致谢 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-12页 |
Abstract | 第12-18页 |
中英文/缩写词对照表 | 第18-19页 |
目次 | 第19-22页 |
引言 | 第22-26页 |
实验仪器与材料 | 第26-29页 |
1 仪器 | 第26页 |
2 主要实验试剂 | 第26-28页 |
3 实验动物及细胞株 | 第28-29页 |
实验方法 | 第29-40页 |
1 细胞培养 | 第29-32页 |
·3T3细胞培养 | 第29页 |
·MEF细胞培养 | 第29页 |
·小鼠ES细胞的支持培养 | 第29页 |
·胚胎干细胞测试体系对受试物的心肌发育毒性评价 | 第29-32页 |
·受试物心肌发育毒性评价 | 第32页 |
2 SILAC法进行同位素氨基酸标记 | 第32页 |
·ES细胞标记 | 第32页 |
·分化细胞标记 | 第32页 |
3. 差异蛋白组学分析 | 第32-37页 |
·样本平行性测试及标记率检测 | 第32-34页 |
·差异蛋白检测 | 第34-37页 |
4 逆转录-聚合酶链反应 | 第37-38页 |
·收集样本 | 第37页 |
·Trizol法提取细胞总mRNA | 第37页 |
·逆转录 | 第37页 |
·PCR扩增 | 第37-38页 |
5 Western-blot检测蛋白表达 | 第38-39页 |
6 流式细胞术定量检测 | 第39页 |
7 荧光显微镜检测EBs内ROS水平 | 第39页 |
8 数据分析 | 第39-40页 |
第一部分 基于EST模型的全氟烷基化合物致心肌发育毒性作用研究 | 第40-48页 |
1、实验结果 | 第40-45页 |
·EST体系有效性验证 | 第40-42页 |
·利用EST模型检测全氟烷基化合物的心肌发育毒性 | 第42-43页 |
·PFOS对ES细胞向心肌分化过程中形态的影响 | 第43页 |
·RT-PCR检测PFOS对ES细胞向心肌分化过程中基因表达情况 | 第43页 |
·流式细胞术、Western blot方法检测心肌特异性蛋白表达 | 第43-45页 |
2 讨论 | 第45-47页 |
3 小结 | 第47-48页 |
第二部分 PFOS心肌发育毒性作用的差异蛋白组学研究 | 第48-84页 |
1 实验结果 | 第48-78页 |
·SILAC差异蛋白组学 | 第48-59页 |
·Gene Ontology分析 | 第59-67页 |
·表达谱KEGG通路分析 | 第67-69页 |
·Network分析 | 第69-74页 |
·PFOS心肌发育毒性相关机制研究 | 第74-78页 |
2 讨论 | 第78-82页 |
3 小结 | 第82-84页 |
总结 | 第84-85页 |
论文创新点 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-90页 |
文献综述 胚胎干细胞测试体系在药理毒理学中的应用 | 第90-100页 |
参考文献 | 第96-100页 |
作者简历及在读期间所取得的科研成果 | 第100-101页 |