| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 引言与文献综述 | 第9-27页 |
| ·甜蛋白研究概述 | 第9-11页 |
| ·马槟榔的生物学研究 | 第11-16页 |
| ·马槟榔的形态特征 | 第11页 |
| ·马槟榔甜蛋白的研究 | 第11-13页 |
| ·甜蛋白甜味机理的研究 | 第13-14页 |
| ·甜蛋白基因工程研究概况 | 第14-16页 |
| ·真核基因表达调控 | 第16-25页 |
| ·染色体水平调控 | 第17页 |
| ·转录水平及转录后水平调控 | 第17-19页 |
| ·翻译及翻译后水平调控 | 第19-25页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| ·技术路线 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-43页 |
| ·材料与与试剂 | 第27-28页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·菌株与质粒 | 第27页 |
| ·生化试剂 | 第27-28页 |
| ·常用溶液及培养基的配制 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-43页 |
| ·MBL 全长基因克隆与测序 | 第28-34页 |
| ·MBL 基因的剪接与表达载体的构建 | 第34-40页 |
| ·质粒导入农杆菌 | 第40-41页 |
| ·植物表达载体转化拟南芥 | 第41-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-58页 |
| ·MBL 基因的克隆与测序 | 第43-45页 |
| ·马槟榔基因组DNA 的提取 | 第43页 |
| ·PCR 扩增MBL 基因并与pMD-18T-Vector 连接 | 第43-44页 |
| ·序列测定与分析 | 第44-45页 |
| ·MBL 的基因剪接 | 第45-49页 |
| ·连接肽的去除 | 第45-46页 |
| ·信号肽、N-端肽、C-端肽的去除 | 第46-47页 |
| ·A 链与 B 链的拼接 | 第47-49页 |
| ·植物表达载体的鉴定 | 第49-51页 |
| ·植物表达载体 pVKH-35S-MBL-pA 和 pVKH-Pm-MBL-pA 鉴定 | 第49页 |
| ·植物表达载体 pVKH-35S-NM-pA 和 pVKH-Pm-NM-pA 鉴定 | 第49-50页 |
| ·植物表达载体 pVKH-35S-MM-pA 和 pVKH-Pm-MM-pA 的鉴定 | 第50页 |
| ·双价植物表达载体 pVKH-Pm-S1-LegA-S2-pA 的鉴定 | 第50-51页 |
| ·重组农杆菌的鉴定 | 第51-52页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥转化与分析鉴定 | 第52-58页 |
| ·拟南芥转化苗的获得 | 第52-53页 |
| ·最适Hyg 筛选压的确定 | 第53-54页 |
| ·转基因抗性植株的获得 | 第54-55页 |
| ·转基因抗性植株的PCR 检测 | 第55-58页 |
| 4 讨论 | 第58-62页 |
| ·甜蛋白研究的发展前景 | 第58页 |
| ·关于重叠区扩增基因拼接法 | 第58-59页 |
| ·关于转化苗的培养 | 第59-60页 |
| ·关于拟南芥的真空抽滤转化 | 第60-61页 |
| ·关于抗性苗的筛选 | 第61-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献(reference) | 第63-69页 |
| 缩写词(Abbreviation) | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
