| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| ·奶牛乳房炎致病微生物的感染与预防的研究进展 | 第12-15页 |
| ·奶牛乳房炎的主要致病微生物 | 第12-13页 |
| ·奶牛乳房炎的症状及诊断 | 第13页 |
| ·奶牛乳房炎的预防措施 | 第13-15页 |
| ·乳房炎致病菌检测方法的研究进展 | 第15-18页 |
| ·链球菌检测方法研究进展 | 第15-17页 |
| ·金黄色葡萄球菌检测方法进展 | 第17-18页 |
| ·焦磷酸测序技术(Pyrosequencing)的研究进展及其应用 | 第18-20页 |
| ·焦磷酸测序技术的原理 | 第18页 |
| ·焦磷酸测序过程 | 第18-19页 |
| ·应用焦磷酸测序技术在致病微生物鉴定方面的研究 | 第19-20页 |
| 第二章 无乳链球菌 sip 基因和停乳链球菌 isp 基因的克隆与原核表达 | 第20-36页 |
| ·材料与方法 | 第20-27页 |
| ·材料 | 第20-22页 |
| ·方法 | 第22-27页 |
| ·结果 | 第27-35页 |
| ·isp 和 sip 基因的 PCR 扩增结果 | 第27页 |
| ·pMD19-T-sip 和 pMD19-T-isp 酶切结果 | 第27-28页 |
| ·sip 基因和 isp 基因的测序结果和序列比对结果 | 第28-33页 |
| ·sip 和 isp 基因重组质粒酶切结果 | 第33页 |
| ·SDS-PAGE 分析 | 第33-34页 |
| ·Western blot 检测表达产物结果 | 第34-35页 |
| ·小结 | 第35-36页 |
| 第三章 应用 PCR-焦磷酸测序法对奶牛乳房炎主要致病菌快速检测方法的建立 | 第36-58页 |
| ·材料与方法 | 第36-44页 |
| ·材料 | 第36-39页 |
| ·方法 | 第39-44页 |
| ·结果 | 第44-56页 |
| ·多重序列比对以及引物设计结果 | 第44-51页 |
| ·PCR 产物加入量优化结果 | 第51-52页 |
| ·焦磷酸测序测序结果 | 第52-56页 |
| ·统计分析结果 | 第56页 |
| ·小结 | 第56-58页 |
| 第四章 应用 PCR-焦磷酸测序方法检测奶牛乳房炎致病菌 | 第58-68页 |
| ·材料与方法 | 第58-60页 |
| ·材料 | 第58页 |
| ·方法 | 第58-60页 |
| ·结果 | 第60-67页 |
| ·特异性增菌结果 | 第60-61页 |
| ·对经特异性培养基培养后呈阳性的菌株进行 PCR 扩增 | 第61-67页 |
| ·小结 | 第67-68页 |
| 讨论 | 第68-70页 |
| 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 附录 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读学位期间取得的科研成果清单 | 第80页 |