| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| ·生物素的简介 | 第12-13页 |
| ·生物素的应用 | 第13-14页 |
| ·在动物生产中的应用 | 第13页 |
| ·在医药上的应用 | 第13-14页 |
| ·在核酸探针标记中的作用 | 第14页 |
| ·在发酵工业中的应用 | 第14页 |
| ·生物素生物合成 | 第14-20页 |
| ·生物素生物合成途径及相关基因 | 第15-17页 |
| ·生物素生物合成操纵子的调节机制 | 第17-18页 |
| ·生物素高产菌育种 | 第18-20页 |
| ·生物素的检测 | 第20-22页 |
| ·微生物法 | 第20页 |
| ·生物法 | 第20页 |
| ·高效液相色谱法 | 第20-21页 |
| ·酶联免疫法 | 第21页 |
| ·其他方法 | 第21-22页 |
| 参考文献 | 第22-24页 |
| 第二章 土壤中生物素产生菌的筛选与分离 | 第24-33页 |
| ·前言 | 第24页 |
| ·材料与方法 | 第24-28页 |
| ·菌种来源 | 第24-25页 |
| ·培养基及培养条件 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-31页 |
| ·土壤中生物素产生菌的初筛 | 第28-29页 |
| ·生物素产生菌的复筛 | 第29-31页 |
| ·本章小结 | 第31-32页 |
| 参考文献 | 第32-33页 |
| 第三章 生物素产生菌的分类鉴定 | 第33-56页 |
| ·前言 | 第33页 |
| ·材料与方法 | 第33-45页 |
| ·供试菌株 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| ·主要药品与试剂 | 第34-36页 |
| ·实验方法 | 第36-45页 |
| ·实验结果与分析 | 第45-54页 |
| ·菌落形态观察和革兰氏染色 | 第45页 |
| ·生理生化特性 | 第45-47页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第47-48页 |
| ·16S rRNA基因的PCR扩增结果 | 第48-49页 |
| ·16S rRNA基因的PCR扩增条带纯化 | 第49页 |
| ·鉴定携带16S rRNA基因的质粒的克隆 | 第49-50页 |
| ·菌株FD16S rRNA基因的测序结果、序列比对及系统进化树的构建 | 第50-52页 |
| ·菌株DJ①16S rRNA基因的测序结果、序列比对及系统进化树的构建 | 第52-54页 |
| ·本章小结 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-56页 |
| 第四章 生物素产生菌的紫外线-氯化锂复合诱变和高效液相色谱法检测生物素产量 | 第56-67页 |
| ·前言 | 第56页 |
| ·实验材料与方法 | 第56-60页 |
| ·材料 | 第56-57页 |
| ·仪器 | 第57页 |
| ·药品与试剂 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-60页 |
| ·实验结果与分析 | 第60-65页 |
| ·紫外诱变 | 第60-62页 |
| ·菌种复壮 | 第62-63页 |
| ·高效液相色谱法检测发酵液生物素产量 | 第63-65页 |
| ·本章小结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-67页 |
| 第五章 生物素高产工程菌的构建 | 第67-87页 |
| ·前言 | 第67页 |
| ·材料与方法 | 第67-78页 |
| ·供试菌株 | 第67-68页 |
| ·主要仪器 | 第68页 |
| ·主要药品与试剂 | 第68-70页 |
| ·实验方法 | 第70-78页 |
| ·实验结果与分析 | 第78-85页 |
| ·恶臭假单胞菌 Pseudomonas putida KT2440 bioB 基因的扩增 | 第78-79页 |
| ·pMD 19-T-bioB质粒的提取和质粒PCR验证 | 第79页 |
| ·bioB基因的测序 | 第79-80页 |
| ·重组表达载体pBBR1MCS-5bioB的双酶切验证 | 第80-81页 |
| ·生物素高产工程菌的构建 | 第81-82页 |
| ·工程菌中表达载体pBBR1MCS-5bioB的验证 | 第82-83页 |
| ·转录水平检测 bioB 基因的表达 | 第83页 |
| ·重组质粒稳定性 | 第83页 |
| ·高效液相色谱法检测基因重组菌生物素产量 | 第83-85页 |
| ·本章小结 | 第85页 |
| 参考文献 | 第85-87页 |
| 第六章 总结与展望 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 攻读学位提间发表的学术论文目录 | 第89页 |
