| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 文献综述 | 第12-23页 |
| 第一章 猪圆环病毒Ⅱ型的研究概况 | 第12-23页 |
| ·猪圆环病毒的病原学与流行病学特征 | 第12-13页 |
| ·猪圆环病毒Ⅱ 型的分子生物学特征 | 第13-15页 |
| ·基因序列特征 | 第13页 |
| ·PCV2 的主要结构蛋白 | 第13-15页 |
| ·猪Ⅱ 型圆环病毒的致病机制 | 第15-17页 |
| ·致病机制 | 第15-16页 |
| ·PCV2 的嗜组织特性 | 第16页 |
| ·PCV2 侵袭宿主细胞引起其增殖的特性 | 第16页 |
| ·免疫抑制 | 第16-17页 |
| ·诱发因素 | 第17页 |
| ·PCV2 综合防治措施 | 第17-18页 |
| ·做好引种检疫 | 第17页 |
| ·强化饲养管理，减少应激 | 第17-18页 |
| ·定期消毒 | 第18页 |
| ·免疫预防 | 第18页 |
| ·药物预防 | 第18页 |
| ·PMWS 的诊断 | 第18-20页 |
| ·临床诊断 | 第18页 |
| ·PCV2 感染的病理学诊断 | 第18页 |
| ·病原学诊断 | 第18-20页 |
| ·疫苗的研究进展 | 第20-23页 |
| ·l 灭活疫苗 | 第20-21页 |
| ·弱毒活疫苗 | 第21页 |
| ·基因工程疫苗 | 第21-23页 |
| 试验研究 | 第23-61页 |
| 第二章 表达PCV2 CAP 蛋白重组减毒鼠伤寒沙门氏菌活载体疫苗的构建 | 第23-47页 |
| ·材料 | 第23-26页 |
| ·毒（菌）株、质粒 | 第23-24页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第24页 |
| ·仪器设备 | 第24页 |
| ·培养基 | 第24-25页 |
| ·溶液的配制 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-36页 |
| ·PCR 引物合成 | 第26页 |
| ·PCV2 ORF2 基因的扩增 | 第26页 |
| ·PCR 产物电泳检测及回收 | 第26页 |
| ·克隆载体的构建 | 第26-29页 |
| ·重组表达质粒 pYA3341-ORF2 的构建 | 第29-32页 |
| ·pYA3341-ORF2 重组质粒依次转化减毒鼠伤寒沙门氏菌X3730 和X4550 | 第32-33页 |
| ·重组菌苗X4550（pYA3341-ORF2）表达蛋白的鉴定 | 第33-35页 |
| ·重组菌苗X4550(pYA3341-ORF2)体外特性检测 | 第35-36页 |
| ·结果及分析 | 第36-42页 |
| ·PCR 扩增目的基因 | 第36页 |
| ·重组克隆质粒pGEM-T-ORF2 的构建和鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组表达质粒pYA3341-ORF2 的构建和鉴定 | 第37-38页 |
| ·Cap 蛋白的表达及Western blot 分析 | 第38-39页 |
| ·重组菌苗X4550（pYA3341-ORF2）的体外稳定性 | 第39-40页 |
| ·重组菌苗X4550（pYA3341-ORF2）生长状况分析 | 第40页 |
| ·重组菌苗的安全性试验 | 第40页 |
| ·重组菌苗口服免疫后在小鼠体内的分布和表达 | 第40-42页 |
| ·讨论 | 第42-46页 |
| ·目的基因的选择 | 第42页 |
| ·选择减毒鼠伤寒沙门氏菌活载体制备口服疫苗的原因 | 第42-43页 |
| ·沙门氏菌的免疫机制 | 第43页 |
| ·表达系统的选择—非抗性的载体-宿主平衡致死系统 | 第43-44页 |
| ·重组疫苗株的稳定性和安全性 | 第44-45页 |
| ·目的蛋白的表达 | 第45页 |
| ·关于重组减毒鼠伤寒沙门氏菌载体疫苗菌株的转化及鉴定 | 第45-46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| 第三章 重组菌苗X4550（PYA3341-ORF2）的动物免疫试验 | 第47-61页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·主要试剂 | 第47页 |
| ·试验器材 | 第47页 |
| ·试验动物 | 第47-48页 |
| ·菌种和质粒 | 第48页 |
| ·溶液的配制 | 第48页 |
| ·小鼠免疫试验 | 第48-52页 |
| ·重组菌X4550（pYA3341-ORF2）和X4550（pYA3341）的大量制备 | 第48页 |
| ·试验小鼠分组 | 第48-49页 |
| ·试验小鼠免疫 | 第49页 |
| ·免疫小鼠血清的收集 | 第49页 |
| ·免疫小鼠血清抗体效价测定 | 第49-50页 |
| ·免疫小鼠抗体中和活性测定 | 第50-51页 |
| ·MTT 检测重组菌苗免疫小鼠脾的T 淋巴细胞增殖 | 第51-52页 |
| ·免疫小鼠脾脏T 淋巴细胞亚群的测定 | 第52页 |
| ·猪免疫试验 | 第52-53页 |
| ·重组菌X4550（pYA3341-ORF2）和X4550（pYA3341）的大量制备 | 第52页 |
| ·试验猪分组 | 第52-53页 |
| ·试验猪免疫 | 第53页 |
| ·免疫猪血清的收集 | 第53页 |
| ·免疫猪血清抗体的检测 | 第53页 |
| ·免疫猪血清抗体中和活性检测 | 第53页 |
| ·免疫猪外周血淋巴细胞增殖试验 | 第53页 |
| ·结果及分析 | 第53-58页 |
| ·免疫小鼠血清抗体效价检测结果 | 第53-54页 |
| ·免疫小鼠血清抗体中和活性检测结果 | 第54页 |
| ·免疫小鼠淋巴细胞增殖试验结果 | 第54-55页 |
| ·免疫小鼠脾脏T 淋巴细胞亚群的测定结果 | 第55-56页 |
| ·免疫猪血清抗体的检测 | 第56-57页 |
| ·免疫猪血清抗体中和活性检测结果 | 第57页 |
| ·免疫猪淋巴细胞转化试验结果 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| ·小结 | 第60-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 英文缩略词及中英文对照 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 作者简介 | 第72页 |
