| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-26页 |
| ·磷与植物的生长发育 | 第12页 |
| ·土壤中的磷素状况 | 第12-13页 |
| ·小麦磷高效的遗传研究 | 第13-16页 |
| ·磷高效的细胞遗传学研究 | 第14页 |
| ·磷高效的数量遗传学研究 | 第14-15页 |
| ·磷高效的分子遗传学研究 | 第15-16页 |
| ·磷高效基因TaPHR1 的作用和意义 | 第16-17页 |
| ·小麦转基因概况 | 第17-18页 |
| ·小麦转基因的主要方法 | 第18-25页 |
| ·农杆菌介导法 | 第18-21页 |
| ·根癌农杆菌的Ti 质粒 | 第19-20页 |
| ·根癌农杆菌转化的机制 | 第20-21页 |
| ·花粉管通道法 | 第21-22页 |
| ·基因枪法 | 第22-25页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 2 材料和方法 | 第26-42页 |
| ·试验材料 | 第26-30页 |
| ·菌种和质粒 | 第26-28页 |
| ·试验所用试剂 | 第28页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28-30页 |
| ·基本培养基MBo | 第28页 |
| ·诱愈培养基 | 第28页 |
| ·分化培养基 | 第28页 |
| ·生根培养基 | 第28页 |
| ·预培养、共培养培养基 | 第28页 |
| ·选择培养基 | 第28页 |
| ·抑菌培养基 | 第28-30页 |
| ·农杆菌培养用培养基 | 第30页 |
| ·配制培养基注意事项 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-42页 |
| ·TaPHR1 基因表达载体的构建 | 第30-37页 |
| ·表达载体构建路线 | 第30页 |
| ·表达载体pTaPHR1 的进一步构建 | 第30-32页 |
| ·PCR引物设计和反应条件 | 第32页 |
| ·重组载体的构建 | 第32-33页 |
| ·连接产物转入大肠杆菌 | 第33-34页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第34-35页 |
| ·重组质粒的验证 | 第35-36页 |
| ·重组质粒转化农杆菌 | 第36-37页 |
| ·小麦组织培养体系的建立 | 第37-38页 |
| ·成熟种子表面消毒 | 第37页 |
| ·成熟胚愈伤组织的诱导及分化 | 第37页 |
| ·再生植株的春化及移栽 | 第37页 |
| ·愈伤组织的观察 | 第37页 |
| ·数据统计及计算方法 | 第37-38页 |
| ·小麦遗传转化体系的建立 | 第38-40页 |
| ·小麦成熟胚愈伤组织的获得 | 第38页 |
| ·农杆菌侵染液的准备 | 第38页 |
| ·农杆菌浸染小麦的一般程序 | 第38-39页 |
| ·选择抗生素选择压的确定 | 第39页 |
| ·菌液浓度及浸染时间对转化的影响 | 第39页 |
| ·高渗预处理中蔗糖浓度对转化的影响 | 第39页 |
| ·Ca2 +处理对转化的影响 | 第39-40页 |
| ·共培养中有无滤纸片对转化的影响 | 第40页 |
| ·共培养时间对转化的影响 | 第40页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第40-42页 |
| ·质粒 DNA 的提取 | 第40页 |
| ·植物叶片基因组DNA 的提取 | 第40-41页 |
| ·转基因植株的PCR 检测 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-60页 |
| ·TaPHR1 基因表达载体的构建 | 第42-47页 |
| ·TaPHR1 基因的扩增与酶切回收 | 第42-43页 |
| ·表达载体pTaPHR1 的构建 | 第43-44页 |
| ·表达载体pTaPHR1 向农杆菌LB4404 的转化 | 第44-45页 |
| ·表达载体pTaPHR1-PT2 的构建和向农杆菌LB4404 的转化 | 第45-47页 |
| ·小麦成熟胚植株再生的影响因素 | 第47-52页 |
| ·小麦成熟胚基因型 | 第47-49页 |
| ·吸胀时间对小麦成熟胚愈伤组织诱导的影响 | 第49-50页 |
| ·2,4-D 浓度对小麦成熟胚出愈率和分化率的影响 | 第50-51页 |
| ·KT 浓度对愈伤组织分化率和成苗率的影响 | 第51-52页 |
| ·小麦成熟胚遗传转化的影响因素和TaPHR1 基因的转化 | 第52-60页 |
| ·抗生素选择压的确定 | 第52-53页 |
| ·菌液浓度及浸染时间对转化的影响 | 第53-54页 |
| ·高渗处理中蔗糖浓度对转化的影响 | 第54页 |
| ·Ca2 +处理对转化的影响 | 第54-55页 |
| ·共培养过程中放置滤纸片对转化效率的影响 | 第55-56页 |
| ·共培养时间对转化效率的影响 | 第56-57页 |
| ·转化植株的获得和检测 | 第57-60页 |
| 4. 讨论 | 第60-64页 |
| ·影响表达载体构建的相关因素 | 第60-61页 |
| ·影响农杆菌介导小麦成熟胚遗传转化效率的因素 | 第61-63页 |
| ·小麦基因型的影响 | 第61-62页 |
| ·植物生长调节剂的影响 | 第62-63页 |
| ·农杆菌过度繁殖的影响 | 第63页 |
| ·本研究的创新点 | 第63-64页 |
| ·进一步研究设想 | 第64页 |
| 5 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第76页 |
