| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-38页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-38页 |
| ·家蚕丝腺的结构和功能 | 第13-15页 |
| ·后部丝腺 | 第14页 |
| ·中部丝腺 | 第14页 |
| ·前部丝腺 | 第14页 |
| ·菲氏腺 | 第14-15页 |
| ·蚕丝蛋白及其结构 | 第15-17页 |
| ·丝素蛋白 | 第15-17页 |
| ·丝素重链蛋白 | 第15-16页 |
| ·丝素轻链蛋白和P25蛋白 | 第16-17页 |
| ·丝胶蛋白 | 第17页 |
| ·丝蛋白基因的调控研究进展 | 第17-37页 |
| ·基因表达调控的相关研究 | 第17-21页 |
| ·顺式作用调控 | 第18-20页 |
| ·反式作用调节 | 第20页 |
| ·其它 | 第20-21页 |
| ·家蚕丝蛋白基因调控的研究方法体系 | 第21-30页 |
| ·体外研究方法 | 第21-22页 |
| ·瞬时表达系统 | 第22-23页 |
| ·转基因体系 | 第23-26页 |
| ·利用果蝇系统研究来家蚕基因的方法 | 第26页 |
| ·Bac-to-Bac系统介导的体内瞬时表达研究 | 第26-30页 |
| ·丝蛋白基因的调控研究进展 | 第30-37页 |
| ·丝胶1基因的调控研究进展 | 第30-33页 |
| ·其它几种丝胶基因的调控研究 | 第33-34页 |
| ·丝素蛋白基因的调控研究 | 第34-37页 |
| ·开展丝腺研究的意义 | 第37-38页 |
| 第二部分 研究内容 | 第38-93页 |
| 第二章 前言 | 第39-43页 |
| ·研究的背景及意义 | 第39-41页 |
| ·技术路线 | 第41-43页 |
| 第三章 5’端单侧缺失分析Ser1启动子的丝腺表达特异性相关区间 | 第43-65页 |
| ·前言 | 第43-44页 |
| ·材料与方法 | 第44-54页 |
| ·材料 | 第44-45页 |
| ·质粒和菌株 | 第44页 |
| ·家蚕 | 第44页 |
| ·试验材料 | 第44-45页 |
| ·细菌培养及质粒抽提溶液 | 第45页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| ·试验方法 | 第45-54页 |
| ·设计分段缺失Ser1启动子的引物 | 第45-46页 |
| ·PCR扩增6种5'端缺失的Ser1启动子 | 第46页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第46-47页 |
| ·PFFa2-1.6serEGFP质粒和PCR产物的酶切、纯化 | 第47页 |
| ·连接反应 | 第47-48页 |
| ·转化 | 第48页 |
| ·质粒 DNA的小量制备 | 第48-49页 |
| ·6种重组转移载体质粒的鉴定 | 第49页 |
| ·供体质粒转化DH10Bac△EGT细菌 | 第49-50页 |
| ·重组病毒基因组DNA(Bacmid)的分离 | 第50页 |
| ·重组Bacmid的PCR鉴定 | 第50-51页 |
| ·重组 AcMNPV病毒的制备 | 第51-53页 |
| ·病毒的大量扩增、纯化、保存及滴度测定 | 第53-54页 |
| ·EGFP在家蚕组织的表达观察 | 第54页 |
| ·结果 | 第54-63页 |
| ·6种不同长度5’端缺失的Ser1启动子的PCR结果 | 第54-55页 |
| ·Ser1启动子5’端缺失的6种重组转移载体的构建 | 第55-57页 |
| ·6种重组转移载体质粒的鉴定 | 第57页 |
| ·Ser1启动子5’端缺失的六种Bacmid鉴定 | 第57-58页 |
| ·6种重组病毒的扩增及纯化结果 | 第58-59页 |
| ·EGFP在家蚕体内的表达观察结果 | 第59-63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| 第四章 丝腺特异性表达相关功能序列的体内研究 | 第65-79页 |
| ·引言 | 第65-66页 |
| ·设计思路 | 第66-69页 |
| ·研究内容 | 第69-75页 |
| ·设计引物 | 第69页 |
| ·制备6种部分删除的Ser1启动子片段 | 第69-72页 |
| ·△1ABSer片段的扩增 | 第69-70页 |
| ·△2ABSer～△6ABSer片段的扩增 | 第70-72页 |
| ·6种重组转移载体的构建 | 第72-73页 |
| ·重组病毒的构建和扩增 | 第73-74页 |
| ·部分删除Ser1启动子在蚕体内组织的表达观测 | 第74-75页 |
| ·讨论 | 第75-79页 |
| 第五章 与Ser1基因丝腺特异性表达相关的转录因子分析 | 第79-93页 |
| ·引言 | 第79-80页 |
| ·材料与方法 | 第80-88页 |
| ·主要试剂 | 第80-82页 |
| ·核蛋白抽提过程中的试剂 | 第80页 |
| ·Bradford测定蛋白浓度中的试剂 | 第80-81页 |
| ·探针标记中所需的试剂 | 第81页 |
| ·EMSA过程中所需的试剂 | 第81-82页 |
| ·主要仪器 | 第82页 |
| ·实验方法 | 第82-88页 |
| ·中部丝腺及脂肪体核蛋白抽提 | 第82-83页 |
| ·Bradford方法测定核抽提物蛋白浓度 | 第83页 |
| ·探针标记与纯化 | 第83-86页 |
| ·凝胶迁移阻滞实验 | 第86-88页 |
| ·结果 | 第88-89页 |
| ·探针的标记结果 | 第88页 |
| ·中部丝腺和脂肪体核抽提物的制备结果 | 第88页 |
| ·探针与两种核抽提物的结合及竞争实验结果 | 第88-89页 |
| ·讨论 | 第89-93页 |
| 第三部分 总结与展望 | 第93-106页 |
| 第六章 总结与展望 | 第94-96页 |
| ·结论与主要创新点 | 第94-95页 |
| ·展望 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-106页 |
| 第四部分 附录 | 第106-109页 |
| 附录1: 博士期间参与的课题研究 | 第107-108页 |
| 附录2: 博士期间相关论文发表情况 | 第108-109页 |
| 致谢 | 第109-110页 |
| 独创性声明 | 第110页 |
