| 图片目录 | 第1-13页 |
| 表格目录 | 第13-14页 |
| 中文摘要 | 第14-17页 |
| 英文摘要 | 第17-21页 |
| 第一章 麻疯树花药培养及愈伤组织中 PPO、POD活性研究 | 第21-48页 |
| 1. 材料与方法 | 第22-26页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-26页 |
| ·麻疯树花药愈伤组织诱导 | 第22页 |
| ·花药愈伤组织芽分化 | 第22-23页 |
| ·花药愈伤组织根分化 | 第23页 |
| ·悬浮培养体系的建立 | 第23-25页 |
| ·培养条件对愈伤组织中PPO和POD活性的影响 | 第25-26页 |
| 2. 结果与分析 | 第26-36页 |
| ·麻疯树花药愈伤组织诱导 | 第26-30页 |
| ·花药愈伤组织的诱导 | 第26页 |
| ·不同发育时期对愈伤组织诱导的影响 | 第26-27页 |
| ·低温预处理对愈伤组织诱导的影响 | 第27页 |
| ·激素组合对愈伤组织诱导的影响 | 第27-29页 |
| ·蔗糖浓度对愈伤组织诱导的影响 | 第29-30页 |
| ·花药愈伤组织芽分化 | 第30-31页 |
| ·花药愈伤组织根分化 | 第31页 |
| ·悬浮培养体系的建立 | 第31页 |
| ·培养条件对愈伤组织中PPO和 POD活性的影响 | 第31-36页 |
| 3. 讨论 | 第36-42页 |
| ·花药培养几种重要的影响因素 | 第36-38页 |
| ·花粉的发育时期 | 第36页 |
| ·低温预处理 | 第36-37页 |
| ·激素组合与浓度 | 第37页 |
| ·蔗糖浓度 | 第37-38页 |
| ·花药培养中的褐化现象 | 第38-40页 |
| ·造成褐化的原因 | 第38-39页 |
| ·防止褐化的措施 | 第39-40页 |
| ·悬浮培养体系的建立 | 第40页 |
| ·培养条件对愈伤组织中PPO活性的影响 | 第40-41页 |
| ·培养条件对愈伤组织中POD活性的影响 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 第二章 麻疯树核糖体失活蛋白基因curcin2的两个原核表达载体的构建 | 第48-62页 |
| 1 材料和方法 | 第49-55页 |
| ·实验材料 | 第49-50页 |
| ·材料、菌株及质粒载体 | 第49页 |
| ·试剂、试剂盒、酶 | 第49-50页 |
| ·培养基 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-55页 |
| ·引物设计 | 第50页 |
| ·麻疯树基因组 DNA的提取 | 第50-51页 |
| ·curcin2基因成熟肽编码区的获得 | 第51-53页 |
| ·PCR扩增 | 第51-52页 |
| ·回收 PCR产物 | 第52页 |
| ·连接 | 第52-53页 |
| ·转化 | 第53页 |
| ·菌落PCR及测序鉴定 | 第53页 |
| ·原核表达载体pET-C和pQE-C的构建 | 第53-54页 |
| ·目的片段的双酶切 | 第53页 |
| ·载体的双酶切 | 第53-54页 |
| ·表达片断的连接、转化 | 第54页 |
| ·重组质粒的检验 | 第54-55页 |
| ·菌落PCR检测 | 第54页 |
| ·重组质粒的双酶切检测 | 第54-55页 |
| ·测序检测 | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-58页 |
| ·DNA的提取 | 第55-56页 |
| ·目的片段的PCR扩增 | 第56页 |
| ·原核表达载体pET-C和pQE-C的构建 | 第56-57页 |
| ·重组子的鉴定 | 第57-58页 |
| ·菌落PCR鉴定 | 第57-58页 |
| ·双酶切鉴定 | 第58页 |
| ·测序鉴定 | 第58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-62页 |
| 第三章 麻疯树核糖体失活蛋白基因 curcin2的原核表达研究 | 第62-79页 |
| 1. 材料和方法 | 第62-67页 |
| ·实验材料 | 第62页 |
| ·菌株 | 第62页 |
| ·试剂、试剂盒、酶 | 第62页 |
| ·方法 | 第62-67页 |
| ·转化 | 第62-63页 |
| ·转化子的鉴定 | 第63页 |
| ·菌落PCR检测 | 第63页 |
| ·重组质粒的双酶切检测 | 第63页 |
| ·测序检测 | 第63页 |
| ·重组质粒pET-C和pQE-C的诱导表达 | 第63-66页 |
| ·不同温度下的诱导表达 | 第63-64页 |
| ·不同时间下的诱导表达 | 第64-65页 |
| ·不同IPTG浓度的诱导表达 | 第65-66页 |
| ·curcin2表达形式和溶解性的分析 | 第66-67页 |
| ·SDS-PAGE检测 | 第66-67页 |
| ·Western-blotting检测 | 第67页 |
| 2 结果与分析 | 第67-76页 |
| ·转化子的鉴定 | 第67-69页 |
| ·菌落 PCR鉴定 | 第67-68页 |
| ·双酶切鉴定 | 第68页 |
| ·测序鉴定 | 第68-69页 |
| ·curcin2在两个原核表达系统中的诱导表达 | 第69-76页 |
| ·curcin2的两个原核表达系统比较 | 第69-70页 |
| ·PCM诱导表达条件的优化 | 第70-74页 |
| ·表达温度的优化 | 第70-71页 |
| ·表达时间的优化 | 第71-72页 |
| ·IPTG浓度的优化 | 第72-74页 |
| ·Western-blottiong检测 | 第74-76页 |
| 3 讨论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-79页 |
| 第四章 麻疯树核糖体失活蛋白基因 curcin的真核表达研究 | 第79-97页 |
| 1. 材料和方法 | 第80-86页 |
| ·实验材料 | 第80-82页 |
| ·植物材料 | 第80页 |
| ·菌种 | 第80页 |
| ·载体 | 第80-81页 |
| ·试剂(盒)和酶 | 第81页 |
| ·培养基 | 第81-82页 |
| ·实验方法 | 第82-86页 |
| ·麻疯树基因组 DNA的提取 | 第82页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第82页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第82-83页 |
| ·curcin ORF的扩增 | 第83-84页 |
| ·表达载体构建 | 第84-85页 |
| ·农杆菌对烟草叶片的感染 | 第85页 |
| ·再生烟草苗的获得及形态观察 | 第85页 |
| ·诱导生根 | 第85页 |
| ·转基因植株的检测 | 第85-86页 |
| ·再生植株的移栽 | 第86页 |
| ·转基因植株的抗病性测定 | 第86页 |
| 2 结果与分析 | 第86-93页 |
| ·curcin基因的扩增 | 第86-87页 |
| ·表达载体的构建 | 第87-89页 |
| ·Kan抗性植株的分化与形态观察 | 第89-91页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第91-92页 |
| ·转基因植株的移栽 | 第92页 |
| ·转基因植株抗病性分析 | 第92-93页 |
| 3 讨论 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-97页 |
| 文献综述: 植物花药培养及麻疯树核糖体失活蛋白的研究进展 | 第97-136页 |
| 第五章 植物花药培养研究进展(文献综述) | 第97-108页 |
| 1. 植物花药培养概述 | 第98-108页 |
| ·花药培养的意义 | 第98页 |
| ·植物花药培养的意义 | 第98-99页 |
| ·大大加快植物杂交育种进程 | 第98-99页 |
| ·高效创建植物新的种质 | 第99页 |
| ·研究植物重要性状的遗传变异规律 | 第99页 |
| ·植物花药培养程序 | 第99-103页 |
| ·植物花药的采集 | 第99-100页 |
| ·预处理 | 第100页 |
| ·消毒方法 | 第100页 |
| ·培养方法 | 第100页 |
| ·植株再生 | 第100-102页 |
| ·练苗和移栽 | 第102页 |
| ·花粉植株的染色体加倍 | 第102-103页 |
| ·植物花药培养的影响因素 | 第103-108页 |
| ·供体的基因型 | 第103页 |
| ·供体的生理状况 | 第103页 |
| ·花粉发育的时期 | 第103-104页 |
| ·预处理 | 第104-105页 |
| ·培养基 | 第105-107页 |
| ·培养条件 | 第107-108页 |
| 2. 植物花药培养目前存在的问题 | 第108页 |
| 第六章 麻疯树核糖体失活蛋白的研究进展(文献综述) | 第108-124页 |
| 1. 研究史的回顾 | 第108-109页 |
| 2. 核糖体失活蛋白的分类 | 第109页 |
| 3. 核糖体失活蛋白的分布 | 第109-110页 |
| 4. 植物核糖体失活蛋白的生物化学性质 | 第110页 |
| 5. 核糖体失活蛋白的毒性 | 第110-111页 |
| 6. 核糖体失活蛋白的作用机制 | 第111-112页 |
| 7. 核糖体失活蛋白的酶学活性 | 第112-114页 |
| ·RNA N-糖苷酶活性 | 第112-113页 |
| ·RNA 水解酶活性 | 第113-114页 |
| ·多核苷酸:腺苷糖苷酶活性 | 第114页 |
| ·对超螺旋环状 DNA的酶活性 | 第114页 |
| 8. 核糖体失活蛋白的生物学活性 | 第114-121页 |
| ·核糖体失活蛋白的抗肿瘤作用 | 第114-116页 |
| ·核糖体失活蛋白的抗病毒活性 | 第116-119页 |
| ·核糖体失活蛋白对植物病毒的作用 | 第117页 |
| ·核糖体失活蛋白对人免疫缺陷病毒的作用 | 第117-119页 |
| ·核糖体失活蛋白对昆虫的作用 | 第119-120页 |
| ·核糖体失活蛋白对真菌的作用 | 第120-121页 |
| ·核糖体失活蛋白调节细胞代谢 | 第121页 |
| 9. 核糖体失活蛋白的应用 | 第121-124页 |
| ·核糖体失活蛋白在农业上的应用 | 第121-122页 |
| ·核糖体失活蛋白在医学上的应用 | 第122-124页 |
| 10. 总结与展望 | 第124页 |
| 参考文献 | 第124-136页 |
| 致谢 | 第136-137页 |
| 在读期间发表论文情况 | 第137-138页 |
