| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第7-30页 |
| ·侵染马铃薯的RNA病毒 | 第7-10页 |
| ·马铃薯抗病基因工程 | 第10-15页 |
| ·利用病毒基因的马铃薯抗病毒基因工程 | 第10-13页 |
| ·利用非病毒来源的基因的马铃薯抗病毒基因工程 | 第13-15页 |
| ·植物RNA病毒寄主因子研究进展 | 第15-19页 |
| ·植物转录后基因沉默 | 第19-25页 |
| ·反义RNA(antisense RNA)技术 | 第19-21页 |
| ·RNA干涉(RNA interference)技术 | 第21-24页 |
| ·转录后基因沉默的特征 | 第24-25页 |
| ·双子叶植物的遗传转化 | 第25-29页 |
| ·双子叶植物遗传转化的受体系统应具备的条件 | 第25-26页 |
| ·双子叶植物遗传转化的载体系统 | 第26页 |
| ·双子叶植物遗传转化的方法 | 第26-29页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第29-30页 |
| 第二章 材料与方法 | 第30-48页 |
| ·细菌菌株、培养基及其它溶液的种类与组成 | 第30-34页 |
| ·细菌菌株与质粒 | 第30页 |
| ·培养基 | 第30-31页 |
| ·激素、抗生素及溶液的配制 | 第31-33页 |
| ·酶制剂和化学制剂 | 第33-34页 |
| ·试剂盒 | 第34页 |
| ·马铃薯品种 | 第34页 |
| ·基因克隆及常规分子生物学操作 | 第34-45页 |
| ·马铃薯总RNA的提取 | 第34-36页 |
| ·马铃薯总DNA的提取 | 第36页 |
| ·感受态细菌的制备 | 第36-37页 |
| ·质粒 DNA的转化 | 第37页 |
| ·质粒 DNA的提取 | 第37-38页 |
| ·农杆菌的三亲本结合 | 第38页 |
| ·DNA片段末端的补平与载体的脱磷酸化 | 第38-39页 |
| ·限制性内切酶反应与连接反应 | 第39-40页 |
| ·3’-RACE和5'RACE反应 | 第40-42页 |
| ·PCR反应 | 第42-43页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第43页 |
| ·从琼脂糖凝胶中回收目的DNA片段 | 第43-44页 |
| ·转基因马铃薯的分子鉴定 | 第44-45页 |
| ·马铃薯外植体愈伤组织的培养及遗传转化 | 第45-48页 |
| ·诱导茎段愈伤组织法转化马铃薯组培苗 | 第45-46页 |
| ·叶圆片法转化马铃薯组培苗 | 第46-47页 |
| ·转基因马铃薯组培苗的无性扩繁与移栽再生 | 第47-48页 |
| 第三章 结果与分析 | 第48-80页 |
| ·马铃薯StTOM3基因全长cDNA的克隆 | 第48-58页 |
| ·马铃薯总 RNA的浓度及质量 | 第48页 |
| ·与拟南芥AtTOM3基因有较高同源性的马铃薯EST序列 | 第48-49页 |
| ·马铃薯StTOM3基因全长cDNA | 第49-52页 |
| ·StTOM3基因全长cDNA的序列分析 | 第52-54页 |
| ·StTOM3基因与拟南芥AtTOM3基因同源性比较 | 第54-57页 |
| ·StTOM3基因编码的蛋白质的疏水性及跨膜区域 | 第57-58页 |
| ·StTOM3基因编码的蛋白质的二级结预测 | 第58页 |
| ·马铃薯StTOM3基因组DNA的克隆和序列分析 | 第58-61页 |
| ·马铃薯StTOM3基因组DNA片段的克隆 | 第58-59页 |
| ·马铃薯StTOM3基因组DNA片段的亚克隆与序列分析 | 第59-61页 |
| ·StTOM3基因组DNA片段与StTOM3全长cDNA的比较 | 第61-62页 |
| ·StTOM3基因沉默表达载体的构建 | 第62-72页 |
| ·StTOM3基因共抑制与反义RNA表达质粒的构建 | 第62-64页 |
| ·StTOM3基因RNA干扰表达载体的构建 | 第64-72页 |
| ·马铃薯再生体系的建立及遗传转化 | 第72-76页 |
| ·不同激素水平对马铃薯抗性愈伤再生体系的影响 | 第72-73页 |
| ·预培养对转化效率的影响 | 第73页 |
| ·共培养过程影响马铃薯遗传转化的因素 | 第73-74页 |
| ·头孢霉素与羧苄青霉素浓度对农杆菌EHA105生长的影响 | 第74-75页 |
| ·选择压的确定及选择压加入时间对转化效率的影响 | 第75-76页 |
| ·马铃薯转基因植株的分子鉴定 | 第76-80页 |
| 第四章 讨论 | 第80-84页 |
| ·马铃薯StTOM3基因 | 第80-81页 |
| ·应用不同的基因沉默表达载体验证马铃薯StTOM3基因的功能 | 第81页 |
| ·StTOM3基因编码产物在马铃薯生长中的作用 | 第81-82页 |
| ·不同马铃薯外植体类型对农杆菌介导的遗传转化效率的影响 | 第82页 |
| ·不同马铃薯品种对农杆菌介导的遗传转化效率的影响 | 第82-83页 |
| ·结论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-93页 |
| 附录一 StTOM3基因组DNA序列 | 第93-95页 |
| 附录二 缩略词及中文对照 | 第95-97页 |
| 附录三 实验常用培养基、溶液及其配制 | 第97-100页 |
| 附录四 马铃薯遗传转化用培养基及激素、抗生素使用浓度 | 第100-102页 |
| 附录五 实验中用到的主要仪器 | 第102-103页 |
| 致谢 | 第103页 |
