摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-15页 |
符号说明 | 第15-16页 |
第一章 前言 | 第16-24页 |
1 肝素的结构 | 第16-17页 |
2 肝素的生物合成过程 | 第17-18页 |
3 肝素的关键生物合成酶 | 第18-19页 |
·NDSTs | 第18-19页 |
·另外四种肝素生物合成关键酶 | 第19页 |
4 肝素与肥大细胞亚型 | 第19-20页 |
5 肥大细胞中肝素作用的初步研究 | 第20-21页 |
6 慢病毒载体介导的RNAi技术简介 | 第21-22页 |
7 本课题的研究内容 | 第22-24页 |
第二章 大鼠腹腔肥大细胞的分离与鉴定 | 第24-31页 |
1 材料 | 第24-25页 |
·试剂 | 第24页 |
·动物 | 第24页 |
·仪器 | 第24-25页 |
2 方法 | 第25-27页 |
·溶液配制 | 第25页 |
·RPMC提取 | 第25-26页 |
·阿利新蓝-蕃红染色法鉴别RPMC | 第26页 |
·硫酸小檗碱染色法鉴别RPMC | 第26-27页 |
·流式细胞术间标法鉴定RPMC纯度 | 第27页 |
3 结果 | 第27-29页 |
·RPMC提取 | 第27页 |
·阿利新蓝-蕃红染色法鉴别RPMC | 第27-28页 |
·硫酸小檗碱染色法鉴别RPMC | 第28-29页 |
·流式细胞术间标法鉴定RPMC纯度 | 第29页 |
4 讨论 | 第29-31页 |
第三章 RPMC体外长期培养 | 第31-43页 |
1 材料 | 第31-32页 |
·试剂 | 第31-32页 |
·动物 | 第32页 |
·仪器 | 第32页 |
2 方法 | 第32-34页 |
·溶液配制 | 第32页 |
·RPMC提取 | 第32页 |
·RPMC培养 | 第32-33页 |
·阿利新蓝-蕃红染色 | 第33-34页 |
3 结果 | 第34-40页 |
·培养第7天阿利新蓝-蕃红染色 | 第34-37页 |
·培养第14天阿利新蓝-蕃红染色 | 第37-39页 |
·培养第21天阿利新监-蕃红染色 | 第39-40页 |
4 讨论 | 第40-43页 |
第四章 慢病毒介导抑制RPMC中NDST-2表达 | 第43-57页 |
1 材料 | 第43-44页 |
·试剂 | 第43-44页 |
·动物 | 第44页 |
·仪器 | 第44页 |
2 方法 | 第44-49页 |
·溶液配制 | 第44-46页 |
·慢病毒最佳感染条件的确定 | 第46页 |
·嘌呤霉素RPMC细胞最低至死浓度筛选 | 第46页 |
·Western Blot筛选最佳干扰序列 | 第46-49页 |
3 结果 | 第49-55页 |
·慢病毒在RPMC中最佳感染条件的确定 | 第49-54页 |
·嘌呤霉素RPMC细胞最低至死浓度 | 第54页 |
·Western Blot筛选最佳干扰序列 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-57页 |
第五章 NDST-2抑制后RPMC形态及脱颗粒功能的变化 | 第57-70页 |
1 材料 | 第57-58页 |
·试剂 | 第57-58页 |
·动物 | 第58页 |
·仪器 | 第58页 |
2 方法 | 第58-60页 |
·溶液配制 | 第58-59页 |
·阿利新蓝-蕃红染色观察RPMC中肝素含量及细胞形态变化 | 第59页 |
·慢病毒干扰NDS-2合成后RPMC脱颗粒介质的检测 | 第59-60页 |
·荧光观察慢病毒于扰NDS-2后RPMC脱颗粒过程 | 第60页 |
3 结果 | 第60-66页 |
·阿利新蓝-蕃红染色观察干扰后的RPMC | 第61-62页 |
·慢病毒干扰后脱颗粒介质的检测 | 第62-64页 |
·荧光观察慢病毒干扰后RPMC脱颗粒过程 | 第64-66页 |
4 讨论 | 第66-70页 |
·阿利新蓝-蕃红染色观察干扰后的RPMC | 第66-67页 |
·NDST-2干扰后RPMC胞内介质含量的变化 | 第67-68页 |
·NDST-2干扰后RPMC脱颗粒反应的变化 | 第68-70页 |
总结 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第77-78页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第78页 |