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水稻T-DNA插入突变体侧翼序列的分离与分析及控制杂合单株低育性基因Osfbox的功能研究

缩写名词表第1-7页
中文摘要第7-10页
Abstract第10-13页
1.文献综述第13-36页
   ·水稻基因组研究第13-22页
     ·水稻基因组序列的测定与注释第13-15页
     ·基于时空表达模式的功能基因组研究第15-16页
     ·基于突变体的功能基因组研究第16-22页
   ·几种T-DNA插入侧翼序列的分离方法第22-25页
     ·对热不对称交错PCR第22-24页
     ·反向PCR第24页
     ·质粒拯救第24-25页
   ·主要的水稻T-DNA插入突变体研究单位及侧翼序列数据库介绍第25-27页
   ·农杆菌介导的T-DNA在水稻基因组中的整合和分布特征第27-32页
     ·T-DNA在水稻中的整合结构和形式第28-31页
     ·水稻中T-DNA插入位点分布和序列特征第31-32页
   ·水稻杂种不育机理的研究进展第32-36页
     ·亲本间的遗传分化与杂种不育的关系第32-33页
     ·水稻籼粳杂种一代不育的细胞学基础第33-35页
     ·籼粳杂种不育的遗传模型第35页
     ·水稻籼粳杂种不育基因及广亲和基因的定位第35-36页
2.本研究的目的和意义第36-37页
3.材料与方法第37-46页
   ·实验材料第37页
   ·实验方法第37-46页
     ·转基因植株的DNA抽提及PCR阳性检测第37页
     ·转基因植株的T-DNA插入侧翼序列分离及测序第37-40页
     ·T-DNA侧翼序列分析方法第40页
     ·不同研究单位的水稻T-DNA侧翼序列的收集第40-41页
     ·水稻各组织总RNA抽提,检测及反转录第41页
     ·不同遗传转化载体的构建第41-43页
     ·不同基因型单株的育性考察和细胞学观察第43-44页
     ·不同水稻籼粳品种的Osfbox基因序列比较第44页
     ·组织原位杂交第44-46页
4.结果与分析第46-80页
   ·T-DNA插入突变体库植株的PCR阳性检测第46页
   ·T-DNA侧翼序列的分离第46-47页
   ·侧翼序列的分析第47-59页
     ·侧翼序列的分类第47-49页
     ·T-DNA在水稻基因组中的分布第49-50页
     ·T-DNA在水稻各条染色体上的分布第50-51页
     ·T-DNA在水稻基因组各区域中的分布第51-52页
     ·T-DNA在水稻不同功能基因区域内的分布分析第52-55页
     ·T-DNA插入位点附近的特殊一级序列结构第55页
     ·T-DNA插入位点附近的弯曲度变化第55-57页
     ·T-DNA插入位点附近的碱基组成第57-59页
   ·T-DNA在水稻基因组中的整合特性第59-63页
     ·T-DNA的末端整合位点第59-60页
     ·T-DNA与水稻基因组DNA的连接序列第60页
     ·水稻基因组中的T-DNA重复构象第60-62页
     ·转基因水稻中的T-DNA边界之外的载体骨架序列第62-63页
   ·杂种低育性基因Osfbox的功能分析第63-80页
     ·杂种低育性突变体的获得第63-67页
     ·雌雄配子失活共同导致了杂种的低育性第67-72页
     ·突变体中T-DNA插入在Osfbox基因3'UTR区域第72-74页
     ·Osfbox基因是一个全生育期组成型表达的基因第74-76页
     ·不同水稻品种中Osfbox基因的序列比较第76-78页
     ·Osfbox基因的编码蛋白定位在细胞核内第78页
     ·寻找与Osfbox蛋白互作的水稻Skp1蛋白编码基因第78-80页
5.讨论第80-89页
   ·高效T-DNA侧翼序列分离体系的建立第80-81页
   ·T-DNA标签在水稻基因组中的非随机分布第81-83页
   ·T-DNA插入位点附近序列的弯曲度和碱基组成第83-84页
   ·当前全世界范围内水稻T-DNA插入突变体库的概况第84-85页
   ·水稻基因组中T-DNA的复杂结构第85-87页
   ·植物中已有的f-box基因功能报道第87-88页
   ·Osfbox基因的功能和作用机理探讨第88页
   ·02Z15BG67的T-DNA杂合单株低育性的其它可能原因第88-89页
6.总结与展望第89-90页
附录:部分试验的详细步骤第90-103页
参考文献第103-115页
作者简历第115-116页
致谢第116页

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