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色盐杆菌ST307甜菜碱合成酶基因的克隆与功能分析

中文摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
缩略词第13-14页
第一章 文献综述第14-30页
   ·中度嗜盐菌研究概要第14-16页
   ·中度嗜盐菌的渗透调节机制第16-20页
     ·相容性溶质的概念及种类第16-17页
     ·相容性溶质的积累及合成机理第17-20页
   ·甜菜碱的研究现状第20-23页
     ·甜菜碱的分布第20-22页
     ·细菌中的甜菜碱第22页
     ·甜菜碱脱氢酶基因研究现状第22-23页
   ·克隆 DNA 侧翼序列的主要方法第23-26页
     ·RACE 技术第23-25页
     ·染色体步行技术第25-26页
   ·中度嗜盐菌耐盐基因的克隆第26-28页
     ·V.prahaemolyticus A12 的 proBA 基因的克隆第26-27页
     ·四氢嘧啶合成酶基因的克隆第27页
     ·甘氨酸甜菜碱合成酶基因的克隆第27-28页
   ·本研究的立题依据、研究内容及技术路线第28-30页
     ·立题依据第28页
     ·研究内容第28-29页
     ·技术路线第29-30页
第二章 不同种类阴阳离子对色盐杆菌 ST307 生长的影响第30-37页
   ·材料与方法第30-32页
     ·材料第30页
     ·主要试剂第30页
     ·主要仪器第30-31页
     ·培养基第31页
     ·菌种保存第31页
     ·不同种类阴阳离子对色盐杆菌 ST307 的生长影响的测定第31-32页
     ·不同种类阳离子对色盐杆菌 ST307 的生长影响的测定第32页
     ·不同种类阴离子对色盐杆菌 ST307 的生长影响的测定第32页
   ·结果与分析第32-35页
   ·讨论第35-36页
   ·本章小结第36-37页
第三章 色盐杆菌 ST307 甜菜碱提取分析第37-42页
   ·实验材料与方法第37-39页
     ·材料第37页
     ·主要试剂第37页
     ·主要仪器第37-38页
     ·培养基第38页
     ·甜菜碱的提取与测定第38-39页
   ·结果与分析第39-40页
     ·甜菜碱的提取与检测第39-40页
     ·不同盐浓度下色盐杆菌 ST307 中甜菜碱的提取与测定第40页
   ·讨论第40-41页
   ·本章小结第41-42页
第四章 甜菜碱醛脱氢酶全基因的克隆与序列分析第42-60页
   ·实验材料与方法第42-47页
     ·材料第42页
     ·主要试剂第42-43页
     ·主要仪器第43页
     ·培养基第43页
     ·色盐杆菌 ST307 基因组 DNA 的提取第43-44页
     ·DNA 切胶回收第44-45页
     ·PCR 引物设计与合成第45-46页
     ·甜菜碱合成酶基因序列的扩增与测序第46页
     ·甜菜碱合成酶基因全序列的拼接与提交第46页
     ·甜菜碱合成酶基因的生物信息学分析软件第46-47页
   ·实验结果与分析第47-57页
     ·色盐杆菌 ST307 betB 基因的部分序列扩增第47-48页
     ·CODEHOP 法扩增色盐杆菌 ST307 胆碱脱氢酶 betA 基因的部分片段第48-50页
     ·色盐杆菌 ST307 betB 基因两端序列的扩增第50-51页
     ·色盐杆菌 ST307 betB 基因全序列的拼接与提交第51-52页
     ·色盐杆菌 ST307 betB 基因序列的生物信息学分析第52-57页
   ·讨论第57-58页
   ·本章小节第58-60页
第五章 甜菜碱醛脱氢酶原核表达分析第60-72页
   ·材料与方法第60-67页
     ·材料第60-61页
     ·主要试剂第61-62页
     ·主要仪器第62页
     ·培养基第62页
     ·色盐杆菌 ST307 BADH 全长基因的 PCR 扩增第62页
     ·甜菜碱醛脱氢酶基因与克隆载体的连接第62-65页
     ·重组表达质粒的构建第65-67页
     ·外源基因的诱导表达第67页
   ·结果与分析第67-70页
     ·甜菜碱醛脱氢酶基因的 PCR 扩增第67-68页
     ·重组克隆质粒的构建与酶切分析第68页
     ·重组表达质粒的构建与酶切分析第68-69页
     ·重组菌的诱导表达耐盐性研究第69-70页
   ·讨论第70-71页
   ·本章小结第71-72页
全文总结第72-74页
参考文献第74-81页
致谢第81-82页
攻读学位期间发表的学术论文第82页

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