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一株产功能成分DMC的水翁内生真菌的分离鉴定及其发酵的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
第一章 前言第10-23页
   ·植物内生菌研究现状第10-15页
     ·植物内生菌的发现第10-11页
     ·植物内生菌的生物多样性第11页
     ·植物内生菌的生物学作用第11-13页
       ·植物内生菌促进植物生长第11-12页
       ·植物内生菌增强宿主植物抗性第12页
       ·植物内生菌促进宿主植物活性成分的产生与积累第12-13页
     ·植物内生菌次生代谢产物的多样性第13-14页
     ·植物内生菌的潜在应用价值第14-15页
     ·植物内生菌研究过程中存在的问题第15页
   ·微生物发酵生产次级代谢产物的研究第15-19页
     ·次级代谢产物与初级代谢产物关系第15-16页
     ·次级代谢产物的调节第16-19页
       ·碳、氮源对次级代谢产物合成的影响第16-17页
       ·磷酸盐、金属离子对次级代谢产物合成的影响第17-18页
       ·生物合成前体供应对次级代谢产物合成的影响第18-19页
       ·外界条件对次级代谢产物合成的影响第19页
   ·水翁及其活性成分DMC的研究进展第19-21页
     ·水翁概述第19-20页
     ·DMC的化学结构及生物活性第20页
     ·DMC的来源第20-21页
   ·立题依据及主要研究内容第21-23页
     ·立题依据第21页
     ·主要研究内容第21-23页
第二章 一般实验材料与方法第23-26页
   ·常用的实验材料第23-24页
     ·培养基第23页
     ·常用试剂第23-24页
     ·一般化学试剂第24页
   ·仪器与设备第24页
   ·常用实验方法第24-26页
     ·菌株发酵产物处理方法第24-25页
     ·DMC的HPLC检测条件第25-26页
第三章 水翁内生真菌的分离与保藏第26-31页
   ·实验材料第26-27页
     ·供试植物材料第26页
     ·主要试剂与仪器第26-27页
     ·培养基配制第27页
   ·实验方法第27-28页
     ·水翁外植体的预处理第27页
     ·水翁外植体消毒及内生真菌的分离第27页
     ·新鲜水翁组织内部菌丝观察第27页
     ·水翁内生真菌的纯化第27-28页
     ·水翁内生真菌保藏第28页
   ·结果分析与讨论第28-30页
     ·水翁外植体消毒时间确定第28页
     ·新鲜水翁组织内部菌丝观察第28-29页
     ·水翁内生真菌的分离纯化第29-30页
     ·水翁内生真菌在不同组织部位中的分布第30页
   ·小结第30-31页
第四章 产功能成分DMC的菌株筛选第31-35页
   ·实验材料第31-32页
     ·实验菌株第31页
     ·主要试剂与仪器第31-32页
     ·培养基配制第32页
   ·实验方法第32页
     ·水翁内生真菌的摇瓶培养第32页
     ·水翁内生真菌发酵产物处理及DMC的HPLC检测条件第32页
     ·产DMC菌株筛选方法第32页
   ·结果与分析第32-34页
   ·讨论第34页
   ·小结第34-35页
第五章 水翁内生真菌DMC1106代谢产物DMC及其菌种鉴定第35-47页
   ·实验材料第35-36页
     ·菌株与引物第35页
     ·主要试剂与仪器第35-36页
     ·培养基配制第36页
   ·实验方法第36-38页
     ·种子液制备和液体摇瓶培养第36页
     ·菌株DMC1106发酵代谢产物DMC的鉴定第36-37页
       ·DMC的提取及HPLC检测第36页
       ·LC-HR-MS/MS分析第36-37页
     ·菌株DMC1106菌落形态观察第37页
     ·菌株DMC1106显微形态观察第37页
     ·菌株DMC1106ITS序列测定及分析第37-38页
   ·结果与分析第38-46页
     ·菌株DMC1106发酵产物的高效液相色谱分析第38-39页
     ·菌株DMC1106发酵产物的高分辨率质谱分析第39-41页
     ·菌株DMC1106菌落形态观察结果第41页
     ·菌株DMC1106显微形态观察结果第41-42页
     ·菌株DMC1106摇瓶培养形态观察结果第42-44页
     ·菌株DMC1106ITS序列测定及系统进化树分析第44-46页
   ·讨论第46页
   ·小结第46-47页
第六章 Ceriporia lacerata DMC1106发酵生产DMC初步研究第47-69页
   ·实验材料第47页
     ·培养基第47页
     ·试剂与器材第47页
   ·实验方法第47-49页
     ·种子液制备及液体发酵培养基础条件第47-48页
     ·液体发酵产物DMC的提取及菌株生物量的测定第48页
     ·DMC含量测定第48-49页
       ·DMC标准品溶液的配置第48页
       ·DMC的高效液相分析第48-49页
   ·实验内容第49-51页
     ·Ceriporia lacerata DMC1106发酵生长周期第49页
     ·Ceriporia lacerata DMC1106发酵的单因素优化实验第49-50页
     ·统计学方法优化Ceriporia lacerata DMC1106发酵培养基第50页
     ·验证实验第50页
     ·数据统计与分析第50-51页
   ·结果与分析第51-68页
     ·标准曲线的制备第51页
     ·精密度实验第51页
     ·稳定性实验第51-52页
     ·重现性实验第52页
     ·Ceriporia lacerata DMCl 106 发酵样品测定结果第52-53页
     ·Ceriporia lacerata DMC1106发酵生长周期特性第53页
     ·Cerporia lacerata DMC1106发酵的单因素优化第53-61页
     ·Placket-Burman设计实验筛选发酵培养基中的关键因素第61-63页
     ·最陡爬坡设计实验筛选培养基组分中关键因素的最佳区域第63页
     ·Box-Behnken响应面设计实验筛选关键因素的最优水平第63-67页
     ·验证实验分析第67-68页
   ·讨论第68页
   ·小结第68-69页
第七章 结论第69-70页
   ·主要结论第69页
   ·主要创新点第69-70页
参考文献第70-76页
致谢第76-77页
硕士期间研究成果第77页

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