| 目录 | 第1-8页 |
| 缩写 | 第8-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-43页 |
| 一、先导化合物发现 | 第17-19页 |
| 1、先导化合物 | 第17-18页 |
| 2、类同合成法 | 第18-19页 |
| 二、含氮杂环农药—吡虫啉 | 第19-22页 |
| 1、吡虫啉的理化性质 | 第20页 |
| 2、吡虫啉的作用机制和特点 | 第20-21页 |
| 3、吡虫啉的抗性 | 第21-22页 |
| 三、吡虫啉代谢研究进展 | 第22-26页 |
| 1、IMI的代谢途径 | 第23-24页 |
| 2、IMI代谢物(metabolite)的毒性 | 第24-25页 |
| 3、IMI代谢机理研究 | 第25页 |
| 4、羟基吡虫啉(hydroxy IMI)和烯式吡虫啉(olefin IMI)的制备 | 第25-26页 |
| 四、生物转化技术 | 第26-37页 |
| (一) 生物转化技术的应用 | 第28-31页 |
| (二) 推动生物转化技术发展的关键技术 | 第31-32页 |
| (三) 微生物转化技术 | 第32-37页 |
| 五、羟基化反应 | 第37-39页 |
| 1、羟基化反应机理 | 第38页 |
| 2、电子传递链 | 第38-39页 |
| 六、研究思路和方法 | 第39-43页 |
| 1、研究思路 | 第40页 |
| 2、研究方法设计 | 第40-41页 |
| 3、实验涉及的化合物的结构表征方法 | 第41-43页 |
| 第二章 转化吡虫啉菌种的筛选和鉴定 | 第43-58页 |
| 1.材料与方法 | 第44-48页 |
| ·培养基 | 第44页 |
| ·菌种 | 第44-45页 |
| ·静息细胞的制备和转化 | 第45-46页 |
| ·HPLC和LC／MS分析 | 第46页 |
| ·生理生化反应鉴定 | 第46页 |
| ·16S rDNA序列分析 | 第46-47页 |
| ·数据统计 | 第47-48页 |
| 2.结果 | 第48-55页 |
| ·从土壤中分离和筛选可转化IMI的菌种 | 第48-49页 |
| ·LC／MS分析 | 第49-50页 |
| ·NJ1和NJ2菌种鉴定 | 第50-53页 |
| ·从菌种库中筛选可转化IMI的菌种 | 第53-54页 |
| ·NJ1,NJ2和S.maltophilia CGMCC 1.1788菌株转化能力比较 | 第54-55页 |
| 3.讨论 | 第55-57页 |
| 本章小结 | 第57-58页 |
| 第三章 转化产物的提纯和结构鉴定 | 第58-84页 |
| 第一节 发酵罐发酵、转化及产物提纯 | 第58-66页 |
| 1.材料和方法 | 第58-60页 |
| ·培养基 | 第58页 |
| ·菌种 | 第58-59页 |
| ·培养和转化方法 | 第59页 |
| ·HPLC分析 | 第59页 |
| ·转化液的预处理 | 第59页 |
| ·转化产物提取与提纯 | 第59-60页 |
| 2.结果 | 第60-64页 |
| ·发酵和转化 | 第60-62页 |
| ·转化液的预处理 | 第62页 |
| ·未转化底物的去除 | 第62-63页 |
| ·产物的提取 | 第63页 |
| ·产物的纯化 | 第63-64页 |
| 3.讨论 | 第64-66页 |
| 第二节 转化产物的结构表征 | 第66-80页 |
| 1.材料与方法 | 第66-67页 |
| ·材料 | 第66页 |
| ·MS分析 | 第66页 |
| ·元素分析 | 第66页 |
| ·紫外光谱分析 | 第66页 |
| ·核磁共振光谱分析 | 第66-67页 |
| ·单晶x-射线衍射分析 | 第67页 |
| 2.结果 | 第67-79页 |
| ·MS分析 | 第67-70页 |
| ·元素分析 | 第70页 |
| ·紫外光谱分析 | 第70-71页 |
| ·核磁共振光谱分析 | 第71-75页 |
| ·单晶x-射线衍射光谱分析 | 第75-79页 |
| 3.讨论 | 第79-80页 |
| 第三节 IMI和5-HYDROXY IMI的HPLC分析研究 | 第80-83页 |
| 1.材料和方法 | 第80-81页 |
| ·仪器与试剂 | 第80页 |
| ·色谱柱和流动相 | 第80-81页 |
| ·标准溶液的配制 | 第81页 |
| ·培养和转化 | 第81页 |
| 2.实验结果 | 第81-83页 |
| ·HPLC条件优化 | 第81页 |
| ·标准校正曲线的线性回归方程 | 第81-82页 |
| ·重现性和回收率试验 | 第82-83页 |
| 3.讨论 | 第83页 |
| 本章小结 | 第83-84页 |
| 第四章 发酵条件研究 | 第84-92页 |
| 1.材料与方法 | 第84-86页 |
| ·菌种 | 第84页 |
| ·培养基 | 第84页 |
| ·培养和转化方法 | 第84-85页 |
| ·生物量的测定 | 第85页 |
| ·HPLC分析 | 第85-86页 |
| ·数据统计分析 | 第86页 |
| 2.实验结果 | 第86-90页 |
| ·不同细胞生长时期对酶形成的影响 | 第86-88页 |
| ·不同碳源对酶形成的影响 | 第88页 |
| ·不同氮源对酶形成的影响 | 第88-89页 |
| ·不同培养温度对酶形成的影响 | 第89-90页 |
| ·不同诱导剂对酶形成的影响 | 第90页 |
| 3.讨论 | 第90-92页 |
| 第五章 5-HYDROXY IMI合成条件研究 | 第92-105页 |
| 1.材料与方法 | 第92-93页 |
| ·菌种 | 第92页 |
| ·培养基 | 第92页 |
| ·静息细胞的制备 | 第92页 |
| ·转化反应 | 第92页 |
| ·蛋白提取和含量测定 | 第92页 |
| ·HPLC分析 | 第92-93页 |
| ·数据统计分析 | 第93页 |
| 2.实验结果 | 第93-102页 |
| ·不同初始pH值和不同磷酸盐缓冲液对羟基化酶活性的影响 | 第93-94页 |
| ·不同转化温度对羟基化酶活性的影响 | 第94-95页 |
| ·不同底物浓度对羟基化酶活性的影响 | 第95页 |
| ·不同效应剂对羟基化酶活性的影响 | 第95-97页 |
| ·摇瓶装液量对羟基化酶活性的影响 | 第97页 |
| ·不同摇瓶转速对羟基化酶活性的影响 | 第97-98页 |
| ·不同转化菌量对羟基化酶活性的影响 | 第98页 |
| ·铵盐对羟基化酶活性的影响 | 第98-99页 |
| ·转化动力学分析 | 第99-100页 |
| ·转化底物特异性的研究 | 第100-102页 |
| ·转化条件的综合优化 | 第102页 |
| 3.讨论 | 第102-105页 |
| 第六章 OLEFIN IMI的制备与生物活性测试 | 第105-125页 |
| 第一节 5-HYDROXY IMI酸热处理产物的结构鉴定 | 第105-113页 |
| 1.材料与方法 | 第105-106页 |
| ·材料 | 第105页 |
| ·5-hydroxy IMI酸水解产物的制备 | 第105-106页 |
| ·HPLC和LC／MS分析 | 第106页 |
| ·紫外光谱分析 | 第106页 |
| ·核磁共振光谱分析 | 第106页 |
| 2.实验结果和讨论 | 第106-113页 |
| ·HPLC分析 | 第106-107页 |
| ·质谱分析 | 第107-108页 |
| ·紫外光谱分析 | 第108-109页 |
| ·核磁共振光谱分析 | 第109-113页 |
| 第二节 5-HYDROXY IMI生成OLEFIN IMI的优化研究 | 第113-120页 |
| 1.材料与方法 | 第113-114页 |
| ·材料 | 第113-114页 |
| ·olefin IMI标准工作曲线的制定 | 第114页 |
| ·不同处理条件对olefin IMI生成的影响 | 第114页 |
| 2.实验结果与讨论 | 第114-120页 |
| ·标准工作曲线的制定 | 第114-115页 |
| ·不同浓度盐酸对生成olefin IMI的影响 | 第115-117页 |
| ·不同温度对生成olefin IMI的影响 | 第117-118页 |
| ·不同酸对生成olefin IMI的影响 | 第118页 |
| ·不同起始浓度5-hydroxy IMI对生成olefin IMI的影响 | 第118-119页 |
| ·olefin IMI稳定性 | 第119-120页 |
| 第三节 OLEFIN IMI的生物活性测定 | 第120-125页 |
| 1 材料与方法 | 第120-121页 |
| ·供试样品 | 第120页 |
| ·供试生物 | 第120页 |
| ·综合毒力测试方法 | 第120-121页 |
| ·口器摄取测试法测定olefin IMI毒力 | 第121页 |
| ·olefin IMI的盆栽试验 | 第121页 |
| 2.实验结果与讨论 | 第121-125页 |
| ·综合毒力测试 | 第121-124页 |
| ·olefin IMI的相对毒力测定 | 第124页 |
| ·盆栽试验 | 第124-125页 |
| 本章小结 | 第125-127页 |
| 总结 | 第127-131页 |
| 参考文献 | 第131-142页 |
| 致谢 | 第142-143页 |
| 附件 | 第143-156页 |
| 附件一：在读博士期间主要科研情况 | 第143-145页 |
| 附件二：NJ1菌株16S RDNA序列 | 第145-146页 |
| 附件三：论文查新报告主要内容 | 第146-149页 |
| 附件四：质谱分析报告 | 第149-152页 |
| 附件五：5-HYDROXY IMI元素分析报告 | 第152-153页 |
| 附件六：OLEFIN IMI和IMI对蚜虫及飞虱的活性比较试验报告 | 第153-155页 |
| 附件七：OLEFIN IMI防治蚕豆蚜盆栽试验报告 | 第155-156页 |
