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siRNA靶向抑制肝素生物合成酶NDST-2以揭示肝素在肥大细胞中的天然活性

摘要第1-12页
ABSTRACT第12-15页
符号说明第15-16页
第一章 前言第16-24页
 1 肝素的结构第16-17页
 2 肝素的生物合成过程第17-18页
 3 肝素的关键生物合成酶第18-19页
   ·NDSTs第18-19页
   ·另外四种肝素生物合成关键酶第19页
 4 肝素与肥大细胞亚型第19-20页
 5 肥大细胞中肝素作用的初步研究第20-21页
 6 慢病毒载体介导的RNAi技术简介第21-22页
 7 本课题的研究内容第22-24页
第二章 大鼠腹腔肥大细胞的分离与鉴定第24-31页
 1 材料第24-25页
   ·试剂第24页
   ·动物第24页
   ·仪器第24-25页
 2 方法第25-27页
   ·溶液配制第25页
   ·RPMC提取第25-26页
   ·阿利新蓝-蕃红染色法鉴别RPMC第26页
   ·硫酸小檗碱染色法鉴别RPMC第26-27页
   ·流式细胞术间标法鉴定RPMC纯度第27页
 3 结果第27-29页
   ·RPMC提取第27页
   ·阿利新蓝-蕃红染色法鉴别RPMC第27-28页
   ·硫酸小檗碱染色法鉴别RPMC第28-29页
   ·流式细胞术间标法鉴定RPMC纯度第29页
 4 讨论第29-31页
第三章 RPMC体外长期培养第31-43页
 1 材料第31-32页
   ·试剂第31-32页
   ·动物第32页
   ·仪器第32页
 2 方法第32-34页
   ·溶液配制第32页
   ·RPMC提取第32页
   ·RPMC培养第32-33页
   ·阿利新蓝-蕃红染色第33-34页
 3 结果第34-40页
   ·培养第7天阿利新蓝-蕃红染色第34-37页
   ·培养第14天阿利新蓝-蕃红染色第37-39页
   ·培养第21天阿利新监-蕃红染色第39-40页
 4 讨论第40-43页
第四章 慢病毒介导抑制RPMC中NDST-2表达第43-57页
 1 材料第43-44页
   ·试剂第43-44页
   ·动物第44页
   ·仪器第44页
 2 方法第44-49页
   ·溶液配制第44-46页
   ·慢病毒最佳感染条件的确定第46页
   ·嘌呤霉素RPMC细胞最低至死浓度筛选第46页
   ·Western Blot筛选最佳干扰序列第46-49页
 3 结果第49-55页
   ·慢病毒在RPMC中最佳感染条件的确定第49-54页
   ·嘌呤霉素RPMC细胞最低至死浓度第54页
   ·Western Blot筛选最佳干扰序列第54-55页
 4 讨论第55-57页
第五章 NDST-2抑制后RPMC形态及脱颗粒功能的变化第57-70页
 1 材料第57-58页
   ·试剂第57-58页
   ·动物第58页
   ·仪器第58页
 2 方法第58-60页
   ·溶液配制第58-59页
   ·阿利新蓝-蕃红染色观察RPMC中肝素含量及细胞形态变化第59页
   ·慢病毒干扰NDS-2合成后RPMC脱颗粒介质的检测第59-60页
   ·荧光观察慢病毒于扰NDS-2后RPMC脱颗粒过程第60页
 3 结果第60-66页
   ·阿利新蓝-蕃红染色观察干扰后的RPMC第61-62页
   ·慢病毒干扰后脱颗粒介质的检测第62-64页
   ·荧光观察慢病毒干扰后RPMC脱颗粒过程第64-66页
 4 讨论第66-70页
   ·阿利新蓝-蕃红染色观察干扰后的RPMC第66-67页
   ·NDST-2干扰后RPMC胞内介质含量的变化第67-68页
   ·NDST-2干扰后RPMC脱颗粒反应的变化第68-70页
总结第70-71页
参考文献第71-76页
致谢第76-77页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第77-78页
学位论文评阅及答辩情况表第78页

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