中文摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
缩略词 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-30页 |
·中度嗜盐菌研究概要 | 第14-16页 |
·中度嗜盐菌的渗透调节机制 | 第16-20页 |
·相容性溶质的概念及种类 | 第16-17页 |
·相容性溶质的积累及合成机理 | 第17-20页 |
·甜菜碱的研究现状 | 第20-23页 |
·甜菜碱的分布 | 第20-22页 |
·细菌中的甜菜碱 | 第22页 |
·甜菜碱脱氢酶基因研究现状 | 第22-23页 |
·克隆 DNA 侧翼序列的主要方法 | 第23-26页 |
·RACE 技术 | 第23-25页 |
·染色体步行技术 | 第25-26页 |
·中度嗜盐菌耐盐基因的克隆 | 第26-28页 |
·V.prahaemolyticus A12 的 proBA 基因的克隆 | 第26-27页 |
·四氢嘧啶合成酶基因的克隆 | 第27页 |
·甘氨酸甜菜碱合成酶基因的克隆 | 第27-28页 |
·本研究的立题依据、研究内容及技术路线 | 第28-30页 |
·立题依据 | 第28页 |
·研究内容 | 第28-29页 |
·技术路线 | 第29-30页 |
第二章 不同种类阴阳离子对色盐杆菌 ST307 生长的影响 | 第30-37页 |
·材料与方法 | 第30-32页 |
·材料 | 第30页 |
·主要试剂 | 第30页 |
·主要仪器 | 第30-31页 |
·培养基 | 第31页 |
·菌种保存 | 第31页 |
·不同种类阴阳离子对色盐杆菌 ST307 的生长影响的测定 | 第31-32页 |
·不同种类阳离子对色盐杆菌 ST307 的生长影响的测定 | 第32页 |
·不同种类阴离子对色盐杆菌 ST307 的生长影响的测定 | 第32页 |
·结果与分析 | 第32-35页 |
·讨论 | 第35-36页 |
·本章小结 | 第36-37页 |
第三章 色盐杆菌 ST307 甜菜碱提取分析 | 第37-42页 |
·实验材料与方法 | 第37-39页 |
·材料 | 第37页 |
·主要试剂 | 第37页 |
·主要仪器 | 第37-38页 |
·培养基 | 第38页 |
·甜菜碱的提取与测定 | 第38-39页 |
·结果与分析 | 第39-40页 |
·甜菜碱的提取与检测 | 第39-40页 |
·不同盐浓度下色盐杆菌 ST307 中甜菜碱的提取与测定 | 第40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
·本章小结 | 第41-42页 |
第四章 甜菜碱醛脱氢酶全基因的克隆与序列分析 | 第42-60页 |
·实验材料与方法 | 第42-47页 |
·材料 | 第42页 |
·主要试剂 | 第42-43页 |
·主要仪器 | 第43页 |
·培养基 | 第43页 |
·色盐杆菌 ST307 基因组 DNA 的提取 | 第43-44页 |
·DNA 切胶回收 | 第44-45页 |
·PCR 引物设计与合成 | 第45-46页 |
·甜菜碱合成酶基因序列的扩增与测序 | 第46页 |
·甜菜碱合成酶基因全序列的拼接与提交 | 第46页 |
·甜菜碱合成酶基因的生物信息学分析软件 | 第46-47页 |
·实验结果与分析 | 第47-57页 |
·色盐杆菌 ST307 betB 基因的部分序列扩增 | 第47-48页 |
·CODEHOP 法扩增色盐杆菌 ST307 胆碱脱氢酶 betA 基因的部分片段 | 第48-50页 |
·色盐杆菌 ST307 betB 基因两端序列的扩增 | 第50-51页 |
·色盐杆菌 ST307 betB 基因全序列的拼接与提交 | 第51-52页 |
·色盐杆菌 ST307 betB 基因序列的生物信息学分析 | 第52-57页 |
·讨论 | 第57-58页 |
·本章小节 | 第58-60页 |
第五章 甜菜碱醛脱氢酶原核表达分析 | 第60-72页 |
·材料与方法 | 第60-67页 |
·材料 | 第60-61页 |
·主要试剂 | 第61-62页 |
·主要仪器 | 第62页 |
·培养基 | 第62页 |
·色盐杆菌 ST307 BADH 全长基因的 PCR 扩增 | 第62页 |
·甜菜碱醛脱氢酶基因与克隆载体的连接 | 第62-65页 |
·重组表达质粒的构建 | 第65-67页 |
·外源基因的诱导表达 | 第67页 |
·结果与分析 | 第67-70页 |
·甜菜碱醛脱氢酶基因的 PCR 扩增 | 第67-68页 |
·重组克隆质粒的构建与酶切分析 | 第68页 |
·重组表达质粒的构建与酶切分析 | 第68-69页 |
·重组菌的诱导表达耐盐性研究 | 第69-70页 |
·讨论 | 第70-71页 |
·本章小结 | 第71-72页 |
全文总结 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第82页 |