| 目录 | 第1-7页 |
| 论文摘要 | 第7-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 第一章 研究背景 | 第15-36页 |
| §1.1 生物质谱技术 | 第15-22页 |
| ·生物质谱技术简介 | 第15-20页 |
| 1、基质辅助激光解吸电离质谱 | 第15-17页 |
| 2、MALDI基质的选择 | 第17-18页 |
| 3、飞行时间分析器 | 第18-19页 |
| 4、串级质谱技术 | 第19-20页 |
| ·质谱技术在生物分析中的应用 | 第20-22页 |
| 1、分子量测定 | 第20页 |
| 2、肽谱测定 | 第20页 |
| 3、肽序列串级质谱分析 | 第20-21页 |
| 4、蛋白质翻译后修饰 | 第21-22页 |
| §1.2 介孔材料 | 第22-28页 |
| ·介孔材料的合成方法 | 第22-24页 |
| ·介孔材料的生成机理 | 第24-25页 |
| ·介孔材料在生物研究中的应用 | 第25-28页 |
| §1.3 介孔材料在质谱分析与蛋白分离、酶解中的应用展望 | 第28-29页 |
| §1.4 本论文工作概述 | 第29-31页 |
| 参考文献 | 第31-36页 |
| 第二章 新型无机介孔材料用于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 | 第36-66页 |
| §2.1 引言 | 第36-37页 |
| §2.2 实验部分 | 第37-40页 |
| ·仪器与药品 | 第37-38页 |
| ·无机介孔材料的合成 | 第38-39页 |
| ·无机介孔材料的表征 | 第39-40页 |
| ·蛋白酶解 | 第40页 |
| ·样品制备 | 第40页 |
| ·MALDI-TOF-MS的检测 | 第40页 |
| §2.3 结果与讨论 | 第40-63页 |
| ·介孔材料的表征和物理特性对其电离/解吸能力影响 | 第40-50页 |
| 1、多种不同介孔材料的合成与表征 | 第40-42页 |
| 2、介孔材料紫外吸收对MALDI信号的影响 | 第42-46页 |
| 3、介孔材料孔道结构对MALDI电离/解吸过程的影响 | 第46-49页 |
| 4、颗粒大小对样品信号强度的影响 | 第49-50页 |
| ·样品制备条件的优化 | 第50-52页 |
| 1、点样顺序的比较 | 第50-51页 |
| 2、优化条件下的检测限研究 | 第51-52页 |
| ·有序介孔基质与传统有机基质比较 | 第52-56页 |
| 1、介孔基质对小分子肽段的有效检测 | 第52-53页 |
| 2、介孔基质的耐盐性 | 第53-56页 |
| ·介孔基质谱图背景峰的考察以及添加物对谱图的影响 | 第56-59页 |
| 1、背景峰考察 | 第56-57页 |
| 2、尿素影响 | 第57页 |
| 3、酸溶液影响 | 第57-59页 |
| ·有序介孔基质在中小分子检测、蛋白鉴定和肽段测序中的应用 | 第59-63页 |
| 1、有序介孔基质对中小分子的检测 | 第59-61页 |
| 2、介孔基质在蛋白鉴定和肽段测序中的应用 | 第61-63页 |
| §2.4 应用展望 | 第63-64页 |
| §2.5 本章小结 | 第64页 |
| 参考文献 | 第64-66页 |
| 第三章 介孔氧化铁微球材料用于磷酸化蛋白和肽段富集分离中 | 第66-97页 |
| §3.1 引言 | 第66-68页 |
| §3.2 实验部分 | 第68-71页 |
| ·仪器与药品 | 第68页 |
| ·无机介孔材料的合成 | 第68-69页 |
| ·无机介孔材料的表征 | 第69-70页 |
| ·蛋白酶解和磷酸化肽段、蛋白的富集分离 | 第70页 |
| ·MALDI-TOF-MS的检测 | 第70-71页 |
| §3.3 结果与讨论 | 第71-93页 |
| ·介孔氧化铁材料特性表征 | 第71-74页 |
| 1、介孔氧化铁材料的微观结构分析 | 第71-72页 |
| 2、介孔氧化铁材料的物相结构分析 | 第72-73页 |
| 3、介孔氧化铁材料的氮气吸附/脱附表征 | 第73-74页 |
| ·利用介孔氧化铁进行磷酸化肽段富集的条件考察 | 第74-84页 |
| 1、孵育液pH值的影响 | 第74-76页 |
| 2、乙腈含量影响 | 第76-78页 |
| 3、富集分离后的磷酸化肽段MALDI-TOFMS分析中基质的选择 | 第78-80页 |
| 4、磷酸化肽段富集后材料清洗次数的考察 | 第80-82页 |
| 5、洗脱液的选择 | 第82-83页 |
| 6、富集的磷酸化肽段直接点样法的MALDI-TOFMS检测 | 第83-84页 |
| ·最优实验条件下的介孔氧化铁材料富集磷酸化肽段的灵敏度考察 | 第84-85页 |
| ·磷酸化肽段的串级质谱分析 | 第85-87页 |
| ·利用介孔氧化铁对复杂溶液中磷酸化肽段的富集分离 | 第87-92页 |
| 1、磷酸化和非磷酸化蛋白混合酶解液中磷酸化肽段的富集 | 第87-90页 |
| 2、不同磷酸化蛋白混合酶解液中磷酸化肽段的富集 | 第90-92页 |
| ·利用介孔氧化铁对磷酸化蛋白的富集分离 | 第92-93页 |
| §3.4 应用展望 | 第93-94页 |
| §3.5 本章小结 | 第94页 |
| 参考文献 | 第94-97页 |
| 第四章 大孔径二氧化硅介孔泡沫材料用于柱上蛋白酶解 | 第97-114页 |
| §4.1 引言 | 第97-98页 |
| §4.2 实验部分 | 第98-101页 |
| ·仪器与药品 | 第98-99页 |
| ·无机介孔材料的合成 | 第99页 |
| ·无机介孔材料的表征 | 第99页 |
| ·Sol-gel 方法毛细管柱塞制备 | 第99页 |
| ·毛细管柱的装填 | 第99-100页 |
| ·柱上酶解的蛋白进样、直接点靶的MALDI分析 | 第100页 |
| ·MALDI-TOF-MS的检测 | 第100-101页 |
| §4.3 结果与讨论 | 第101-111页 |
| ·二氧化硅介孔泡沫(MCFs)材料的表征 | 第101-102页 |
| ·以MCFs颗粒为填料的柱上酶解效率考察 | 第102-105页 |
| 1、固定酶方式的比较 | 第102-104页 |
| 2、酶解柱流动相的影响 | 第104-105页 |
| ·柱填料孔径尺寸对柱上酶解效率的影响 | 第105-107页 |
| ·MCFs酶解柱与MALDI-TOFMS联接体系的检测灵敏度考察 | 第107-108页 |
| ·固定化酶-MCFs酶解柱的储存稳定性考察 | 第108页 |
| ·MCFs毛细管酶解柱的使用重复性考察 | 第108-111页 |
| §4.4 应用展望 | 第111页 |
| §4.5 本章小结 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-114页 |
| 第五章 介孔材料用于在MALDI靶板上蛋白酶解 | 第114-128页 |
| §5.1 引言 | 第114-115页 |
| §5.2 实验部分 | 第115-116页 |
| ·仪器与药品 | 第115页 |
| ·无机介孔材料的合成 | 第115页 |
| ·无机介孔材料的表征 | 第115页 |
| ·蛋白的靶上酶解 | 第115-116页 |
| ·MALDI-TOF-MS的检测 | 第116页 |
| §5.3 结果与讨论 | 第116-126页 |
| ·大孔FDU-12介孔材料的结构表征 | 第116-117页 |
| ·大孔径FDU-12材料用于靶上酶解蛋白 | 第117-118页 |
| ·靶上酶解条件的考察 | 第118-122页 |
| 1、介孔材料上样量的影响 | 第118-119页 |
| 2、酶用量的影响 | 第119-121页 |
| 3、酶解缓冲液pH值的影响 | 第121-122页 |
| ·不同介孔材料提升靶上酶解效率的比较 | 第122-126页 |
| §5.4 应用展望 | 第126页 |
| §5.5 本章小结 | 第126页 |
| 参考文献 | 第126-128页 |
| 发表论文情况 | 第128-129页 |
| 致谢 | 第129-130页 |
