| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1 引言 | 第11页 |
| 2 核糖体失活蛋白概述 | 第11-13页 |
| ·核糖体失活蛋白的分类 | 第11-12页 |
| ·核糖体失活蛋白的生理功能 | 第12-13页 |
| 3 苦瓜抗HIV毒蛋白MAP30 | 第13-22页 |
| ·苦瓜的功效研究 | 第13页 |
| ·MAP30的结构和基本特征 | 第13-15页 |
| ·MAP30蛋白的功能与作用机制 | 第15-17页 |
| ·MAP30蛋白的药理作用 | 第17-20页 |
| ·MAP30的免疫原性及其他 | 第20页 |
| ·MAP30的基因克隆和重组研究进展 | 第20-21页 |
| ·MAP30在医学和农业上的应用 | 第21-22页 |
| 4 本研究的目的意义 | 第22-23页 |
| 第二章 不同苦瓜品种中MAP30基因的克隆及序列分析 | 第23-35页 |
| 1 引言 | 第23页 |
| 2 材料和方法 | 第23-28页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·方法 | 第25-28页 |
| ·引物设计 | 第25页 |
| ·苦瓜种子的发芽 | 第25-26页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第26页 |
| ·MAP30基因的扩增及检测 | 第26页 |
| ·PCR产物回收、纯化 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第27页 |
| ·PCR扩增产物与pMD18-T载体的连接与转化 | 第27页 |
| ·转化大肠杆菌感受态细胞 | 第27页 |
| ·阳性克隆筛选及鉴定 | 第27-28页 |
| ·序列分析 | 第28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-33页 |
| ·MAP30基因的扩增及阳性克隆的鉴定 | 第28-29页 |
| ·阳性克隆的PCR鉴定 | 第29页 |
| ·目的基因MAP30序列分析 | 第29-31页 |
| ·BC-MAP30和YT-MAP30蛋白的基本性质预测 | 第31页 |
| ·BC-MAP30和YT-MAP30蛋白质的二级结构预测 | 第31-32页 |
| ·BC-MAP30和YT-MAP30蛋白与其它RIPs氨基酸同源性的比较分析 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-34页 |
| 5 结论 | 第34-35页 |
| 第三章 YT-MAP30基因的克隆及原核表达 | 第35-53页 |
| 1 引言 | 第35-36页 |
| 2 材料和方法 | 第36-45页 |
| ·材料 | 第36-38页 |
| ·方法 | 第38-45页 |
| ·YT-MAP30片段表达载体构建策略 | 第38-39页 |
| ·引物设计 | 第39页 |
| ·YT_f-MAP30和YT_m-MAP30克隆载体的构建及鉴定 | 第39-41页 |
| ·YT_f-MAP30和YT_m-MAP30表达载体的构建及鉴定 | 第41-42页 |
| ·YT_f-MAP30和YT_m-MAP30的诱导表达 | 第42页 |
| ·重组蛋白SDS-PAGE分析 | 第42-43页 |
| ·pET-YT_m/MAP30-BL21工程菌重组蛋白的可溶性分析 | 第43-44页 |
| ·YT_m-MAP30表达产物western blot分析 | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-50页 |
| ·YT_f-MAP30和YT_m-MAP30片段的PCR扩增 | 第45页 |
| ·重组克隆载体质粒pMD-YT_f-MAP30和pMD-YT_m-MAP30的鉴定 | 第45-46页 |
| ·重组表达质粒pET-YT_f-MAP30和pET-YT_m-MAP30的鉴定 | 第46-47页 |
| ·工程菌pET-YT_f/MAP30-BL21和pET-YT_m/MAP30-BL21的构建 | 第47页 |
| ·重组蛋白SDS-PAGE分析 | 第47-50页 |
| ·YT_f-MAP30表达产物的SDS-PAGE分析 | 第47-48页 |
| ·YT_m-MAP30表达产物的SDS-PAGE分析 | 第48-50页 |
| ·YT_m-MAP30表达产物western blot分析 | 第50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-62页 |
| 在读期间发表文章 | 第62页 |
