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RNAi沉默CCR2基因对人高转移性前列腺癌细胞株PC-3M增殖、凋亡、迁移和侵袭作用的影响

提要第1-5页
中文摘要第5-8页
Abstract第8-16页
前言第16-18页
第1章 文献回顾第18-34页
   ·前列腺癌的研究进展第18-21页
     ·基因治疗第18-19页
     ·基因治疗前列腺癌第19-20页
     ·基因治疗未来的发展第20-21页
   ·RNAi 与基因治疗第21-27页
     ·RNAi 的作用机制第21-22页
     ·siRNA 在抗肿瘤中可能扮演的角色第22-24页
     ·siRNA 技术在癌症治疗方面的发展第24-25页
     ·RNAi 技术的不足之处第25-27页
   ·CCL2 的生物学效应第27-34页
     ·CCL2 概要第27-28页
     ·CCL2 的表达第28-29页
     ·CCL2 的功能第29-30页
     ·CCL2 在前列腺癌中的作用第30-31页
     ·CCL2 在肿瘤中作用的冲突报道第31页
     ·CCR2——CCL2 的功能性受体第31-34页
第2章 材料和方法第34-60页
   ·实验材料和设备第34-42页
     ·主要试剂及配制方法第34-40页
     ·质粒第40-41页
     ·实验细胞株第41页
     ·主要仪器第41-42页
   ·实验方法第42-60页
     ·应用基因工程技术构建特异性干涉人 CCR2 mRNA 的siRNA 真核表达载体 pGC siRNA- CCR227第42-47页
     ·复苏细胞方法第47-48页
     ·细胞冻存第48页
     ·细胞培养与传代第48-49页
     ·细胞转染第49-50页
     ·MTT 实验检测细胞增殖第50-51页
     ·划痕试验检测细胞迁移能力第51页
     ·Transwell 检测细胞侵袭能力第51-52页
     ·RT-PCR 方法检测细胞中 mRNA 的表达第52-56页
     ·Western blot 方法检测蛋白表达第56-59页
     ·统计学分析第59-60页
第3章 实验结果第60-74页
   ·重组质粒 pGCSi-CCR2 的构建第60-61页
   ·PC-3M 细胞的转染效率和 CCR2 的干涉效率第61-64页
     ·PC-3M 细胞的转染效率第61-62页
     ·转染重组质粒 pGCSi-CCR2 能够显著干涉 CCR2 基因在PC-3M 细胞中表达第62-64页
   ·pGCSi-CCR2 重组质粒对高转移性前列腺癌细胞株 PC-3M 细胞增殖和凋亡的作用第64-69页
     ·倒置显微镜观察转染重组质粒后 PC-3M 的细胞形态第64页
     ·干涉 CCR2 的表达能够显著抑制 PC-3M 细胞增殖第64-65页
     ·干涉 CCR2 的表达能够显著促进 PC-3M 细胞凋亡第65-66页
     ·干涉 CCR2 基因表达能够抑制增殖和凋亡相关基因的表达第66-69页
   ·pGCSi-CCR2 重组质粒对高转移性前列腺癌细胞株 PC-3M 细胞迁移和侵袭的作用第69-74页
     ·干涉 CCR2 基因表达能够抑制 PC-3M 细胞迁移第69-71页
     ·干涉 CCR2 基因表达能够抑制 PC-3M 细胞侵袭第71-72页
     ·干涉 CCR2 基因表达能够抑制 PC-3M 细胞中 MMP-2和MMP9 基因的表达第72-74页
第4章 讨论第74-78页
结论第78-80页
参考文献第80-98页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第98-100页
致谢第100页

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