| 1 引言 | 第1-28页 |
| ·禽流感的概述 | 第8-12页 |
| ·禽流感病原及其特性 | 第8-10页 |
| ·禽流感流行的历史和现状 | 第10-12页 |
| ·禽流感病毒的生物学特性 | 第12-18页 |
| ·禽流感病毒的复制 | 第12页 |
| ·禽流感病毒表面蛋白血凝素的结构和功能 | 第12-13页 |
| ·禽流感病毒神经氨酸酶的结构和功能 | 第13-15页 |
| ·禽流感病毒内部基因的结构功能 | 第15-17页 |
| ·非结构蛋白结构和功能 | 第17-18页 |
| ·A 型流感病毒反向遗传技术 | 第18-21页 |
| ·流感病毒反向遗传技术的发展历史 | 第18-20页 |
| ·流感病毒反向遗传技术的应用 | 第20-21页 |
| ·流感病毒与宿主的免疫反应 | 第21-22页 |
| ·干扰素及其研究进展 | 第22-27页 |
| ·干扰素的发现与分类 | 第22-23页 |
| ·干扰素的产生和分布 | 第23页 |
| ·干扰素的主要生物学功能 | 第23-24页 |
| ·干扰素作用机理 | 第24-26页 |
| ·干扰素及其基因组结构 | 第26页 |
| ·流感病毒 NS1 蛋白对干扰素诱生的影响 | 第26-27页 |
| ·本研究目的和意义 | 第27-28页 |
| 2 实验部分 | 第28-50页 |
| ·H5N1 亚型禽流感病毒反向基因操作技术的建立 | 第28-37页 |
| ·材料和方法 | 第28-33页 |
| ·病毒和实验动物 | 第28页 |
| ·病毒的序列测定 | 第28-30页 |
| ·主要的试剂与仪器 | 第28页 |
| ·RNA 提取与反转录 | 第28页 |
| ·PCR与目的片段的回收 | 第28-29页 |
| ·目的片段的克隆 | 第29-30页 |
| ·序列测定 | 第30页 |
| ·反向遗传技术 | 第30-32页 |
| ·PBD 载体 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·引物 | 第30页 |
| ·病毒RNA提取、反转录与 PCR | 第30-31页 |
| ·重组pBD 质粒的构建 | 第31页 |
| ·病毒拯救 | 第31-32页 |
| ·转染 | 第32页 |
| ·救获病毒的鉴定 | 第32页 |
| ·救获病毒对 SPF 鸡的致病性实验 | 第32-33页 |
| ·病毒和实验动物 | 第32页 |
| ·鸡胚半数感染量（EID50）的测定 | 第32-33页 |
| ·对 SPF 鸡的致病性实验 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-34页 |
| ·两株病毒的序列比较 | 第33页 |
| ·质粒构建 | 第33页 |
| ·转染 | 第33-34页 |
| ·救获病毒鸡胚半数感染量（EID50）的测定 | 第34页 |
| ·救获病毒对 SPF 鸡致病性结果 | 第34页 |
| ·讨论 | 第34-37页 |
| ·H5N1亚型禽流感病毒NS1 149位氨基酸的改变对鸡、鹅致病性的影响 | 第37-41页 |
| ·材料与方法 | 第37-38页 |
| ·实验用病毒 | 第37页 |
| ·实验用动物 | 第37页 |
| ·鸡鹅鼻腔感染实验 | 第37页 |
| ·感染鸡、鹅组织病毒滴定 | 第37-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-39页 |
| ·SPF 鸡组织病毒滴定结果 | 第38页 |
| ·非免疫鹅组织病毒滴定结果 | 第38页 |
| ·感染鸡、鹅10 天后发病死亡情况 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| ·H5N1 亚型禽流病毒 NS1 149 位氨基酸的改变影响干扰素的诱生 | 第41-50页 |
| ·材料和方法 | 第41-43页 |
| ·病毒 | 第41页 |
| ·实验用细胞 | 第41页 |
| ·主要用的试剂与仪器 | 第41-42页 |
| ·细胞半数感染量（TCID）测定 | 第42页 |
| ·干扰素的诱生与抗病毒活性的检测 | 第42页 |
| ·不同病毒诱生 IFN-α/β的 RT-PCR 鉴定 | 第42-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-47页 |
| ·病毒在鸡胚成纤维细胞的半数感染量测定 | 第43页 |
| ·VSV-GFP 在诱生干扰素处理的鸡胚成纤维细胞上的复制 | 第43-44页 |
| ·病毒在鸡胚成纤维细胞诱生干扰素抗 VSV-GFP 活性检测 | 第44页 |
| ·病毒在鸡胚成纤维细胞诱生干扰素抗流感病毒 RGD/1/96 活性检测 | 第44-45页 |
| ·病毒在鹅胚成纤维细胞的半数感染量测定 | 第45页 |
| ·VSV-GFP 在诱生干扰素处理的鹅胚成纤维细胞上的复制 | 第45页 |
| ·病毒在鹅胚成纤维细胞诱生干扰素抗 VSV-GFP 活性检 | 第45-46页 |
| ·病毒在鹅胚成纤维细胞诱生干扰素抗流感病毒 RGD/1/96 活性检测 | 第46页 |
| ·不同病毒诱生IFN-α/β的RT-PCR鉴定 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-50页 |
| 3 结论 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-63页 |
| 附录 | 第63-75页 |
| 作者简介 | 第75页 |
