| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-30页 |
| 1 植物启动子的研究进展 | 第13-16页 |
| ·真核生物启动子的概念 | 第13页 |
| ·启动子的结构 | 第13-16页 |
| ·启动子的保守元件 | 第14-15页 |
| ·植物启动子的特异元件 | 第15页 |
| ·远端调控元件 | 第15-16页 |
| 2 启动子的分类 | 第16-23页 |
| ·组成型启动子 | 第16-18页 |
| ·CaMV 35S启动子 | 第16-17页 |
| ·ACMV启动子 | 第17页 |
| ·Act1启动子 | 第17-18页 |
| ·Nos和Ocs启动子 | 第18页 |
| ·Ubiquitin启动子 | 第18页 |
| ·组成型启动子在应用中存在的问题 | 第18页 |
| ·组织或器官特异性启动子 | 第18-22页 |
| ·根特异启动子 | 第19页 |
| ·叶特异启动子 | 第19-20页 |
| ·韧皮部及维管束特异启动子 | 第20页 |
| ·花特异启动子 | 第20-21页 |
| ·果实特异启动子 | 第21页 |
| ·种子特异启动子 | 第21-22页 |
| ·诱导型启动子 | 第22-23页 |
| ·光诱导型表达基因启动子 | 第22页 |
| ·热诱导表达基因启动子 | 第22页 |
| ·创伤诱导表达基因启动子 | 第22-23页 |
| ·创伤诱导表达基因启动子 | 第23页 |
| ·病原菌诱导表达基因启动子 | 第23页 |
| 3 启动子的克隆方法 | 第23-26页 |
| ·基因组文库筛选法 | 第23-24页 |
| ·启动子探针载体筛选启动子 | 第24页 |
| ·常规PCR法 | 第24页 |
| ·反向PCR法 | 第24-25页 |
| ·锅柄PCR法 | 第25页 |
| ·热不对称交错式PCR法 | 第25页 |
| ·YADE克隆法 | 第25-26页 |
| 4 启动子的结构与功能分析 | 第26-28页 |
| ·序列结构分析 | 第26页 |
| ·功能验证 | 第26-28页 |
| ·点突变分析 | 第26-27页 |
| ·缺失突变分析 | 第27页 |
| ·瞬时表达分析 | 第27页 |
| ·转化分析 | 第27-28页 |
| 5 Cab启动子的研究 | 第28-29页 |
| 6 柑橘特异组织启动子的研究 | 第29页 |
| 7 本研究的目的和意义 | 第29-30页 |
| 第二章 甜橙Cab基因全长cDNA的克隆及其启动子序列的克隆 | 第30-55页 |
| 1 试验材料 | 第30页 |
| 2 试验方法 | 第30-44页 |
| ·总RNA的提取 | 第30页 |
| ·引物的设计与合成 | 第30-31页 |
| ·RT-PCR反应 | 第31页 |
| ·Cab基因片段的扩增 | 第31-32页 |
| ·Cab基因片段的克隆测序 | 第32-33页 |
| ·RACE | 第33-39页 |
| ·3'RACE | 第33-35页 |
| ·5'RACE | 第35-39页 |
| ·序列拼接 | 第39页 |
| ·Cab基因全长序列的扩增 | 第39页 |
| ·Cab基因全长序列的克隆和测序 | 第39-40页 |
| ·Genome Walking | 第40-43页 |
| ·高Tm值的特异引物设计 | 第40-41页 |
| ·Genome Walking克隆Cab启动子 | 第41-43页 |
| ·Cab启动子序列生物信息学分析 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-54页 |
| ·Cab氨基酸序列的检索与比对 | 第44-48页 |
| ·甜橙RNA的提取 | 第48页 |
| ·甜橙Cab基因片段PCR扩增的结果 | 第48-49页 |
| ·RACE分析 | 第49页 |
| ·Cab基因全长cDNA | 第49-51页 |
| ·Cab基因序列基因组扩增结果 | 第51-53页 |
| ·染色体步移克隆Cab基因启动子 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-55页 |
| 第三章 Cab基因启动子的功能分析 | 第55-64页 |
| 1 实验材料 | 第55-56页 |
| 2 方法 | 第56-60页 |
| ·表达载体构建 | 第56-57页 |
| ·引物设计 | 第56页 |
| ·Cab基因启动子片段的克隆 | 第56页 |
| ·双酶切及连接转化 | 第56-57页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第57-58页 |
| ·农杆菌EHA105感受态制备 | 第57页 |
| ·冻融法转化农杆菌EHA105 | 第57-58页 |
| ·番茄遗传转化体系 | 第58页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第58-59页 |
| ·Gus染液的配置 | 第59-60页 |
| ·转基因番茄Gus染色分析 | 第60页 |
| 3 结果与分析 | 第60-63页 |
| ·Cab基因启动子表达载体构建结果 | 第60-61页 |
| ·转基因植株PCR检测 | 第61-62页 |
| ·转基因番茄Gus染色分析结果 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-64页 |
| 总结与展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-76页 |
| 附录 | 第76-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 个人简历 | 第84页 |