小麦抗叶锈病近等基因系TcLr35的RGA分析
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 引言 | 第9-16页 |
| ·植物抗病基因的特点 | 第9-12页 |
| ·植物抗病基因的类型 | 第9-10页 |
| ·植物抗病基因的结构 | 第10-12页 |
| ·植物基因组中RGA与R基因的关系 | 第12页 |
| ·植物抗病基因同源序列的应用现状 | 第12-14页 |
| ·作为一种新型的分子标记 | 第12-13页 |
| ·用于基因定位 | 第13页 |
| ·系统植物学研究 | 第13-14页 |
| ·R基因的克隆 | 第14页 |
| ·植物抗病基因同源序列的研究进展 | 第14-15页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第15-16页 |
| 2 试验材料与方法 | 第16-24页 |
| ·主要仪器及供试试剂 | 第16页 |
| ·仪器 | 第16页 |
| ·试剂 | 第16页 |
| ·供试材料 | 第16-17页 |
| ·小麦材料 | 第16页 |
| ·菌种 | 第16-17页 |
| ·试验方法 | 第17-24页 |
| ·小麦叶锈菌菌株的鉴定 | 第17页 |
| ·小麦基因组DNA的提取 | 第17页 |
| ·DNA浓度的测定 | 第17-18页 |
| ·RGA引物的准备 | 第18页 |
| ·RGA-PCR扩增 | 第18页 |
| ·RGA引物的筛选 | 第18页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染 | 第18-20页 |
| ·特异条带的回收和纯化 | 第20-21页 |
| ·差异片段克隆 | 第21-22页 |
| ·测序与序列分析 | 第22-24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-35页 |
| ·小麦基因组DNA的提取 | 第24页 |
| ·小麦基因组RGA-PCR扩增体系与程序的建立 | 第24-27页 |
| ·RGA-PCR扩增程序的选择 | 第24页 |
| ·扩增体系的优化 | 第24-27页 |
| ·PCR体系稳定性的验证 | 第27页 |
| ·TcLr35和Thatcher的扩增结果分析 | 第27-29页 |
| ·在49个小麦抗叶锈病近等基因系中扩增结果分析 | 第29页 |
| ·回收片段的再扩增 | 第29-30页 |
| ·差异片段的克隆 | 第30-31页 |
| ·特异性片段的序列测定及分析 | 第31-35页 |
| 4 讨论 | 第35-39页 |
| ·用抗病基因同源序列法在小麦中寻找抗病相关基因 | 第35-36页 |
| ·RGA-PCR反应体系与程序的优化 | 第36-37页 |
| ·RGA方法存在的问题 | 第37页 |
| ·展望与计划 | 第37-39页 |
| 5 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 附录A | 第46-49页 |
| 附录B | 第49-51页 |
| 附录C | 第51-52页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
