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番茄和辣椒翻译起始因子4E相关基因的克隆与分析

中文摘要第1-9页
Abstract第9-11页
缩略词表第11-12页
1.前言第12-30页
   ·课题的提出第12页
   ·病毒病对植物的危害第12-14页
     ·植物病毒的分类第13页
     ·植物病毒传播方式第13-14页
     ·植物病毒的症状及鉴定第14页
   ·植物抗病毒的作用方式第14-16页
   ·植物抗病毒基因工程研究进展第16-21页
     ·病毒来源的抗性基因策略第16-19页
       ·外壳蛋白基因介导的抗性第16-17页
       ·利用病毒复制酶基因的抗性第17页
       ·运动蛋白基因第17-18页
       ·RNA介导的抗性策略第18-19页
     ·非植物病毒基因介导的抗性策略第19-21页
       ·α、β干扰素基因第19页
       ·利用核酶基因抗性策略第19页
       ·植物自身基因介导的抗病毒基因策略第19-21页
   ·真核翻译起始因子4E介导的抗病毒机理第21-29页
     ·真核翻译起始因子4E第21-23页
       ·eIF4E的结构及功能第21-22页
       ·eIF4E的调节机制第22-23页
       ·eIF4E家族第23页
     ·真核细胞蛋白质翻译起始机制第23-24页
     ·真核翻译起始因子4E抗病毒机制第24-27页
       ·马铃薯Y病毒属病毒基因组第25-27页
       ·马铃薯Y病毒属病毒选择利用eIF4E家族成员第27页
     ·植物真核翻译起始因子4E研究进展第27-29页
   ·本研究的目的与内容第29-30页
2 材料与方法第30-38页
   ·植物材料第30页
   ·菌株、质粒及试剂第30页
   ·利用生物信息学分析番茄和辣椒中e IF4E及eIF(iso)4E基因第30页
   ·基因数字表达分析第30页
   ·基因克隆及载体构建第30-36页
     ·引物设计和序列分析第30-31页
     ·反转录PCR第31-32页
       ·总RNA的提取第31页
       ·RNA的快速检测第31页
       ·RT-PCR第31-32页
     ·基因组织/器官特异性表达分析第32-33页
     ·植物表达载体构建第33-36页
   ·番茄遗传转化第36页
   ·转基因植株的PCR检测第36-38页
3 结果与分析第38-63页
   ·利用生物信息学分析番茄和辣椒中e IF4E及eIF(iso)4E基因第38-41页
     ·核酸数据库上番茄eIF4E基因的搜集第38页
     ·核酸数据库上番茄eIF(iso)4E基因的搜集第38-39页
     ·核酸数据库上辣椒eIF4E基因的搜集第39页
     ·核酸数据库上辣椒eIF(iso)4E基因的搜集第39页
     ·研究基因的核苷酸序列的同源性比对结果第39-41页
   ·番茄和辣椒总RNA的提取及反转录第41-42页
   ·基因数字表达分析第42-43页
   ·番茄真核翻译起始因子4E基因在不同组织的表达分析第43-44页
     ·番茄eIF4E基因在不同组织的表达分析第43-44页
     ·番茄eIF(iso)4E基因的表达分析第44页
   ·番茄e IF4E基因cDNA的克隆及分析第44-47页
     ·番茄e IF4E基因cDNA的克隆第44-45页
     ·番茄eIF4E基因cDNA的序列分析第45-46页
     ·番茄e IF4E蛋白质的二级结构分析第46-47页
   ·辣椒e IF4E基因cDNA的克隆及分析第47-51页
     ·辣椒e IF4E基因cDNA的克隆第47-48页
     ·辣椒e IF4E基因cDNA序列分析第48-50页
     ·辣椒e IF4E蛋白质的二级结构分析第50-51页
   ·番茄eIF(iso)4E基因cDNA的克隆及分析第51-54页
     ·番茄eIF(iso)4E基因cDNA的克隆第51页
     ·番茄eIF(iso)4E基因cDNA分析第51-53页
     ·番茄eIF(iso)4E蛋白质的二级结构分析第53-54页
   ·辣椒eIF(iso)4E基因cDNA的克隆及分析第54-57页
     ·辣椒eIF(iso)4E基因cDNA的克隆第54页
     ·辣椒eIF(iso)4E基因cDNA分析第54-56页
     ·辣椒eIF(iso)4E蛋白质的二级结构分析第56-57页
   ·高等植物eIF4E/eIF(iso)4E氨基酸序列同源性比较及多序列比对第57-59页
   ·系统进化分析第59-60页
   ·正义和反义表达载体的构建第60页
   ·转基因植株的获得第60-61页
   ·转基因番茄植株的分子分析第61-62页
   ·转基因植株的生长发育的初步观察第62-63页
4.讨论第63-65页
   ·生物信息学在基因功能研究中的应用第63-64页
   ·数字表达分析在基因表达分析中的可靠性第64页
   ·真核翻译其始因子4E作为新的抗病基因资源第64-65页
参考文献第65-75页
致谢第75-76页
附录第76-77页
 附录一:植物DNA的小量法提取程序第76-77页
 附录二:TriZOL一步法提取植物总RNA方法第77页

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