中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
引言 | 第11-12页 |
1 文献综述 | 第12-24页 |
·寄生、共生和联合 | 第12-13页 |
·内生菌 | 第13-15页 |
·植物内生菌 | 第15页 |
·植物内生细菌研究进展 | 第15-17页 |
·植物内生细菌的主要类群 | 第15-16页 |
·植物内生细菌的存在部位 | 第16页 |
·植物内生细菌的作用及其物质基础 | 第16-17页 |
·植物内生细菌的遗传改良 | 第17页 |
·满江红内生细菌的研究进展 | 第17-18页 |
·植物内生细菌的研究方法进展 | 第18-20页 |
·PCR-DGGE技术的原理及应用前景 | 第20-23页 |
·PCR-DGGE技术的原理 | 第20-21页 |
·PCR-DGGE技术的应用前景 | 第21-23页 |
·研究的目的和意义 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-31页 |
·供试植物材料与培养条件 | 第24页 |
·试剂与仪器 | 第24-25页 |
·主要试剂 | 第24-25页 |
·仪器 | 第25页 |
·试验方法 | 第25-31页 |
·小叶满江红的培养 | 第25-26页 |
·内生细菌形态结构的电子显微镜观察 | 第26页 |
·扫描电镜样品的制备与观察 | 第26页 |
·透射电镜样品的制备与观察 | 第26页 |
·超薄切片样品的制备与观察 | 第26页 |
·负染样品的制备与观察 | 第26页 |
·传统微生物方法分离培养内生细菌 | 第26-27页 |
·内生细菌的分离培养与生理生化反应检测 | 第26-27页 |
·内生细菌DNA的提取 | 第27页 |
·内生细菌的16S rDNA的PCR分析 | 第27页 |
·密度梯度离心法分离内生细菌 | 第27-28页 |
·改进后的CTAB-SDS法提取总DNA | 第28页 |
·DNA的纯化 | 第28页 |
·16S rDNA的PCR扩增 | 第28-29页 |
·PCR反应体系 | 第29页 |
·PCR反应程序 | 第29页 |
·电泳检测 | 第29页 |
·PCR反应产物的DGGE分析 | 第29页 |
·DGGE谱带回收测序及序列分析 | 第29-31页 |
3 结果与分析 | 第31-44页 |
·小叶满江红内生细菌的存在 | 第31-32页 |
·小叶满江红内生细菌的菌体形态与超微结构特征 | 第32-35页 |
·小叶满江红内生细菌的菌落形态与生理生化反应 | 第35-37页 |
·小叶满江红内生细菌16S rDNA基因的PCR扩增 | 第37-44页 |
·两种方法分离小叶满江红内生细菌 | 第37-38页 |
·变性梯度凝胶电泳的条件优化 | 第38-39页 |
·两种方法分离小叶满江红内生细菌的DGGE比较 | 第39页 |
·小叶满江红内生细菌16S rDNA-PCR-DGGE | 第39-40页 |
·DGGE凝胶条带的回收 | 第40页 |
·DGGE凝胶条带的测序及系统发育分析 | 第40-44页 |
4 讨论 | 第44-47页 |
·关于研究材料 | 第44页 |
·关于内生细菌的表型多态性 | 第44-45页 |
·关于满江红内生细菌的遗传多样性 | 第45页 |
·关于DGGE技术及其优化 | 第45-47页 |
·密度梯度离心法与总DNA提取方法比较 | 第45-46页 |
·PCR—DGGE技术体系的建立 | 第46-47页 |
5 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-55页 |
附录 | 第55-56页 |
致谢 | 第56页 |