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苦瓜(Momordica charantia)两种MADS-box基因的克隆及其功能研究

图片目录第1-11页
表格目录第11-12页
缩略词表第12-13页
中文摘要第13-16页
英文摘要第16-19页
第一部分 苦瓜AG相似基因分子克隆和功能研究第19-62页
 摘要第19页
 1 引言第19-21页
 2 材料和方法第21-33页
   ·实验材料和试剂第21-22页
     ·植物材料第21页
     ·菌种第21-22页
     ·载体第22页
     ·主要试剂第22页
   ·实验方法第22-33页
     ·苦瓜RNA的提取第22页
     ·苦瓜18S rRNA基因的克隆第22-23页
     ·苦瓜AG相似基因的克隆第23-26页
       ·苦瓜McAG2基因的3’端部分片段克隆第23-24页
       ·苦瓜McAG2基因的5’端部分片段克隆第24-26页
     ·苦瓜McAG2基因生物信息学分析第26页
     ·苦瓜AG相似基因的组织特异性表达研究第26-29页
       ·RT—PCR分析第26-27页
       ·实时荧光定量RT-PCR分析第27-29页
     ·McAG2基因原核表达第29-31页
     ·McAG2基因转拟南芥真核表达研究第31-33页
       ·McAG2基因的ORF获得第31页
       ·表达载体pBI121-McAG2的构建第31-32页
       ·转化连接子的鉴定第32页
       ·拟南芥种植第32页
       ·花序浸染法转化拟南芥第32页
       ·转基因拟南芥筛选第32-33页
       ·转基因植株的检测第33页
 3 结果与分析第33-54页
   ·苦瓜叶RNA和DNA的质量分析第33-34页
   ·苦瓜18S rRNA基因部分片段的克隆第34-35页
   ·苦瓜McAG2基因全长cDNA的克隆第35-36页
   ·苦瓜McAG2基因生物信息学分析第36-42页
     ·苦瓜McAG2基因推测蛋白质的性质预测第36-39页
       ·蛋白质的分子量及等电点预测第36-37页
       ·蛋白质的氨基酸组成第37页
       ·蛋白质的二级结构预测第37-38页
       ·蛋白质的三级结构预测第38-39页
     ·氨基酸序列的同源性分析第39-40页
     ·苦瓜McAG2基因推测氨基酸保守结构域和C末端基序分析第40-41页
     ·构建系统进化树分析第41-42页
   ·原核表达分析第42-44页
   ·组织特异性表达研究第44-51页
     ·RT-PCR分析第44-46页
     ·实时荧光定量RT-PCR分析第46-51页
       ·标准模板的获得第46页
       ·标准曲线分析结果第46-49页
       ·苦瓜AG相似基因的相对定量第49-51页
   ·McAG2转基因研究第51-54页
     ·转基因植株抗Kan筛选第51-53页
     ·转基因拟南芥PCR检测阳性植株第53页
     ·转基因拟南芥的表型观察第53页
     ·RT-PCR检测第53-54页
 4 讨论第54-56页
 小结第56-57页
 参考文献第57-62页
第二部分 苦瓜AGL6相似基因分子克隆和表达分析研究第62-89页
 摘要第62页
 1 引言第62-63页
 2 材料和方法第63-69页
   ·实验材料和试测第63-64页
     ·植物材料第63页
     ·菌种第63页
     ·载体第63-64页
     ·主要试剂第64页
   ·实验方法第64-69页
     ·苦瓜RNA的提取第64页
     ·苦瓜AGL6相似基因的克隆第64-67页
       ·苦瓜McAG6基因的3’端部分片段克隆第64-66页
       ·苦瓜McAG6基因的5’端部分片段克隆第66-67页
     ·苦瓜McAG6基因生物信息学分析第67页
     ·RT-PCR分析第67-68页
     ·实时荧光定量RT-PCR分析第68-69页
 3 结果与分析第69-84页
   ·苦瓜叶RNA和DNA的质量分析第69-70页
   ·苦瓜McAG6基因全长cDNA的克隆第70-72页
   ·生物信息学分析第72-80页
     ·苦瓜McAG6基因推测蛋白质的性质预测第72-76页
       ·蛋白质的分子量及等电点预测第72页
       ·蛋白质的氨基酸组成第72-73页
       ·蛋白质的疏水区预测第73页
       ·蛋白质的修饰位点预测第73-75页
       ·蛋白质的二级结构预测第75页
       ·蛋白质的三级结构预测第75-76页
     ·氨基酸序列的同源性分析第76-78页
     ·苦瓜McAG6基因推测氨基酸保守结构域和C末端基序分析第78-79页
     ·构建系统进化树分析第79-80页
   ·RT-PCR分析McAG6基因表达特性第80-81页
   ·实时荧光定量RT-PCR分析第81-84页
     ·标准模板的获得第81页
     ·标准曲线分析结果第81-82页
     ·苦瓜AGL6相似基因的相对定量第82-84页
 4 讨论第84-85页
 小结第85-86页
 参考文献第86-89页
第三部分 苦瓜AG相似基因启动子克隆、分析及其瞬时表达载体构建第89-105页
 摘要第89页
 1 引言第89-90页
 2 材料和方法第90-96页
   ·实验材料和试剂第90-92页
     ·植物材料第90页
     ·菌种第90页
     ·载体第90-91页
     ·主要试剂第91页
     ·引物第91-92页
   ·实验步骤第92-96页
     ·苦瓜幼叶DNA的提取第92页
     ·苦瓜基因组DNA步移文库的构建及启动子的克隆第92-93页
     ·McAG2基因启动子克隆第93-94页
     ·启动子分析第94页
     ·苦瓜McAG2基因缺失分析的表达载体构建第94-96页
 3 结果与分析第96-101页
   ·苦瓜McAG2基因启动子片段的克隆第96-98页
   ·苦瓜McAG2基因5’上游调控序列的功能元件分析第98-100页
   ·McAG2基因5’上游调控序列缺失表达载体构建第100-101页
 4 讨论第101-102页
 小结第102页
 参考文献第102-105页
MADS-box基因研究进展第105-124页
 1 引言第105页
 2 MADS-box基因类型和结构第105-107页
 3 植物MADS-box基因外显子和内含子结构第107-109页
 4 植物MADS-box基因在基因组中的分布第109页
 5 MADS-box基因与花发育第109-112页
   ·经典ABC模型第109-110页
   ·ABCE模型第110-111页
   ·胚珠决定因子第111-112页
 6 MADS-box蛋白的相互作用的四聚体模型第112页
 7 植物MADS-box基因的功能第112-115页
   ·MADS-box基因与控制开花时间第113页
   ·植物MADS-box基因与果实发育第113-114页
     ·植物MADS-box基因参与胚珠的发育第113页
     ·MADS-box与果实成熟第113-114页
     ·MADS-box基因与果实开裂第114页
   ·MADS-box基因与根的发育第114页
   ·MADS-box基因与叶的发育第114-115页
   ·其它功能第115页
 8 MADS-box基因的进化关系第115页
 9 展望第115-117页
 参考文献第117-124页
致谢第124-126页
在读期间发表和待发表论文情况第126页
获奖情况第126-127页

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