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棉铃虫N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及性质研究

中文摘要第1-13页
英文摘要第13-17页
1 前言第17-35页
   ·棉铃虫研究概况第17-19页
   ·几丁质第19-20页
   ·几丁质酶和N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶第20-33页
     ·酶的概况第20-21页
     ·研究历史第21-23页
     ·化性质第23-24页
     ·生化性质第24-28页
     ·生理功能第28-29页
     ·酶的杀虫增效作用第29-31页
     ·防治真菌病害研究第31-32页
     ·酶在医学上的应用第32-33页
   ·本研究的目的和意义第33-35页
2 材料与方法第35-45页
   ·仪器第35页
   ·材料与试剂第35-36页
   ·方法第36-45页
     ·蛋白质浓度测定第36页
     ·酶活力和比活力的测定第36页
     ·试剂处理第36-37页
     ·酶的分离纯化第37-39页
       ·幼虫和成虫酶的提取第37页
       ·蛹N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化第37-39页
       ·酶的纯度鉴定第39页
     ·酶的理化性质测定第39-40页
       ·酶的分子量测定第39页
       ·酶分子的紫外吸收光谱测定第39-40页
       ·酶分子的内源荧光光谱测定第40页
     ·酶催化反应的动力学性质研究第40-41页
       ·温度对酶活力的影响第40页
       ·酶的热稳定性第40页
       ·pH对酶活力的影响第40页
       ·酶的酸碱稳定性第40页
       ·酶催化pNP-β-D-GlcNAc水解的动力学参数测定第40-41页
       ·酶催化底物pNP-β-D-GlcNAc水解反应的活化能测定第41页
     ·金属离子对酶活力的影响第41-42页
       ·正一价碱金属离子对酶的效应第41页
       ·二价金属离子对棉铃虫NAGase活力的影响第41页
       ·Al~(3+)对棉铃虫NAGase的影响第41页
       ·Cu~(2+)对棉铃虫NAGase抑制效应及抑制常数的测定第41页
       ·重金属离子对酶活力的影响第41-42页
       ·金属离子对酶的作用动力学第42页
       ·Zn~(2+)对酶的效应第42页
     ·EDTA对酶活力的影响第42页
     ·有机溶剂对酶活力的影响第42-43页
     ·糖对棉铃虫NAGase活力的影响第43页
     ·变性剂对棉铃虫NAGase活力的影响第43页
     ·PCMB对棉铃虫NAGase的影响第43页
     ·NBS对棉铃虫NAGase的影响第43-44页
     ·酶的热失活动力学研究方法第44-45页
       ·酶的热失活动力学第44页
       ·酶的热变性后紫外光谱的变化第44页
       ·酶的热变性后荧光发射光谱的变化第44-45页
3 结果与分析第45-107页
   ·酶的分离、纯化及纯度鉴定第45-47页
     ·棉铃虫蛹的NAGase的分离纯化第45-46页
     ·酶的纯度鉴定第46页
     ·幼虫和成虫酶的粗酶的制备第46-47页
   ·酶的理化性质第47-49页
     ·酶的分子量测定第47页
     ·酶分子的紫外吸收光谱测定第47-48页
     ·酶分子的内源荧光光谱测定第48-49页
   ·酶催化反应的动力学性质研究第49-56页
     ·温度对酶活力的影响第49页
     ·酶的热稳定性第49-50页
     ·pH对酶活力的影响第50页
     ·酶的酸碱稳定性第50页
     ·不同虫态的酶催化pNF-β-D-GlcNAc水解的动力学参数测定第50-53页
     ·酶催化底物pNP-β-D-GlcNAc水解反应的活化能测定第53-56页
   ·金属离子对棉铃虫蛹NAGase的影响第56-74页
     ·正一价碱金属离子对棉铃虫NAGase活力的影响第56页
     ·正二价碱土金属离子对棉铃虫NAGase活力的影响第56-57页
     ·Cu~(2+)对棉铃虫NAGase活力的影响第57页
     ·Cu~2对棉铃虫NAGase的抑制表现为可逆效应第57-58页
     ·Cu~(2+)对棉铃虫NAGase抑制效应及抑制常数的测定第58-59页
     ·Al~(3+)对棉铃虫NAGase的效应第59-60页
     ·Al~(3+)对棉铃虫NAGase的抑制表现为可逆抑制第60-61页
     ·Al~(3+)对棉铃虫NAGase抑制机理及抑制常数的测定第61-62页
     ·Zn~(2+)对酶的效应第62-67页
       ·Zn~(2+)离子对棉铃虫NAGase活力的影响第62-63页
       ·Zn~(2+)对棉铃虫NAGase的抑制表现为可逆效应第63-64页
       ·Zn~(2+)对棉铃虫NAGase抑制机理及抑制常数的测定第64-65页
       ·Zn~(2+)对酶的pH稳定性的影响第65-66页
       ·Zn~(2+)对酶的温度稳定性的影响第66-67页
     ·重金属离子对酶活力的影响第67-74页
       ·Hg~(2+)对酶活力的影响第67-68页
       ·Hg~(2+)对棉铃虫NAGase的抑制表现为可逆效应第68-69页
       ·Hg~(2+)对棉铃虫NAGase抑制机理及抑制常数的测定第69-70页
       ·pb~(2+)对酶活力的影响第70-71页
       ·pb~(2+)对棉铃虫NAGase的抑制表现为可逆效应第71-72页
       ·pb~(2+)对棉铃虫NAGase抑制机理及抑制常数的测定第72-74页
   ·EDTA对不同虫态的酶活力的影响第74-75页
   ·有机溶剂对棉铃虫蛹NAGase的影响第75-93页
     ·几种伯醇对棉铃虫NAGase活力的影响第75页
     ·多元醇对棉铃虫NAGase活力的影响第75-76页
     ·甲醛对棉铃虫NAGase的影响第76-79页
       ·甲醛对棉铃虫NAGase活力的影响第76-77页
       ·甲醛对棉铃虫NAGase抑制效应测定第77-78页
       ·甲醛对棉铃虫NAGase抑制常数的测定第78-79页
     ·丙酮对棉铃虫蛹NAGase的影响第79-83页
       ·丙酮对棉铃虫NAGase活力的影响第79-80页
       ·丙酮对棉铃虫NAGase抑制作用机理的判断第80-81页
       ·丙酮对棉铃虫NAGase抑制类型的判断第81-82页
       ·丙酮对酶分子构象的微扰作用第82-83页
     ·二甲亚砜和二氧六环对棉铃虫NAGase的影响第83-93页
       ·二甲亚砜对棉铃虫NAGase活力的影响第83-84页
       ·二甲亚砜对棉铃虫NAGase抑制作用机理的判断第84-85页
       ·二甲亚砜对棉铃虫NAGase抑制类型的判断第85-86页
       ·酶经二甲亚砜微扰后的荧光发射光谱的变化第86-87页
       ·酶经二甲亚砜微扰后的紫外光谱的变化第87-88页
       ·二氧六环对棉铃虫NAGase活力的影响第88-89页
       ·二氧六环对棉铃虫NAGase抑制作用机理的判断第89-90页
       ·二氧六环对棉铃虫NAGase抑制类型的判断第90-91页
       ·酶经二氧六环微扰后的荧光发射光谱的变化第91-92页
       ·酶经二氧六环微扰后的紫外光谱的变化第92-93页
   ·糖对棉铃虫NAGase活力的影响第93-95页
     ·蔗糖对棉铃虫NAGase活力的影响第93-94页
     ·葡萄糖对棉铃虫不同虫态的NAGase活力的影响第94-95页
   ·变性剂对棉铃虫NAGase活力的影响第95-98页
     ·H_2O_2对棉铃虫不同虫态的NAGase活力的影响第95页
     ·SDS对棉铃虫不同虫态NAGase活力的影响第95-96页
     ·盐酸胍和脲对棉铃虫NAGase活力的影响第96-97页
     ·酶经盐酸胍作用后的荧光光谱变化第97-98页
   ·PCMB对棉铃虫NAGase的影响第98-99页
   ·NBS对棉铃虫NAGase的影响第99-102页
     ·NBS对棉铃虫NAGase活力的影响第99-100页
     ·酶经NBS作用后的光谱变化第100-102页
   ·酶的热失活动力学第102-107页
     ·NAGase热失活的动力学模型建立第102-104页
     ·底物对棉铃虫NAGase热失活的影响第104-105页
     ·酶的热变性后内源荧光发射光谱的变化第105-106页
     ·酶的热变性后紫外吸收光谱的变化第106-107页
4 讨论第107-118页
   ·酶的分离纯化与理化性质第107-109页
   ·金属离子和EDTA对棉铃虫NAGase的影响第109-111页
   ·有机溶剂对棉铃虫NAGase的影响第111-114页
   ·变性剂对棉铃虫NAGase的影响第114-115页
   ·PCMB和NBS对棉铃虫NAGase的影响第115-116页
   ·棉铃虫NAGase在热变性过程中活力与构象变化研究第116-118页
5 结论第118-120页
6 参考文献第120-132页
7 发表论文和待发表论文第132-133页
8 致谢第133页

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