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亚麻高效组织培养及遗传转化体系的建立

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
第一章 前言第11-26页
 1 引言第11-12页
 2 亚麻组织培养研究进展第12-15页
   ·细胞、组织和器官的培养第12-13页
   ·体细胞胚胎发生第13页
   ·原生质体发生研究第13-14页
   ·细胞悬浮培养第14页
   ·花药和花粉粒培养第14-15页
 3 亚麻遗传转化研究进展第15-16页
 4 T-DNA插入标签技术研究进展第16-23页
   ·T-DNA插入突变的几种策略第17-23页
     ·T-DNA插入突变的几种策略第17-20页
     ·T-DNA插入突变群体的饱和性第20-21页
     ·T-DNA整合特性第21页
     ·T-DNA插入侧翼序列的扩增及分析第21-23页
 5 技术路线第23页
 6 本研究的目的意义第23-24页
   ·高效亚麻组织培养再生体系的建立及基因型的筛选第24页
   ·农杆菌介导亚麻转化体系的优化第24页
   ·亚麻遗传转化检测体系的建立第24页
 7 本研究的创新性第24-26页
第二章 亚麻组织培养再生体系的建立第26-38页
 1 试验材料第26页
   ·供验材料第26页
   ·主要化学试剂与仪器设备第26页
 2 实验方法第26-28页
   ·培养条件第26页
   ·观察与统计方法第26-27页
   ·无菌苗的获得及愈伤组织诱导第27页
   ·愈伤组织的分化第27页
   ·不定芽的诱导第27页
   ·不定芽的生根第27页
   ·基本培养基第27-28页
 3 结果与分析第28-34页
   ·不同激素配比对下胚轴直接诱导不定芽的影响第28-29页
   ·不同激素配比对下胚轴愈伤组织再生的影响第29-31页
   ·不同基因型不定芽诱导的差异第31页
   ·苗龄对不定芽诱导的影响第31-32页
   ·不同基本培养基对下胚轴诱导的影响第32页
   ·光照条件对下胚轴诱导的影响第32-33页
   ·不定芽的生根培养第33页
   ·下胚轴再生植株的驯化移栽第33-34页
 4 讨论第34-38页
   ·基本培养基及不同外植体的影响第34页
   ·植物生长调节剂对愈伤组织诱导、再生及不定芽诱导的影响第34-35页
   ·组织培养中的玻璃化现象第35页
   ·外植体的取材时间及外植体的选择第35-36页
   ·活性炭的使用第36页
   ·糖类及其浓度的选择第36-38页
第三章 亚麻遗传转化体系研究第38-54页
 1 材料与试剂第38-39页
   ·材料第38-39页
     ·主要试剂第38页
     ·培养基第38-39页
       ·植物组织基本培养基第38页
       ·细菌培养基第38-39页
 2 实验方法第39-42页
   ·工程菌的制备第39页
   ·转化子的鉴定第39-40页
     ·菌落PCR检测第39-40页
     ·质粒PCR检测第40页
   ·农杆菌介导的亚麻遗传转化体系建立第40-41页
     ·实生苗的获得第40页
     ·根癌农杆菌浸染液的准备第40-41页
     ·抗生素浓度筛选实验第41页
     ·外植体预培养时间对转化的影响第41页
     ·农杆菌悬浮培养基的比较实验第41页
     ·农杆菌菌液浓度对转化效果的影响第41页
     ·共培养温度与农杆菌侵染力关系第41页
     ·共培养时间对转化的影响第41页
   ·程序化转化体系的建立及其有效性的验证第41-42页
   ·转化亚麻的分子生物学的检测第42页
     ·转化亚麻的Gus检测第42页
     ·亚麻总DNA的提取第42页
     ·转基因亚麻的PCR检测第42页
 3 结果与分析第42-52页
   ·卡那霉素、氨节青霉素、头孢霉素对亚麻白花品种分化能力的影响第42-43页
   ·外植体预培养时间对转化的影响第43-44页
   ·农杆菌悬浮培养基的比较实验第44-45页
   ·农杆菌菌液浓度对转化效果的影响第45页
   ·共培养温度与农杆菌侵染力关系第45-46页
   ·共培养时间对转化的影响第46页
   ·不同农杆菌菌株对亚麻转化效率的影响第46-47页
   ·活性炭在筛选培养中的作用第47页
   ·农杆菌介导亚麻遗传转化体系的建立第47-50页
   ·转化亚麻的Gus检测第50-51页
   ·转基因亚麻的PCR检测第51-52页
   ·亚麻遗传转化检测体系的建立第52页
 4 讨论与分析第52-54页
   ·关于影响农杆菌介导亚麻下胚轴遗传转化的因素探讨第52-53页
   ·预培养对转化的影响第53页
   ·共培养时间对转化的影响第53页
   ·活性炭在筛选过程中的负作用第53-54页
第四章 结论第54-56页
 1 亚麻白花品种不定芽的高频植株再生体系的建立第54页
 2 亚麻白花品种高效遗传转化体系的建立第54页
 3 亚麻遗传转化检测体系的建立第54-56页
参考文献第56-64页
缩写词第64-65页
致谢第65-67页
在读期间发表的论文第67页

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