| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-25页 |
| ·转基因小麦研究进展 | 第11-14页 |
| ·基因枪法 | 第11-12页 |
| ·农杆菌介导法 | 第12-13页 |
| ·花粉管通道法 | 第13-14页 |
| ·选择标记基因对转基因作物安全性的影响 | 第14-17页 |
| ·选择标记基因在基因转化中的应用及潜在安全隐患 | 第14-16页 |
| ·选择标记基因安全隐患的解决方式 | 第16-17页 |
| ·载体骨架对基因转化的影响 | 第17-19页 |
| ·载体骨架对基因转化的作用 | 第17-18页 |
| ·载体骨架对基因转化的不利影响 | 第18-19页 |
| ·无载体基因的转化 | 第19页 |
| ·无载体无标记基因的转化 | 第19-20页 |
| ·GFP基因概述 | 第20-23页 |
| ·GFP的光谱特性 | 第20页 |
| ·GFP基因的结构及生化特性 | 第20页 |
| ·GFP在植物分子生物学研究中的应用 | 第20-22页 |
| ·GFP的改进 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 2 小麦花粉管通道法转化的影响因素研究 | 第25-37页 |
| ·引言 | 第25页 |
| ·实验材料及设备 | 第25-26页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·质粒 | 第25页 |
| ·引物设计与合成 | 第25页 |
| ·试剂配制 | 第25-26页 |
| ·实验仪器 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-30页 |
| ·苯胺兰染色观察花粉管 | 第26-27页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第27-28页 |
| ·FITC标记的外源DNA转化溶液的制备 | 第28-29页 |
| ·转化方法 | 第29-30页 |
| ·结果与讨论 | 第30-36页 |
| ·花粉管观察 | 第30页 |
| ·外源DNA进入小麦胚囊的途径 | 第30-33页 |
| ·转化时间对外源DNA进入胚囊效率的影响 | 第33-34页 |
| ·转化溶液对外源DNA进入胚囊效率的影响 | 第34-35页 |
| ·转化部位对外源DNA进入子房方式的影响 | 第35-36页 |
| ·小结 | 第36-37页 |
| 3 小麦子房滴注转化法的建立 | 第37-53页 |
| ·引言 | 第37页 |
| ·实验材料及设备 | 第37-40页 |
| ·植物材料 | 第37页 |
| ·质粒 | 第37页 |
| ·引物设计与合成 | 第37-38页 |
| ·试剂配制 | 第38-39页 |
| ·实验仪器 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-47页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第40页 |
| ·转化元件的制备 | 第40页 |
| ·小麦转化 | 第40页 |
| ·小麦基因组DNA提取 | 第40-41页 |
| ·PCR检测 | 第41页 |
| ·Southern杂交检测 | 第41-45页 |
| ·小麦总RNA的提取 | 第45页 |
| ·RT-PCR检测 | 第45-46页 |
| ·Northern杂交检测 | 第46-47页 |
| ·转化材料的荧光检测 | 第47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-52页 |
| ·转化方法对PCR阳性率的影响 | 第47-48页 |
| ·转化时间对PCR阳性率的影响 | 第48-49页 |
| ·转化溶液对PCR阳性率的影响 | 第49页 |
| ·转化材料的Southern杂交检测 | 第49-50页 |
| ·转化材料的RT-PCR和Northern杂交检测 | 第50-51页 |
| ·转化材料的荧光检测 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 4 结论与展望 | 第53-55页 |
| ·结论 | 第53页 |
| ·有待进一步开展的工作 | 第53-55页 |
| ·环境温度、湿度对转化时间的影响 | 第53页 |
| ·线性DNA片段的保护 | 第53-54页 |
| ·功能基因的转化 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |