| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要(Abstract) | 第6-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-24页 |
| 一 植物对逆境胁迫适应性的研究进展 | 第13-18页 |
| 1. 植物对逆境胁迫适应性的分子机制 | 第13-16页 |
| ·抗氧化酶系与活性氧的清除 | 第13-15页 |
| ·渗透调节物质的积累 | 第15-16页 |
| ·胁迫诱导蛋白的产生 | 第16页 |
| 2. 胁迫信号的传导和基因表达调控 | 第16-17页 |
| 3. 植物转录因子的结构与调控作用 | 第17-18页 |
| 二 CBF 转录激活因子及其在提高植物抗逆性中的作用 | 第18-21页 |
| 1. 拟南芥CBF 基因家族的发现和结构 | 第18页 |
| 2. CBF 转录激活因子的表达 | 第18-19页 |
| 3. CBF 转录激活因子的生理生化功能 | 第19-20页 |
| 4. CBF 响应途径在高等植物中的广泛存在 | 第20-21页 |
| 5. 用CBF 转录激活因子提高作物抗逆性 | 第21页 |
| 三 转基因烟草研究和应用 | 第21-22页 |
| 四 本研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 ApCBF基因的克隆 | 第24-35页 |
| 1. 材料与试剂 | 第24-25页 |
| ·菌种和质粒 | 第24页 |
| ·常用酶和生化试剂 | 第24页 |
| ·分子生物学常用酶及试剂盒 | 第24页 |
| ·分子生物学常用生化试剂 | 第24页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·培养基 | 第24-25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25页 |
| 2. 方法 | 第25-30页 |
| ·模板的制备 | 第25页 |
| ·加接头的染色体步移(chromosome walking)扩增 | 第25-27页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第27页 |
| ·扩增产物的克隆 | 第27-30页 |
| ·序列测定、分析及比对 | 第30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-35页 |
| 第三章 植物表达载体的构建 | 第35-49页 |
| 一 实验材料 | 第35页 |
| ·菌株与质粒 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·主要仪器设备 | 第35页 |
| 二 方法 | 第35-42页 |
| 三 结果与分析 | 第42-49页 |
| 第四章 遗传转化研究 | 第49-62页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·植物材料 | 第49页 |
| ·主要试剂 | 第49页 |
| ·重组农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第49-51页 |
| ·培养基的种类 | 第49页 |
| ·播种 | 第49页 |
| ·农杆菌侵染液的制备 | 第49-50页 |
| ·叶盘法转化烟草 | 第50页 |
| ·抗性愈伤组织筛选及出芽诱导 | 第50页 |
| ·转化植株的诱根培养和移栽 | 第50-51页 |
| ·转基因烟草植株检测 | 第51-55页 |
| ·转基因烟草植株PCR 检测 | 第51页 |
| ·转基因烟草植株的Southern 检测 | 第51-53页 |
| ·转基因烟草植株的半定量RT-PCR 分析 | 第53-55页 |
| ·转基因植株形态与生长观察 | 第55页 |
| ·转基因植株耐盐与耐胁迫实验 | 第55页 |
| ·结果与分析 | 第55-62页 |
| ·烟草转化抗性植株的获得 | 第55-56页 |
| ·烟草转化抗性植株的PCR 检测 | 第56-58页 |
| ·转基因烟草植株的Southern 检测 | 第58-60页 |
| ·转基因烟草植株的半定量RT-PCR 分析 | 第60-62页 |
| 第五章 结论 | 第62-63页 |
| 第六章 讨论与展望 | 第63-65页 |
| 1. ApCBF 基因的克隆 | 第63页 |
| 2. 植物表达载体的构建 | 第63页 |
| 3. CBF 基因的组成型表达和对烟草植株表型的影响 | 第63-64页 |
| 4. 半定量 RT-PCR 分析基因的表达 | 第64页 |
| 5. 展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 附录 | 第70-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 作者简介 | 第79-80页 |
| 导师评语 | 第80页 |
