棉花组织特异性DNA甲基化及海岛棉种内甲基化多态性分析
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-19页 |
| ·课题的提出 | 第9-10页 |
| ·植物表观遗传与DNA甲基化 | 第10-11页 |
| ·DNA甲基化的生物学意义 | 第11-16页 |
| ·DNA甲基化在基因表达调控中的重要作用 | 第11-14页 |
| ·DNA甲基化与春化作用 | 第12页 |
| ·DNA甲基化与亲本印迹 | 第12-13页 |
| ·DNA甲基化与杂种优势 | 第13-14页 |
| ·DNA组织和物种特异性甲基化 | 第14页 |
| ·DNA甲基化在维持基因组的稳定性起重要作用 | 第14-16页 |
| ·DNA甲基化与转基因沉默 | 第15页 |
| ·DNA甲基化与转座子失活 | 第15-16页 |
| ·DNA甲基化的研究方法 | 第16-18页 |
| ·基因组整体水平甲基化分析 | 第16-17页 |
| ·特异性位点的DNA甲基化的检测 | 第17页 |
| ·MSAP技术在DNA甲基化检测中的应用 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-23页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-23页 |
| ·棉花基因组DNA的提取与纯化 | 第19页 |
| ·甲基化敏感性扩增片段长度多态性(MSAP)分析 | 第19-21页 |
| ·限制性酶切及连接 | 第20页 |
| ·预扩增 | 第20-21页 |
| ·选择性PCR扩增 | 第21页 |
| ·多态性甲基化片段的回收、克隆及测序 | 第21-22页 |
| ·回收 | 第21-22页 |
| ·回收片段的再扩增及检测 | 第22页 |
| ·TA克隆 | 第22页 |
| ·测序及序列分析 | 第22页 |
| ·数据分析 | 第22-23页 |
| ·带型记录 | 第22-23页 |
| ·数据分析 | 第23页 |
| 3 结果与分析 | 第23-33页 |
| ·棉花组织特异性甲基化分析 | 第23-27页 |
| ·鄂棉22组织特异性甲基化 | 第24-25页 |
| ·Pima3-79组织特异性甲基化 | 第25-26页 |
| ·杂种及亲本的甲基化分析 | 第26-27页 |
| ·海岛棉甲基化多态性分析 | 第27-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| ·组织特异性胞嘧啶甲基化 | 第33页 |
| ·甲基化与杂种优势 | 第33页 |
| ·海岛棉亚种内的甲基化多态性 | 第33-35页 |
| 参考文献 | 第35-41页 |
| 附录 | 第41-44页 |
| 1 棉花DNA的抽提 | 第41-42页 |
| ·大量棉花DNA的抽提 | 第41-42页 |
| ·DNA浓度的测定 | 第42页 |
| 2 TA克隆的步骤 | 第42-44页 |
| ·PCR产物的连接 | 第42页 |
| ·连接产物的转化 | 第42-44页 |
| ·转化所需试剂 | 第42-43页 |
| ·转化过程 | 第43页 |
| ·挑白斑 | 第43页 |
| ·阳性克隆的PCR鉴定 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44页 |
