中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第1章 绪论 | 第11-19页 |
·Tmeff2 基因 | 第11页 |
·Tmeff2 基因对神经元的营养功能研究 | 第11-12页 |
·Tmeff2 基因与癌症的关系 | 第12-16页 |
·Tmeff2 基因在肠道系统中发挥的作用 | 第16页 |
·Tmeff2 基因与血小板衍生的生长因子相互作用 | 第16-19页 |
第2章 TMEFF2 基因敲除鼠的构建 | 第19-39页 |
·材料与方法 | 第19-26页 |
·实验材料及试剂 | 第19-20页 |
·实验溶液的配制 | 第20-22页 |
·Tmeff2plap基因打靶质粒构建 | 第22页 |
·ES(Embryonic Stem)细胞培养 | 第22-23页 |
·Tmeff2plapES 细胞的筛选以及杂合子的转基因鼠(Tmeff2+/-)的获得 | 第23页 |
·鉴定转基因鼠的基因型 | 第23-24页 |
·原位杂交探针的制作 | 第24页 |
·原位杂交实验(in situ hybridization) | 第24-26页 |
·实验结果 | 第26-36页 |
·Tmeff2plap转基因鼠的构建 | 第26-33页 |
·Tmeff2plap 质粒构建 | 第26-29页 |
·ES 细胞的筛选 | 第29-31页 |
·Tmeff2 基因敲除鼠基因型及其敲除情况鉴定 | 第31-33页 |
·Tmeff2 基因敲除鼠表征的初步检测 | 第33-36页 |
·讨论 | 第36-37页 |
本章小结 | 第37-39页 |
第3章 TMEFF2 基因的体内功能研究 | 第39-73页 |
·材料与方法 | 第39-42页 |
·试剂 | 第39页 |
·多聚甲醛(Paraformaldehyde,PFA)小鼠心脏灌注实验 | 第39-40页 |
·4%多聚甲醛/PBS 配置 | 第40页 |
·组织包埋 | 第40页 |
·AP 染色(Alkaline phosphatase staining)检测 PLAP 活性 | 第40-41页 |
·苏木精&伊红染色(Hematoxylin&Eosin staining,H&E)实验 | 第41页 |
·免疫组化实验(Immunostaining) | 第41页 |
·油红染色实验(Oil red staining) | 第41-42页 |
·实验结果 | 第42-69页 |
·Tmeff2 基因敲除小鼠各个器官组织细胞形态学检测 | 第42-45页 |
·Tmeff2 基因在转基因小鼠体内表达情况 | 第45-51页 |
·Tmeff2 基因对神经系统的影响研究 | 第51-60页 |
·免疫杂交方法探究 Tmeff2 基因对神经系统影响 | 第51-59页 |
·细胞色素氧化酶染色检测 Tmeff2-/-小鼠胡须体觉皮层组织结构的分布情况 | 第59-60页 |
·Tmeff2 基因敲除小鼠对脂肪组织的影响 | 第60-69页 |
·Tmeff2 基因对小鼠食欲的影响 | 第62-63页 |
·Tmeff2 基因对小鼠消化神经系统的影响 | 第63-65页 |
·Tmeff2 基因敲除小鼠脂肪代谢相关器官的检测 | 第65-67页 |
·Tmeff2 基因在脂肪组织中的表达及其影响 | 第67-69页 |
·讨论 | 第69-70页 |
本章小结 | 第70-73页 |
第4章 TMEFF2 基因影响脂肪组织的途径和功能研究 | 第73-83页 |
·材料与方法 | 第73-75页 |
·试剂 | 第73页 |
·小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts)培养 | 第73-74页 |
·分离和处理原代小鼠胚胎成纤维细胞(Primary mouse embryonic fibroblasts,MEFs) | 第74页 |
·MEF 细胞诱导成脂类细胞 | 第74-75页 |
·冻存 MEF 细胞的复苏 | 第75页 |
·TGF-β抑制 MEF 细胞转换成脂类细胞的换液 | 第75页 |
·实验结果 | 第75-80页 |
·Tmeff2 基因对 MEF 细胞转化成脂类细胞的影响 | 第76-77页 |
·激活 PPAR-γ通路诱导 Tmeff2 基因在细胞中大量表达 | 第77-78页 |
·Tmeff2 基因通过抑制转化生长因子-β(TGF-β)通路进而影响脂肪合成 | 第78-80页 |
·讨论 | 第80-81页 |
本章小结 | 第81-83页 |
全文结论 | 第83-85页 |
参考文献 | 第85-97页 |
博士期间发表的学术论文 | 第97-98页 |
致谢 | 第98页 |