| 符号说明 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-12页 |
| 英文摘要 | 第12-16页 |
| 绪言 | 第16-19页 |
| 第一部分 川芎嗪对大鼠胶原性关节炎滑膜血管生成与产生VEGF的影响 | 第19-47页 |
| 前言 | 第19-22页 |
| 实验材料 | 第22-29页 |
| 1. 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2. 主要仪器 | 第23-24页 |
| 3. 实验动物 | 第24页 |
| 4. 主要试剂的配制 | 第24-29页 |
| 模型的建立 | 第29-31页 |
| 1. 造模方法 | 第29页 |
| 2. 模型评分标准 | 第29页 |
| ·关节炎指数评分 | 第29页 |
| ·足垫厚度测量 | 第29页 |
| 3. 实验动物纳入标准 | 第29页 |
| 4. 造模结果 | 第29-31页 |
| 实验方法 | 第31-39页 |
| 1. 模型分组 | 第31页 |
| 2. 给药 | 第31页 |
| 3. X摄片关节 | 第31-32页 |
| 4. CIA 大鼠滑膜组织的分离 | 第32页 |
| 5. 透射电镜观察血管内皮细胞 | 第32页 |
| 6. 免疫组织化学染色VEGF 及CD34 | 第32-33页 |
| 7. VEGF 表达及MVD 评定方法 | 第33页 |
| 8. Western Blot 检测滑膜VEGF 蛋白的表达 | 第33-36页 |
| ·蛋白样品的制备 | 第33-34页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第34页 |
| ·考马斯亮蓝对SDS-聚丙烯酰胺凝胶染色 | 第34-35页 |
| ·蛋白质从SDS-聚丙烯酰胺凝胶转移至硝酸纤维素膜 | 第35页 |
| ·免疫检测VEGF 蛋白 | 第35-36页 |
| 9. RT-PCR 检测滑膜VEGFmRNA 的表达 | 第36-38页 |
| ·总RNA 的提取 | 第36页 |
| ·RNA 的鉴定和定量 | 第36-37页 |
| ·RT-PCR 反应 | 第37-38页 |
| ·引物 | 第37页 |
| ·逆转录反应 | 第37-38页 |
| ·PCR 产物检测 | 第38页 |
| 10. 统计学分析 | 第38-39页 |
| 实验结果 | 第39-46页 |
| 1. TMP 对大鼠关节炎指数的影响 | 第39-40页 |
| 2. TMP 对CIA 大鼠足垫厚度的影响 | 第40-41页 |
| 3. TMP 对CIA 大鼠关节结构的影响 | 第41-42页 |
| 4. 电镜观察TMP 对CIA 大鼠滑膜血管内皮细胞超微结构的影响 | 第42页 |
| 5. 免疫组化分析TMP 对CIA 大鼠滑膜表达VEGF 和MVD 的影响 | 第42-43页 |
| 6. Western Blot 分析TMP 对CIA 大鼠滑膜分泌VEGF 的影响 | 第43-44页 |
| 7. RT-PCR 分析TMP 对CIA 大鼠滑膜表达VEGFmRNA 的影响 | 第44-46页 |
| 小结 | 第46-47页 |
| 第二部分 川芎嗪对大鼠巨噬细胞分泌VEGF 的影响及其机制 | 第47-64页 |
| 前言 | 第47-49页 |
| 实验材料 | 第49-53页 |
| 1. 主要试剂 | 第49-50页 |
| 2. 主要仪器 | 第50-51页 |
| 3. 实验动物 | 第51页 |
| 4. 主要试剂的配制 | 第51-53页 |
| 实验方法 | 第53-59页 |
| 1. 大鼠腹腔巨噬细胞的原代培养 | 第53页 |
| ·大鼠腹腔巨噬细胞的获得 | 第53页 |
| ·大鼠腹腔巨噬细胞的形态观察 | 第53页 |
| 2. ELISA 方法检测巨噬细胞培养液中VEGF 的含量 | 第53-55页 |
| ·巨噬细胞的准备及分组用药 | 第53-54页 |
| ·E LISA 检测巨噬细胞培养液中VEGF 的含量 | 第54-55页 |
| 3. MTT 法检测TMP 对巨噬细胞生长的影响 | 第55-57页 |
| 4. Western Blot 检测TMP 对LPS 刺激后巨噬细胞表达HIF-1 的影响 | 第57-58页 |
| ·巨噬细胞的准备及分组用药 | 第57页 |
| ·蛋白样品的制备 | 第57-58页 |
| ·Western Blot 的其它步骤参照第一部分实验的8.2~8.5 | 第58页 |
| 5. 统计学分析 | 第58-59页 |
| 实验结果 | 第59-63页 |
| 1. TMP 对大鼠腹腔巨噬细胞分泌VEGF 的影响 | 第59-60页 |
| 2. TMP 对大鼠腹腔巨噬细胞增殖的影响 | 第60-61页 |
| 3. TMP 对受LPS 刺激后巨噬细胞表达HIF-1α的影响 | 第61-63页 |
| 小结 | 第63-64页 |
| 附图 | 第64-70页 |
| 讨论 | 第70-81页 |
| 1. 血管生成、VEGF 与类风湿关节炎 | 第70-77页 |
| ·血管生成与类风湿关节炎 | 第70页 |
| ·V EGF 与类风湿关节炎 | 第70-77页 |
| ·V EGF 的生物功能 | 第70-71页 |
| ·V EGF 在RA 中高表达 | 第71-72页 |
| ·V EGF 在RA 中产生来源与调节因素 | 第72-74页 |
| ·V EGF 在RA 发病中的作用 | 第74-76页 |
| ·V EGF 在RA 治疗中的作用 | 第76-77页 |
| 2. 川芎嗪抗RA 作用及机制 | 第77-78页 |
| 3. 阳性对照药物的选择 | 第78-79页 |
| 4. 人类RA 模型-CIA 的选用 | 第79-81页 |
| ·CIA 模型的主要特点 | 第79页 |
| ·胶原性关节炎与佐剂性关节炎的比较 | 第79-81页 |
| 结论 | 第81-82页 |
| 创新性及意义 | 第82-83页 |
| 思考与展望 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-92页 |
| 综述1. 血管内皮生长因子研究进展 | 第92-103页 |
| 综述2. 中药抗血管生成研究进展 | 第103-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第114页 |
