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热带牧草黑籽雀稗再生体系建立及AtGolS2基因克隆和载体构建

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-9页
1 前言第9-22页
   ·热带牧草黑籽雀稗再生体系建立第9-13页
     ·组织培养及其理论基础第9页
     ·植物组织培养的状况第9-10页
       ·国际上植物组织培养的概况第9-10页
       ·我国植物组织培养的概况第10页
     ·植物组织培养的应用及意义第10-12页
       ·无性系快速繁殖第10-11页
       ·离体花药—花粉培养的单倍体育种第11页
       ·药用植物的工厂化生产第11页
       ·种质的保存和基因库的建立第11页
       ·突变体的筛选培育第11-12页
     ·黑籽雀稗的概述第12页
       ·黑籽雀稗的原产极其分布第12页
       ·黑籽雀稗生物学特征第12页
     ·国外和国内对黑籽雀稗的研究第12-13页
       ·国外对黑籽雀稗的研究第12-13页
       ·国内对黑籽雀稗的研究第13页
     ·本研究目的和意义第13页
   ·ATGOLS2 基因的克隆和表达载体构建第13-22页
     ·干旱给作物带来的危害第13-14页
     ·植物旱害的成因第14页
     ·干旱伤害植物的机理第14页
     ·植物适应干旱机理第14-17页
       ·抗旱植物的形态特征(形态学指标)第15-16页
       ·抗旱植物生理生化特性第16-17页
     ·农业上避免作物干旱的途径研究第17-21页
       ·科学合理的栽培耕作制度第17-20页
       ·利用常规和现代的育种技术培育抗旱品种第20-21页
     ·研究目的与意义第21-22页
   ·研究内容第22页
2 材料和方法第22-35页
   ·材料第22-24页
     ·植物材料第22页
     ·菌株第22页
     ·质粒第22-23页
     ·仪器和试剂第23-24页
       ·主要仪器设备第23页
       ·试剂第23-24页
   ·外植体的选择第24页
     ·外植体的准备第24页
     ·外植体的消毒第24页
   ·培养基及培养条件第24-29页
     ·基本培养基第24页
     ·以成熟种子为外植体的组培体系第24-26页
     ·培养条件第26页
     ·以茎尖为外植体的组培体系第26-27页
     ·培养条件第27页
     ·观察和统计方法第27-28页
     ·实验设计第28页
     ·实验方法第28-29页
       ·成熟种子(成熟胚)为外植体第28-29页
       ·茎尖为外植体第29页
   ·载体的构建方法第29-35页
     ·质粒制备和纯化(王关林等,2002)第29-32页
       ·质粒的提取第29页
       ·质粒的纯化第29-30页
       ·琼脂糖凝胶电泳分析第30页
       ·胶回收方法第30-31页
       ·大肠杆菌的转化方法第31-32页
     ·拟南芥总 RNA 的提取第32页
       ·拟南芥种子消毒第32页
       ·拟南芥的人工培养第32页
       ·拟南芥总 RNA 的提取方法(TRIzol 法)第32页
     ·AtGoLS2 基因的克隆第32-34页
       ·引物设计第32-33页
       ·扩增反应第33-34页
     ·植物表达载体pVKH-35S-AtGoLS2 构建第34-35页
3 结果与分析第35-43页
   ·诱导愈伤第35-36页
     ·不同外植体的筛选第35-36页
   ·生长调节物质对成熟种子为外植体诱导愈伤的影响第36页
     ·2,4-D 浓度对愈伤诱导的影响第36页
   ·成熟种子为外植体的继代和分化培养第36-37页
     ·不同浓度的2,4-D 与 KT 组合对继代愈伤组织的影响第36-37页
     ·不同浓度6-BA 对胚性愈伤分化产生的影响第37页
   ·成熟种子为外植体的生根培养和壮苗培养第37-38页
     ·不同生根培养基对植株丛生根能力的影响第38页
   ·茎尖为外植体的愈伤组织诱导第38页
   ·不同土壤条件对试管苗移栽成活率的影响第38页
   ·目的基因的分离和克隆第38-42页
   ·PVKH-35S–ATGOLS2 植物表达载体的构建方案第42-43页
     ·基因AtGoLS2 相关的表达载体构建方案第42页
     ·pVKH-35S-AtGolS2 载体的构建和鉴定第42-43页
4 讨论第43-45页
   ·关于外植体的选择第43页
   ·黑籽雀稗组织培养过程中一些生长调节物质的使用问题第43-44页
   ·ATGOLS2 基因的克隆和在热带作物上的应用及其展望第44页
   ·表达载体的构建第44-45页
5 结论第45-46页
参考文献第46-53页
附录1:黑籽雀稗组织培养全过程图第53-56页
附录2:研究生小结第56-57页
致谢第57-58页
详细摘要第58-59页

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