| 第一章 文献综述 | 第1-22页 |
| ·细胞色素 P450 | 第8-17页 |
| ·细胞色素 P450研究简史 | 第8-9页 |
| ·细胞色素 P450的结构 | 第9-10页 |
| ·P450酶的天然底物 | 第10-11页 |
| ·P450酶催化的反应 | 第11-14页 |
| ·细胞色素 P450 BM-3 | 第14-17页 |
| ·国内外 P450酶催化进展 | 第17-21页 |
| ·酶定向进化简介 | 第17-18页 |
| ·P450酶催化反应进展 | 第18-21页 |
| ·研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 P450 BM-3的发酵和纯化 | 第22-32页 |
| ·前言 | 第22页 |
| ·P450 BM-3的表达 | 第22-24页 |
| ·材料和仪器 | 第22-23页 |
| ·感受态细胞的制备和质粒转化 | 第23-24页 |
| ·大肠杆菌的培养 | 第23页 |
| ·感受态细胞的制备(CaCl_2法)与质粒转化 | 第23-24页 |
| ·菌种保存 | 第24页 |
| ·发酵培养 | 第24页 |
| ·P450BM-3粗酶的制备 | 第24-25页 |
| ·发酵液预处理 | 第24-25页 |
| ·P450 BM-3纯酶的制备 | 第25页 |
| ·分析方法 | 第25-28页 |
| ·总蛋白含量测定 | 第25-26页 |
| ·P450 BM-3含量测定 | 第26-27页 |
| ·P450 BM-3酶活测定 | 第27页 |
| ·纯度鉴定方法 | 第27-28页 |
| ·结果和讨论 | 第28-31页 |
| ·亲和层析 | 第28-29页 |
| ·P450BM3突变酶纯化结果 | 第29-30页 |
| ·DMSO对酶活的影响 | 第30-31页 |
| ·本章小结 | 第31-32页 |
| 第三章 细胞色素 P450 BM-3突变酶经基化吲哚生成靛蓝的研究 | 第32-42页 |
| ·引言 | 第32页 |
| ·材料与方法 | 第32-34页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·实验仪器 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-34页 |
| ·P450BM-3突变酶的表达和纯化 | 第32-33页 |
| ·突变酶和亲本酶光谱分析 | 第33页 |
| ·P450 BM-3突变酶含量的测定 | 第33页 |
| ·突变酶催化吲哚的活性的测定 | 第33页 |
| ·突变酶电子耦合率的测定 | 第33页 |
| ·pH对突变酶经基化叫噪的影响 | 第33-34页 |
| ·亲本酶和突变酶的热稳定性的测定 | 第34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-41页 |
| ·突变酶的光谱分析 | 第34-35页 |
| ·突变酶动力学特征的分析 | 第35-37页 |
| ·突变酶电子耦合效率的分析 | 第37-38页 |
| ·pH对突变酶轻基化叫噪生成靛蓝的影响 | 第38页 |
| ·亲本酶和突变酶的热稳定性 | 第38-39页 |
| ·突变位点与底物结合区域的蛋白质模拟 | 第39-41页 |
| ·本章小结 | 第41-42页 |
| 第四章 游离酶 P450 BM-3催化苯乙烯的初步研究 | 第42-53页 |
| ·前言 | 第42-43页 |
| ·材料与方法 | 第43-45页 |
| ·试剂与仪器 | 第43页 |
| ·分析检测条件 | 第43-45页 |
| ·结果与讨论 | 第45-52页 |
| ·产物的分析与鉴定 | 第45-46页 |
| ·突变酶催化苯乙烯活力的比较 | 第46-47页 |
| ·P450BM-3催化苯乙烯反应进程曲线 | 第47-49页 |
| ·底物浓度对 P450BM-3催化苯乙烯的影响 | 第49页 |
| ·反应体系pH值对反应影响 | 第49-50页 |
| ·温度对反应的影响 | 第50-51页 |
| ·助溶剂 DMSO对反应的影响 | 第51-52页 |
| ·本章小结 | 第52-53页 |
| 第五章 P450 BM-3工程菌催化苯乙烯的初步研究 | 第53-63页 |
| ·引言 | 第53页 |
| ·实验材料和方法 | 第53-55页 |
| ·实验材料 | 第53页 |
| ·实验仪器 | 第53页 |
| ·分析检测条件 | 第53-55页 |
| ·考察因素 | 第55页 |
| ·结果和讨论 | 第55-62页 |
| ·转速对反应的影响 | 第57页 |
| ·反应时间对反应的的影响 | 第57-58页 |
| ·底物浓度对反应的影响 | 第58-59页 |
| ·DMSO浓度对反应的影响 | 第59页 |
| ·温度对反应的影响 | 第59-60页 |
| ·葡萄糖浓度对反应的影响 | 第60-61页 |
| ·底物分批投料 | 第61-62页 |
| ·本章小结 | 第62-63页 |
| 第六章 结论及建议 | 第63-65页 |
| ·结论 | 第63-64页 |
| ·建议 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 攻读硕士期间发表的论文情况 | 第71页 |
