| 中文摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| ·猪细小病毒的发现及危害 | 第11页 |
| ·猪细小病毒的的形态和理化特性 | 第11-12页 |
| ·猪细小病毒的流行病学特性 | 第12页 |
| ·猪细小病毒分子生物学研究进展 | 第12-14页 |
| ·PPV 的基因组结构和复制特点 | 第12-13页 |
| ·PPV 的基因组转录及蛋白质的合成 | 第13-14页 |
| ·猪细小病毒感染诊断方法的研究进展 | 第14-18页 |
| ·病毒的分离培养 | 第14-15页 |
| ·电镜及免疫组化（electron microscopy and Immunohistological) | 第15页 |
| ·病毒的血凝及血凝抑制试验（hemagglutination or HA-inhibition，HA or HI） | 第15页 |
| ·血清中和试验(serum neutralization, SN) | 第15-16页 |
| ·酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA) | 第16页 |
| ·免疫电泳试验(countercurrent immunoelectrophoresis, CIE) | 第16页 |
| ·乳胶凝集试验(latex agglutination test, LAT) | 第16页 |
| ·银加强胶体金技术(Silver-enhanced colloidal gold assay,SECGA) | 第16-17页 |
| ·核酸探针技术(DNA or RNA probes) | 第17页 |
| ·聚合酶链反应(polymerase chain reaction , PCR) | 第17-18页 |
| ·PPV 疫苗的免疫预防 | 第18-21页 |
| ·弱毒疫苗 | 第18-19页 |
| ·灭活疫苗 | 第19-20页 |
| ·PPV 疫苗免疫程序 | 第20页 |
| ·PPV 新型疫苗展望 | 第20-21页 |
| ·小结 | 第21-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-35页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·细胞、毒株、载体、血清 | 第23页 |
| ·工具酶及主要生化试剂 | 第23-24页 |
| ·培养基 | 第24页 |
| ·试剂盒及其他 | 第24-25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-35页 |
| ·猪细小病毒的增殖、毒力测定、浓缩及纯化 | 第25-26页 |
| ·引物的设计与合成 | 第26页 |
| ·PPV LJL12 基因组DNA 的制备 | 第26-27页 |
| ·PPV NS-1 基因的PCR 扩增 | 第27页 |
| ·PCR 产物的回收与纯化 | 第27-28页 |
| ·NS-1s 基因的TA 克隆 | 第28-30页 |
| ·NS-1s 重组蛋白原核表达载体的构建 | 第30页 |
| ·NS-1s 重组蛋白的诱导表达 | 第30-31页 |
| ·重组蛋白的纯化及定量 | 第31-32页 |
| ·重组蛋白的Western blot 检测 | 第32页 |
| ·PPV 全病毒抗原的制备 | 第32-33页 |
| ·间接ELISA 检测方法的建立 | 第33页 |
| ·阻断ELISA 检测方法的建立 | 第33页 |
| ·重组蛋白间接ELISA 与Western blot 结果比较 | 第33-34页 |
| ·与HI 结果比较 | 第34-35页 |
| 第三章 结果 | 第35-45页 |
| ·PPV 的感染滴度(TCID50) | 第35页 |
| ·NS-1s 基因的PCR 扩增结果 | 第35页 |
| ·NS-1s 基因的T-A 克隆及序列测定结果 | 第35-38页 |
| ·目的片段的回收 | 第35-36页 |
| ·T-A 克隆的PCR 及双酶切鉴定结果 | 第36页 |
| ·NS-1s 基因的序列分析结果 | 第36-38页 |
| ·NS-1s 基因重组表达载体的构建结果 | 第38页 |
| ·重组表达载体的PCR 鉴定结果 | 第38页 |
| ·重组表达载体的酶切鉴定结果 | 第38页 |
| ·重组NS-1s 蛋白的表达结果 | 第38-39页 |
| ·重组NS-1s 蛋白的WESTERN BLOT 结果 | 第39-40页 |
| ·重组NS-1s 蛋白ELISA 方法的建立 | 第40-42页 |
| ·重组蛋白抗原最适包被浓度与血清稀释度的确定 | 第40-41页 |
| ·间接ELISA 特异性判定 | 第41-42页 |
| ·临床样品的间接ELISA 检测的结果 | 第42页 |
| ·PPV 全病毒抗原阻断ELISA 方法的建立 | 第42-44页 |
| ·全病毒抗原最适包被浓度与单抗稀释度的确定 | 第42-43页 |
| ·全病毒阻断ELISA 判定标准的确定 | 第43页 |
| ·临床样品的阻断ELISA 检测的结果 | 第43-44页 |
| ·比较试验 | 第44-45页 |
| ·重组蛋白NS-1s-ELISA 与Western blot 检测结果比较 | 第44页 |
| ·重组蛋白NS-1s-ELISA 与全病毒阻断ELISA 检测结果比较 | 第44页 |
| ·全病毒阻断ELISA 与HI 检测结果比较 | 第44-45页 |
| 第四章 讨论 | 第45-47页 |
| 第五章 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 附录 | 第53-61页 |
| 个人简历 | 第61-62页 |
| Curriculum Vitae | 第62页 |
