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球孢白僵菌T-DNA插入突变体Mu10的获得

目录第1-8页
中文摘要第8-10页
Abstract第10-13页
第一章 文献综述第13-23页
   ·昆虫病原真菌的研究现状第13-14页
   ·昆虫病原真菌致病昆虫的过程与机理第14-18页
     ·昆虫病原真菌孢子对昆虫体壁的附着第15页
     ·孢子萌发与侵染结构的形成第15-17页
     ·穿透与致病过程第17-18页
   ·昆虫病原真菌的功能基因研究第18-23页
     ·昆虫病原真菌的基因组测序进展第18-19页
     ·基于蛋白组学的昆虫病原真菌的研究进展第19页
     ·根癌农杆菌介导的遗传转化(Agrobacterium-Mediated Transformation,AMT)第19-23页
第二章 引言第23-25页
   ·研究背景和意义第23-24页
   ·技术路线第24-25页
第三章 材料与方法第25-37页
   ·材料第25-28页
     ·菌株及主要载体第25页
     ·主要试剂第25-26页
     ·主要仪器设备第26页
     ·主要缓冲液配方第26-27页
     ·主要培养基配方第27-28页
   ·方法第28-37页
     ·大肠杆菌感受态的制备与转化第28页
     ·电转化农杆菌感受态的制备与转化第28-29页
     ·转化子的获得第29页
     ·球孢白僵菌基因组DNA的提取第29-30页
     ·转化子筛选与验证第30页
     ·生物测定第30-31页
     ·突变体T-DNA侧翼序列的克隆第31页
     ·序列分析比对第31页
     ·插入突变体的生物学测定第31-32页
     ·真菌胞内糖及糖醇提取及测定第32页
     ·Southern杂交第32-33页
     ·同源重组载体的构建第33-34页
     ·农杆菌介导球孢白僵菌的遗传转化及同源重组转化子的筛选第34页
     ·分子验证同源重组转化子第34-37页
第四章 结果与分析第37-51页
   ·突变体的获得第37-40页
     ·突变体的筛选第37-38页
     ·突变体的毒力分析第38-40页
   ·突变体的生物学测定第40-44页
     ·高渗条件下突变体的表型观察第40-41页
     ·高温条件下突变体的表型观察第41页
     ·突变体的生物量测定第41-42页
     ·突变体的产孢量分析第42-43页
     ·突变体的萌发率测定第43-44页
   ·突变体胞内糖及糖醇的测定第44-46页
   ·突变体的T-DNA插入拷贝数分析第46页
   ·突变体Mu10 T-DNA插入侧翼序列的克隆第46-47页
   ·T-DNA侧翼序列的拷贝数分析第47页
   ·同源重组转化子的筛选及分子验证第47-51页
第五章 讨论第51-55页
   ·球孢白僵菌突变体的筛选第51页
   ·突变体Mu10的毒力分析第51-52页
   ·突变体Mu10生物学性状第52页
   ·真菌胞内糖醇含量的变化第52-53页
   ·T-DNA插入破坏序列的分析第53-55页
第六章 结论第55-57页
   ·突变体的筛选与T-DNA侧翼序列的克隆第55页
   ·突变体的毒力分析第55页
   ·突变体的生物学性状分析第55-57页
参考文献第57-61页
附录第61-63页
致谢第63页

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