第一部分 文献综述 | 第1-21页 |
·球孢白僵菌及其杀虫作用 | 第8页 |
·昆虫病原真菌致病机理的研究进展 | 第8-14页 |
·昆虫病原真菌感染寄主的基本过程 | 第10页 |
·分生孢子的吸附和萌发 | 第10页 |
·侵染结构的形成 | 第10-11页 |
·穿透昆虫体壁 | 第11-13页 |
·昆虫病原真菌在寄主血腔中生长 | 第13-14页 |
·真菌原生质体研究进展 | 第14-17页 |
·原生质体的分离技术 | 第15-16页 |
·原生质体融合技术 | 第16页 |
·原生质体的应用 | 第16页 |
·原生质体的分离条件 | 第16-17页 |
·细胞壁形成和原生质体再生 | 第17页 |
·原生质体遗传转化研究 | 第17-21页 |
·原生质体转化方法:PEG法,基因枪法,农杆菌介导法 | 第18-19页 |
·原生质体转化载体及转化条件 | 第19页 |
·筛选标记 | 第19-21页 |
第二部分 引言 | 第21-24页 |
·研究背景意义 | 第21-23页 |
·研究技术路线图 | 第23-24页 |
第三部分 球孢白僵菌菌丝体、分生孢子最适培养基的筛选 | 第24-28页 |
·材料与方法 | 第24-25页 |
·菌株 | 第24页 |
·培养基 | 第24页 |
·涂平板观察法 | 第24页 |
·生长曲线法 | 第24页 |
·抗生素筛选 | 第24-25页 |
·结果与分析 | 第25-27页 |
·涂平板观察法筛选结果 | 第25页 |
·生长曲线法筛选结果与最适培养基分析 | 第25-27页 |
·结论 | 第27-28页 |
第四部分 球孢白僵菌菌丝体原生质体获得和再生恢复培养 | 第28-35页 |
·材料与方法 | 第28-30页 |
·球孢白僵菌菌株 | 第28页 |
·主要培养基及试剂 | 第28页 |
·原生质体获得方法 | 第28页 |
·菌龄培养条件筛选 | 第28-29页 |
·不同浓度巯基乙醇处理菌丝筛选 | 第29页 |
·最适酶筛选 | 第29页 |
·原生质体获得时最适渗透压稳定剂筛选 | 第29页 |
·原生质体再生恢复时最适渗透压稳定剂筛选 | 第29页 |
·最适再生培养基筛选 | 第29-30页 |
·结果与分析 | 第30-34页 |
·菌龄对原生质体产量的影响 | 第30页 |
·巯基乙醇处理结果与分析 | 第30-31页 |
·最适酶筛选结果与分析 | 第31页 |
·原生质体获得时最适渗透压稳定剂筛选结果与分析 | 第31-32页 |
·原生质体再生恢复时最适渗透压稳定剂筛选结果与分析 | 第32-33页 |
·软硬琼脂培养基对原生质体再生恢复的筛选结果与分析 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-35页 |
第五部分 PEG介导原生质体转化抗除草剂bar基因 | 第35-38页 |
·材料与方法 | 第35-37页 |
·菌株 | 第35页 |
·质粒DNA | 第35页 |
·主要试剂及PGR引物 | 第35页 |
·主要培养基 | 第35-36页 |
·球孢白僵菌培养及原生质体制备 | 第36页 |
·PTF102培养及质粒提取 | 第36页 |
·PEG介导转化 | 第36-37页 |
·转化子PCR鉴定 | 第37页 |
·结果 | 第37页 |
·讨论 | 第37-38页 |
第六部分 球孢白僵菌杀虫相关基因的克隆及初步分析 | 第38-53页 |
·材料和方法 | 第38-41页 |
·菌株 | 第38页 |
·培养基 | 第38页 |
·主要试剂及PCR引物 | 第38-39页 |
·白僵菌DNA提取 | 第39页 |
·PCR反应及片断回收 | 第39页 |
·DH5α感受态的制备 | 第39页 |
·DNA连接、转化 | 第39-40页 |
·质粒提取 | 第40页 |
·重组子PCR鉴定 | 第40页 |
·重组子酶切鉴定 | 第40页 |
·序列测定和序列分析 | 第40-41页 |
·结果与分析 | 第41-51页 |
·玉米螟虫生真菌球孢白僵菌几丁质酶基因的克隆及分析 | 第41-43页 |
·玉米螟虫生真菌球孢白僵菌内切几丁质酶基因的克隆及分析 | 第43-46页 |
·玉米螟虫生真菌球孢白僵菌体壁蛋白酶基因的克隆及分析 | 第46-49页 |
·玉米螟虫生真菌亲环素蛋白基因BbCPLA酶基因的克隆及分析 | 第49-51页 |
·讨论 | 第51-53页 |
主要结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
作者简介 | 第59页 |
发表论文 | 第59页 |