| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-35页 |
| ·盐度对甲壳动物部分生理影响的研究进展 | 第17-27页 |
| ·盐度对甲壳动物生长性能和成活率的影响 | 第18-20页 |
| ·盐度对甲壳动物呼吸代谢和能量收支的影响 | 第20-21页 |
| ·盐度和营养素对甲壳动物营养生理的影响 | 第21-24页 |
| ·盐度对甲壳动物渗透调节的影响 | 第24-26页 |
| ·盐度对甲壳动物离子转运酶的影响 | 第24-25页 |
| ·盐度对甲壳动物血淋巴渗透压的影响 | 第25-26页 |
| ·盐度对甲壳动物免疫机制的影响 | 第26-27页 |
| ·SSH 在甲壳动物应用中的研究进展 | 第27-32页 |
| ·SSH 技术在甲壳动物抗病毒机理研究中的应用 | 第29-30页 |
| ·SSH 技术在甲壳动物抗菌机理研究中的应用 | 第30页 |
| ·SSH 技术在甲壳动物免疫基因研究中的应用 | 第30-31页 |
| ·SSH 技术在甲壳动物发育分化基因研究中的应用 | 第31页 |
| ·SSH 技术在甲壳动物抗逆机理研究中的应用 | 第31-32页 |
| ·目的和意义 | 第32-34页 |
| ·技术路线 | 第34-35页 |
| 第二章 长期低盐胁迫诱导凡纳滨对虾肝胰脏抑制性消减杂交文库的构建，筛选及 ESTs 分析 | 第35-67页 |
| 摘要 | 第35页 |
| 1 引言 | 第35-36页 |
| 2 材料与方法 | 第36-51页 |
| ·实验材料 | 第36-38页 |
| ·实验动物分组及饲养管理 | 第36页 |
| ·取样 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36-37页 |
| ·主要仪器 | 第37页 |
| ·常用溶液配制 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-51页 |
| ·肝胰脏总 RNA 提取 | 第38页 |
| ·mRNA 的分离 | 第38-39页 |
| ·mRNA 的分离预处理 | 第38-39页 |
| ·mRNA 的纯化 | 第39页 |
| ·抑制性消减杂交文库的构建 | 第39-46页 |
| ·第一链 cDNA 合成 | 第40-41页 |
| ·第二链 cDNA 合成 | 第41-42页 |
| ·RsaⅠ酶切反转录产物 | 第42页 |
| ·接头的连接 | 第42-43页 |
| ·两轮消减杂交 | 第43-44页 |
| ·第一轮杂交 | 第43-44页 |
| ·第二轮杂交 | 第44页 |
| ·两轮消减 PCR 鉴定 | 第44-46页 |
| ·第一轮 PCR 扩增 | 第45页 |
| ·第二轮 PCR 扩增 | 第45-46页 |
| ·消减 cDNA 文库的构建与效率评价 | 第46-49页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第46-47页 |
| ·接头连接效率检测 | 第47-48页 |
| ·消减杂交效率检测 | 第48-49页 |
| ·cDNA 文库的筛选 | 第49-51页 |
| ·PCR 产物的连接转化 | 第49页 |
| ·PCR 筛选 | 第49-50页 |
| ·斑点杂交筛选 | 第50-51页 |
| ·EST 测序和序列处理 | 第51页 |
| ·高质量 EST 的拼接与注释 | 第51页 |
| ·数据处理和统计分析 | 第51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-54页 |
| ·盐度对凡纳滨对虾生长性能和成活率的影响 | 第51-52页 |
| ·肝胰腺组织总 RNA 质量检测 | 第52页 |
| ·双链 cDNA 的合成及 RsaⅠ消化分析结果 | 第52页 |
| ·接头连接效率检测结果 | 第52-53页 |
| ·SSH 文库消减效率检测 | 第53页 |
| ·文库插入片段大小鉴定结果 | 第53页 |
| ·表达序列标签（EST）分析 | 第53-54页 |
| ·EST 的分类和功能注释 | 第54页 |
| 4 结论与讨论 | 第54-61页 |
| ·长期低渗胁迫凡纳滨对虾模型的构建 | 第55页 |
| ·SSH 文库的构建和 ESTs 分析 | 第55-57页 |
| ·文库中胁迫响应功能基因分析 | 第57-61页 |
| ·免疫相关基因 | 第57-58页 |
| ·代谢相关基因 | 第58-59页 |
| ·其它基因 | 第59-61页 |
| 附表和图 | 第61-67页 |
| 第三章 低盐诱导差异表达基因的实时荧光定量 PCR 分析 | 第67-83页 |
| 摘要 | 第67页 |
| 1 引言 | 第67-68页 |
| 2 材料与方法 | 第68-71页 |
| ·实验材料 | 第68-69页 |
| ·实验动物分组及饲养管理 | 第68-69页 |
| ·取样 | 第69页 |
| ·实验方法 | 第69-71页 |
| ·肝胰腺总 RNA 提取 | 第69页 |
| ·cDNA 第一链合成 | 第69页 |
| ·实时荧光定量 PCR 分析 | 第69-71页 |
| ·引物设计 | 第70页 |
| ·荧光定量 PCR 反应体系配制 | 第70页 |
| ·标准曲线制作 | 第70-71页 |
| ·荧光定量 PCR 数据的处理 | 第71页 |
| ·数据处理和统计分析 | 第71页 |
| 3 结果与分析 | 第71-73页 |
| ·盐度对凡纳滨对虾成活率的影响 | 第71页 |
| ·肝胰腺组织总 RNA 提取 | 第71-72页 |
| ·熔解曲线 | 第72页 |
| ·实时荧光定量 PCR 分析 | 第72-73页 |
| 4 讨论 | 第73-78页 |
| 附表和图 | 第78-83页 |
| 第四章 凡纳滨对虾儿茶酚-氧位-甲基转移酶基因克隆和表达分析 | 第83-100页 |
| 摘要 | 第83页 |
| 1 引言 | 第83-84页 |
| 2 材料与方法 | 第84-90页 |
| ·实验材料 | 第84页 |
| ·主要试剂 | 第84页 |
| ·主要仪器 | 第84-85页 |
| ·总 RNA 的提取和第一链 cDNA 的合成 | 第85页 |
| ·肝胰腺总 RNA 提取 | 第85页 |
| ·第一链 cDNA 的合成 | 第85页 |
| ·LvCOMT cDNA 的基因克隆 | 第85-89页 |
| ·LvCOMT cDNA 片段的获得 | 第85页 |
| ·LvCOMT cDNA 片段的连接转化 | 第85页 |
| ·LvCOMT 基因的 5’-RACE | 第85-88页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第85-86页 |
| ·用 GLASSMAX DNA 分离 S.N.A.P.柱对 cDNA 进行纯化 | 第86-87页 |
| ·对 cDNA 进行 TdT 加尾 | 第87页 |
| ·使用引物 GSP-2 和试剂盒里面带的桥连铆钉引物 AAP 对已经加 dC 尾的cDNA 进行 PCR 第一轮扩增 | 第87-88页 |
| ·使用引物 GSP-3 和试剂盒里面带的桥连通用扩增引物 AUAP 进行巢式 PCR 第二轮扩增 | 第88页 |
| ·LvCOMT 基因的 3’RACE 扩增 | 第88-89页 |
| ·LvCOMT 基因全长的获得 | 第89页 |
| ·LvCOMT cDNA 全长生物学信息分析 | 第89页 |
| ·LvCOMT mRNA 表达的实时荧光定量 PCR 分析 | 第89-90页 |
| 3 实验结果 | 第90-92页 |
| ·总 RNA 的提取及检测 | 第90页 |
| ·LvCOMT cDNA 全长克隆的结果 | 第90页 |
| ·LvCOMT cDNA 特征的分析 | 第90-91页 |
| ·LvCOMT 基因序列比对与系统发育分析 | 第91页 |
| ·LvCOMT 基因的组织表达分布 | 第91-92页 |
| 4 讨论 | 第92-93页 |
| 附表和图 | 第93-100页 |
| 第五章 凡纳滨对虾钙网蛋白基因克隆和表达分析 | 第100-113页 |
| 摘要 | 第100页 |
| 1 引言 | 第100-101页 |
| 2 材料与方法 | 第101页 |
| 3 实验结果 | 第101-103页 |
| ·总 RNA 的提取及检测 | 第101页 |
| ·LvCRT cDNA 克隆的结果 | 第101-102页 |
| ·LvCRT cDNA 特征的分析 | 第102页 |
| ·LvCRT 基因序列比对与系统发育分析 | 第102-103页 |
| ·LvCRT 基因的组织表达分布 | 第103页 |
| 4 讨论 | 第103-105页 |
| 附表和图 | 第105-113页 |
| 参考文献 | 第113-128页 |
| 致谢 | 第128页 |
