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TMEFF2基因敲除导致老鼠的生长发育迟缓和白色脂肪组织严重的缺失

中文摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第1章 绪论第11-19页
   ·Tmeff2 基因第11页
   ·Tmeff2 基因对神经元的营养功能研究第11-12页
   ·Tmeff2 基因与癌症的关系第12-16页
   ·Tmeff2 基因在肠道系统中发挥的作用第16页
   ·Tmeff2 基因与血小板衍生的生长因子相互作用第16-19页
第2章 TMEFF2 基因敲除鼠的构建第19-39页
   ·材料与方法第19-26页
     ·实验材料及试剂第19-20页
     ·实验溶液的配制第20-22页
     ·Tmeff2plap基因打靶质粒构建第22页
     ·ES(Embryonic Stem)细胞培养第22-23页
     ·Tmeff2plapES 细胞的筛选以及杂合子的转基因鼠(Tmeff2+/-)的获得第23页
     ·鉴定转基因鼠的基因型第23-24页
     ·原位杂交探针的制作第24页
     ·原位杂交实验(in situ hybridization)第24-26页
   ·实验结果第26-36页
     ·Tmeff2plap转基因鼠的构建第26-33页
       ·Tmeff2plap 质粒构建第26-29页
       ·ES 细胞的筛选第29-31页
       ·Tmeff2 基因敲除鼠基因型及其敲除情况鉴定第31-33页
     ·Tmeff2 基因敲除鼠表征的初步检测第33-36页
   ·讨论第36-37页
 本章小结第37-39页
第3章 TMEFF2 基因的体内功能研究第39-73页
   ·材料与方法第39-42页
     ·试剂第39页
     ·多聚甲醛(Paraformaldehyde,PFA)小鼠心脏灌注实验第39-40页
     ·4%多聚甲醛/PBS 配置第40页
     ·组织包埋第40页
     ·AP 染色(Alkaline phosphatase staining)检测 PLAP 活性第40-41页
     ·苏木精&伊红染色(Hematoxylin&Eosin staining,H&E)实验第41页
     ·免疫组化实验(Immunostaining)第41页
     ·油红染色实验(Oil red staining)第41-42页
   ·实验结果第42-69页
     ·Tmeff2 基因敲除小鼠各个器官组织细胞形态学检测第42-45页
     ·Tmeff2 基因在转基因小鼠体内表达情况第45-51页
     ·Tmeff2 基因对神经系统的影响研究第51-60页
       ·免疫杂交方法探究 Tmeff2 基因对神经系统影响第51-59页
       ·细胞色素氧化酶染色检测 Tmeff2-/-小鼠胡须体觉皮层组织结构的分布情况第59-60页
     ·Tmeff2 基因敲除小鼠对脂肪组织的影响第60-69页
       ·Tmeff2 基因对小鼠食欲的影响第62-63页
       ·Tmeff2 基因对小鼠消化神经系统的影响第63-65页
       ·Tmeff2 基因敲除小鼠脂肪代谢相关器官的检测第65-67页
       ·Tmeff2 基因在脂肪组织中的表达及其影响第67-69页
   ·讨论第69-70页
 本章小结第70-73页
第4章 TMEFF2 基因影响脂肪组织的途径和功能研究第73-83页
   ·材料与方法第73-75页
     ·试剂第73页
     ·小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts)培养第73-74页
     ·分离和处理原代小鼠胚胎成纤维细胞(Primary mouse embryonic fibroblasts,MEFs)第74页
     ·MEF 细胞诱导成脂类细胞第74-75页
     ·冻存 MEF 细胞的复苏第75页
     ·TGF-β抑制 MEF 细胞转换成脂类细胞的换液第75页
   ·实验结果第75-80页
     ·Tmeff2 基因对 MEF 细胞转化成脂类细胞的影响第76-77页
     ·激活 PPAR-γ通路诱导 Tmeff2 基因在细胞中大量表达第77-78页
     ·Tmeff2 基因通过抑制转化生长因子-β(TGF-β)通路进而影响脂肪合成第78-80页
   ·讨论第80-81页
 本章小结第81-83页
全文结论第83-85页
参考文献第85-97页
博士期间发表的学术论文第97-98页
致谢第98页

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