| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-12页 |
| 1．1 环境的渗透压对酵母生存的影响 | 第8页 |
| 1．2 甘油在酵母菌适应高渗环境过程中发挥的作用 | 第8页 |
| 1．3 高渗胁迫下酵母增加胞内甘油积累的方式 | 第8-11页 |
| 1．3．1 通过合成代谢途径增加甘油的积累 | 第9页 |
| 1．3．2 降低甘油通过细胞膜的速度 | 第9-10页 |
| 1．3．3 调控甘油的分解代谢过程 | 第10页 |
| 1．3．4 从环境中摄取甘油 | 第10-11页 |
| 1．4 3—磷酸甘油脱氢酶基因(gpd1)酵母抗高渗过程中的作用及其调控机制 | 第11-12页 |
| 2 本研究的目的与意义 | 第12-13页 |
| 3 材料与方法 | 第13-26页 |
| 3．1 材料、试剂和仪器 | 第13-17页 |
| 3．1．1 材料 | 第13页 |
| 3．1．2 试剂及试剂盒 | 第13-17页 |
| 3．1．3 仪器 | 第17页 |
| 3．2 方法 | 第17-26页 |
| 3．2．1 酵母基因组DNA的提取 | 第17-18页 |
| 3．2．2 以酵母基因组DNA为模板的PCR扩增 | 第18-19页 |
| 3．2．3 扩增产物的纯化与克隆 | 第19-21页 |
| 3．2．4 测序克隆片段测序与氨基酸序列分析 | 第21-22页 |
| 3．2．5 RNA的点杂交 | 第22-25页 |
| 3．2．6 酵母菌株在高渗胁迫下生长速度的检测 | 第25页 |
| 3．2．7 点杂交样品的处理 | 第25-26页 |
| 4 结果与分析 | 第26-35页 |
| 4．1 酵母菌株YY、FHS、WFB耐高渗能力的强弱 | 第26-27页 |
| 4．2 gpd1基因克隆 | 第27-31页 |
| 4．2．1 酵母基因组DNA的提取 | 第28页 |
| 4．2．2 以酵母基因组DNA为模板的PCR扩增 | 第28页 |
| 4．2．3 将回收的PCR片段与T载体连接并转化到宿主菌 | 第28-29页 |
| 4．2．4 筛选并鉴定阳性克隆子 | 第29-31页 |
| 4．3 克隆片段与gpd1序列(X76859)间同源性分析 | 第31页 |
| 4．4 在高渗胁迫下这酵母菌株YY、FHS和WFB的gpd1基因mRNA转录水平的差异 | 第31-35页 |
| 4．4．1 探针标记效果的检测 | 第31页 |
| 4．4．2 对酵母菌株渗透胁迫处理并检查抽提 RNA的质量 | 第31-33页 |
| 4．4．3 检测样品OD_(260)的数值计算上样量 | 第33页 |
| 4．4．4 点杂交分析样品mRNA的转录水平的变化趋势 | 第33-35页 |
| 5 讨论 | 第35-37页 |
| 5．1 菌株耐高渗能力与其gpd1基因序列的关系 | 第35页 |
| 5．2 gpd1基因mRNA转录水平的变化趋势与菌株的抗高渗能力的关系 | 第35-36页 |
| 5．3 未来工作的方向 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 附录 | 第41-45页 |
