| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| ·棉花黄萎病相关的研究 | 第12-14页 |
| ·棉花黄萎病概述 | 第12页 |
| ·抗棉花黄萎病基因的研究现状 | 第12-14页 |
| ·植物乙烯信号转导途径与植物抗病机制 | 第14-19页 |
| ·乙烯分子的合成及调控途径 | 第14页 |
| ·乙烯途径中的信号转导及乙烯信号在核内的转导 | 第14-16页 |
| ·乙烯在抗病反应中的作用 | 第16-17页 |
| ·乙烯诱导抗性反应 | 第17-18页 |
| ·乙烯参与植物抗黄萎病反应 | 第18-19页 |
| ·转录因子ERF的研究进展 | 第19-23页 |
| ·ERF族转录因子分类研究 | 第19页 |
| ·ERF转录因子的结构特点 | 第19-20页 |
| ·ERF转录因子功能 | 第20-23页 |
| ·ERF参与乙烯等多种信号转导途径 | 第20-21页 |
| ·ERF在信号转导途径中对下游基因表达的调控 | 第21-22页 |
| ·棉花中ERF转录因子研究 | 第22-23页 |
| ·研究目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 乙烯在棉花与黄萎病互作中作用的研究 | 第24-35页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·棉花材料和病原菌 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·实验主要试剂 | 第25页 |
| ·试验方法 | 第25-27页 |
| ·黄萎病菌培养及活化 | 第25-26页 |
| ·棉花黄萎病菌和乙烯利处理 | 第26-27页 |
| ·温室育苗 | 第26页 |
| ·棉花黄萎病菌接种 | 第26页 |
| ·乙烯利及1-MCP处理 | 第26页 |
| ·病情调查 | 第26-27页 |
| ·病原菌恢复培养 | 第27页 |
| ·实验结果 | 第27-33页 |
| ·喷施乙烯利对棉花黄萎病发病的影响 | 第27-28页 |
| ·喷施一定浓度乙烯利对陆地棉幼苗生长无影响 | 第27-28页 |
| ·喷施一定浓度的乙烯利可以增加陆地棉YZ1的抗病性 | 第28页 |
| ·乙烯抑制剂1-MCP对棉苗发病程度的影响 | 第28-29页 |
| ·喷施一定浓度的乙烯利可以增加“海7124”对棉花黄萎病抗性 | 第29-33页 |
| ·分析与讨论 | 第33-35页 |
| ·唢施一定浓度的乙烯利可以增强棉花对黄萎病的抗性 | 第33页 |
| ·乙烯利引起的抗病作用具有浓度效应 | 第33页 |
| ·乙烯在陆地棉与黄萎病的互作中扮演着双重角色 | 第33-35页 |
| 第三章 GbERF1基因在拟南芥中的功能鉴定 | 第35-56页 |
| ·实验材料 | 第35页 |
| ·植物材料和菌株 | 第35页 |
| ·实验主要试剂 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-42页 |
| ·GbERF1基因的克隆与分离 | 第35-36页 |
| ·GbERF1的生物信息学分析 | 第36页 |
| ·GbERF1的表达模式分析 | 第36页 |
| ·GbERF1超量表达载体构建 | 第36-37页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥遗传转化以及转基因纯系的获得 | 第37-38页 |
| ·拟南芥的转化 | 第37页 |
| ·拟南芥T1代阳性植株的筛选与鉴定 | 第37页 |
| ·T1代株系转基因拷贝数的推算 | 第37-38页 |
| ·T2代纯合子的筛选 | 第38页 |
| ·拟南芥RNA的提取及反转录 | 第38页 |
| ·RNA的提取 | 第38页 |
| ·RNA的反转录 | 第38页 |
| ·RT-PCR分析转基因拟南芥中GbERF1的表达 | 第38-39页 |
| ·Real time PCR分析转基因拟南芥中抗病相关基因的表达 | 第39-40页 |
| ·转基因拟南芥植株对黄萎病的抗性鉴定 | 第40-41页 |
| ·病原菌培养 | 第40页 |
| ·转基因拟南芥接种黄萎病菌 | 第40-41页 |
| ·拟南芥抗病鉴定方法 | 第41页 |
| ·转基因拟南芥对灰霉病的抗性鉴定 | 第41-42页 |
| ·灰霉病菌孢子悬浮液的制备 | 第41-42页 |
| ·苗期整株喷雾接种 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-53页 |
| ·GbERF1基因的cDNA序列及相关生物学分析 | 第42-45页 |
| ·GbERF1基因序列分析 | 第42页 |
| ·GbERF1保守域分析 | 第42-45页 |
| ·GbERF1基因的表达分析 | 第45-47页 |
| ·GbERF1在棉花根部优势表达 | 第45-46页 |
| ·GbERF1在棉花中受黄萎病菌诱导表达 | 第46页 |
| ·GbERF1受激素诱导表达 | 第46-47页 |
| ·转基因拟南芥纯合子的获得 | 第47页 |
| ·GbERF1转基因拟南芥植株表达水平的检测 | 第47-48页 |
| ·GbERF1对下游防卫基因的表达调控检测 | 第48-50页 |
| ·GbERF1转基因拟南芥植株的抗黄萎病鉴定 | 第50页 |
| ·GbERF1转基因拟南芥植株的抗灰霉病鉴定 | 第50-53页 |
| ·分析讨论 | 第53-56页 |
| ·GbERF1是从棉花中分离的一个新的ERF类基因 | 第53页 |
| ·GbERF1参与了棉花与黄萎病互作的信号路径 | 第53页 |
| ·转基因拟南芥可通过增强PR基因的表达提高对真菌的抗性 | 第53-56页 |
| 第四章 GbERF1转基因棉花获得和功能分析 | 第56-67页 |
| ·实验材料 | 第56页 |
| ·棉花转基因材料 | 第56页 |
| ·菌株与表达载体 | 第56页 |
| ·试验方法 | 第56-58页 |
| ·GhERF1基因的克隆与GhERF1抑制表达载体的构建 | 第56-57页 |
| ·农杆菌介导的棉花下胚轴遗传转化 | 第57页 |
| ·DNA的提取 | 第57页 |
| ·DNA的抽提及纯化 | 第57页 |
| ·DNA浓度的测定 | 第57页 |
| ·Southern杂交 | 第57页 |
| ·棉花RNA的提取及RT-PCR分析ERF1转基因植株的表达水平 | 第57-58页 |
| ·转基因棉花抗黄萎病鉴定和抗灰霉病鉴定 | 第58页 |
| ·实验结果与分析 | 第58-63页 |
| ·超量表达GbERF1的TO代转基因植株southern blot检测 | 第58-59页 |
| ·ERF1转基因棉花的表达水平分析 | 第59-60页 |
| ·抑制表达GhERF1的转基因棉花中GhERF1的表达分析 | 第59页 |
| ·超量表达GbERF1的转基因T0棉花中GbERF1的表达分析 | 第59-60页 |
| ·ERF1转基因棉花的抗病性 | 第60-63页 |
| ·抑制GhERF1表达的转基因植株接种黄萎病 | 第60-63页 |
| ·抑制GhERF1表达的转基因植株接种灰霉病 | 第63页 |
| ·超量表达GbERF1的转基因植株接种灰霉病 | 第63页 |
| ·分析与讨论 | 第63-66页 |
| ·GbERF1具有抗灰霉病的功能 | 第65页 |
| ·GbERF1具有抗黄萎病的功能 | 第65-66页 |
| ·下一步试验计划 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
