk2抑制活性的研究 | 第44-70页 |
| ·引言 | 第44-45页 |
| ·材料与方法 | 第45-52页 |
| ·菌种与细胞株 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| ·实验仪器 | 第45-46页 |
| ·实验缓冲液 | 第46-47页 |
| ·细胞培养 | 第47页 |
| ·质粒构建(pGEX-6P-1-Cyclin A3 和 pGEX-6P-1-Cdk2) | 第47-48页 |
| ·Cyclin A3-Cdk2 蛋白复合物的表达纯化 | 第48-49页 |
| ·Cyclin A3-Cdk2-Xylocydine 晶体的培育 | 第49-50页 |
| ·X-Ray 晶体衍射数据的收集和结构解析 | 第50页 |
| ·免疫共沉淀和体外激酶反应 | 第50-51页 |
| ·细胞周期分布测定 | 第51页 |
| ·分子对接 | 第51页 |
| ·其它数据分析软件 | 第51-52页 |
| ·实验结果 | 第52-67页 |
| ·Cyclin A3-Cdk2 蛋白复合物的表达纯化 | 第52-53页 |
| ·Cyclin A3-Cdk2-Xylocydine 晶体的培育 | 第53-55页 |
| ·晶体结构解析及 Xylocydine 改造位点的确定 | 第55-59页 |
| ·Xylocydine 衍生物的合成 | 第59-60页 |
| ·Xylocydine 衍生物对 Cdk1 和 Cdk2 抑制活性的测定 | 第60-63页 |
| ·化合物 3h-j 诱导 HeLa 细胞周期阻滞 | 第63-64页 |
| ·分析 3h-j 对 Cdk2 抑制活性产生差异的原因 | 第64-67页 |
| ·讨论 | 第67-69页 |
| ·结论 | 第69-70页 |
| 第三章 Xylocydine 衍生物 JRS-15 诱导肿瘤细胞凋亡机制的研究 | 第70-96页 |
| ·引言 | 第70-71页 |
| ·材料与方法 | 第71-78页 |
| ·细胞株 | 第71页 |
| ·主要试剂和抗体 | 第71-72页 |
| ·实验仪器 | 第72页 |
| ·实验缓冲液 | 第72页 |
| ·细胞培养 | 第72-73页 |
| ·MTT 法测定细胞生存率 | 第73页 |
| ·DAPI 染色实验 | 第73页 |
| ·细胞周期检测 | 第73页 |
| ·Annexin V-FITC/PI 双染法检测细胞凋亡 | 第73-74页 |
| ·全细胞裂解液的制备 | 第74页 |
| ·BCA 法测定蛋白质浓度 | 第74页 |
| ·免疫印迹分析 | 第74-75页 |
| ·体外 Caspases 酶活力测定 | 第75页 |
| ·线粒体与细胞浆的分离 | 第75-76页 |
| ·线粒体膜电位去极化的测定 | 第76页 |
| ·质粒构建(pCS4-Bcl-xL 和 pCS4-XIAP) | 第76-77页 |
| ·DNA 转染试验 | 第77-78页 |
| ·实验结果 | 第78-92页 |
| ·新型小分子化合物 JRS-15 | 第78页 |
| ·JRS-15 对多种肿瘤细胞具有细胞毒性作用 | 第78-80页 |
| ·JRS-15 诱导多种肿瘤细胞凋亡 | 第80-83页 |
| ·JRS-15 诱导 Caspase-9 活性依赖的 HeLa 细胞凋亡 | 第83-85页 |
| ·JRS-15 触发细胞线粒体途径介导的 HeLa 细胞凋亡 | 第85-87页 |
| ·JRS-15 下调 HeLa 细胞中 Bcl-xL 和 XIAP 蛋白质 | 第87-89页 |
| ·JRS-15 诱导 HeLa 细胞周期阻滞 | 第89-90页 |
| ·SK-HEP-1 细胞中 Caspase-9 低表达可能是其对 JRS-15产生耐受的主要原因 | 第90-92页 |
| ·讨论 | 第92-95页 |
| ·结论 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-114页 |
| 附录 重要的补充数据 | 第114-118页 |
| 附录 1 第二章补充数据 | 第114-115页 |
| 附录 2 第三章补充数据 | 第115-118页 |
| 作者简介 | 第118页 |
| 博士攻读期间，作为主要参与者承担并完成课题 | 第118页 |
| 在读期间获奖情况 | 第118-120页 |
| 攻读博士期间发表的学术论文 | 第120-121页 |
| 致谢 | 第121页 |
