| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略词 | 第8-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-27页 |
| ·血小板源性生长因子及其受体(PDGF/PDGFR) | 第9-13页 |
| ·血小板源性生长因子家族(platelet derived growth facto,PDGF) | 第9-11页 |
| ·血小板源性生长因子受体(platelet derived growth factor receptor PDGFR) | 第11-13页 |
| ·PDGF/PDGFR与肿瘤的淋巴转移 | 第13-17页 |
| ·肿瘤的淋巴转移 | 第13-15页 |
| ·PDGF/PDGFR在肿瘤淋巴转移中的作用 | 第15-16页 |
| ·可溶性受体(soluble receptor) | 第16-17页 |
| ·杆状病毒表达载体系统(baculovirus expression vectors system BEVS) | 第17-25页 |
| ·杆状病毒表达载体系统(BEVS)的特点 | 第18-20页 |
| ·杆状病毒表达载体系统构件 | 第20-23页 |
| ·宿主细胞-昆虫细胞 | 第23-25页 |
| ·本课题目的与技术路线 | 第25-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-38页 |
| ·主要仪器 | 第27-28页 |
| ·材料 | 第28-31页 |
| ·细胞株及质粒 | 第28页 |
| ·引物和测序 | 第28页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第28-29页 |
| ·培养基的配制、其他常用试剂的配制 | 第29-31页 |
| ·方法 | 第31-38页 |
| ·重组病毒rBacmid-sPDGFRβ/Fc的构建及其在昆虫细胞Sf9中的表达 | 第31-36页 |
| ·昆虫细胞Sf9的培养 | 第36-37页 |
| ·蛋白表达、纯化及活性测定 | 第37-38页 |
| 第三章 结果与分析 | 第38-59页 |
| ·重组病毒rBacmid-sPDGFRβ/Fc的构建 | 第38-42页 |
| ·转移质粒pFastbac-sPDGFRβ/Fc的构建 | 第38-39页 |
| ·sPDGFRβ/Fc基因扩增 | 第38-39页 |
| ·重组rBacmid-sPDGFRβ/Fc DNA的PCR及其PCR产物酶切验证 | 第39-40页 |
| ·重组病毒上清的免疫检测-----dot-ELISA | 第40-41页 |
| ·Western blot分析sPDGFRβ/Fc蛋白的大小 | 第41-42页 |
| ·小结 | 第42页 |
| ·昆虫细胞Sf9的培养 | 第42-54页 |
| ·表征细胞生长的参数 | 第42-43页 |
| ·适应无血清Sf9细胞系的建立 | 第43-45页 |
| ·昆虫细胞Sf9补加营养物质的贴壁培养 | 第45-49页 |
| ·昆虫细胞的悬浮培养 | 第49-53页 |
| ·小结 | 第53-54页 |
| ·蛋白表达、纯化及活性测定 | 第54-59页 |
| ·表征病毒感染的参数 | 第54-55页 |
| ·蛋白表达时间的优化 | 第55-56页 |
| ·sPDGFRβ/Fc蛋白的ProteinA亲和层析 | 第56-57页 |
| ·sPDGFRβ/Fc蛋白的MTT活性分析 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 第四章 讨论 | 第59-66页 |
| ·可溶性受体PDGFR/Fc的构建策略 | 第59-60页 |
| ·杆状病毒表达系统与外源蛋白的表达 | 第60-62页 |
| ·蛋白酶的作用 | 第62-63页 |
| ·昆虫细胞的培养 | 第63-66页 |
| ·昆虫细胞无血清悬浮培养 | 第63-65页 |
| ·昆虫细胞的补料培养 | 第65-66页 |
| 第五章 结论与展望 | 第66-71页 |
| ·结论 | 第66页 |
| ·展望 | 第66-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
