第一章 文献综述 | 第1-19页 |
·引言 | 第9-16页 |
·群体感应 | 第9-10页 |
·革兰氏阴性菌中的群体感应系统 | 第10-11页 |
·革兰氏阳性菌中由寡肽介导的群体效应 | 第11-12页 |
·AHLs酶的分子识别及其分子生物学功能 | 第12-15页 |
·检测acyl-HSL信号分子的方法 | 第15页 |
·国内外研究现状 | 第15-16页 |
·AHLs调控系统与生物防治 | 第16页 |
·研究的目的和意义 | 第16-17页 |
·本论文研究的主要内容 | 第17-19页 |
·菌种的筛选 | 第17页 |
·提取基因组DNA | 第17页 |
·AHLs酶基因的分子克隆及序列分析 | 第17-18页 |
·AHLs酶基因的体外表达和纯化 | 第18页 |
·体外研究AHLs酶的水解特性和酶学特征 | 第18页 |
·测定 | 第18-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-28页 |
·菌种和质粒 | 第19-20页 |
·芽孢杆菌 | 第19页 |
·农杆菌报告系统 | 第19页 |
·大肠杆菌 | 第19-20页 |
·质粒 | 第20页 |
·培养基和培养条件 | 第20页 |
·培养基 | 第20页 |
·培养条件 | 第20页 |
·试剂 | 第20-21页 |
·酶类及试剂盒 | 第20页 |
·其它药品试剂 | 第20页 |
·显色剂 | 第20-21页 |
·仪器 | 第21页 |
·试验方法和步骤 | 第21-28页 |
·病原菌萝卜E.C.C生长曲线 | 第21页 |
·病原菌萝卜E.C.C致病实验 | 第21-22页 |
·平板菌落计数 | 第22页 |
·抑病实验 | 第22-23页 |
·农杆菌报告系统实验 | 第23页 |
·进一步的实验来验证芽孢杆菌 | 第23页 |
·细菌基因组DNA提取 | 第23-24页 |
·聚合酶链式反应(PCR) | 第24页 |
·PCR产物和酶切产物的回收 | 第24-25页 |
·碱裂解法小量提取质粒DNA | 第25页 |
·PCR产物和大肠杆菌E.coli BL21质粒的酶切、电泳 | 第25页 |
·酶切产物的回收 | 第25页 |
·DNA的连接 | 第25-26页 |
·大肠杆菌JM101感受态细胞的制备 | 第26页 |
·转化大肠杆菌 | 第26页 |
·阳性克隆 | 第26页 |
·克隆片段DNA的测序及序列分析 | 第26-27页 |
·构建表达载体 | 第27页 |
·融合蛋白的诱导表达 | 第27页 |
·融合蛋白的纯化 | 第27-28页 |
第三章 结果分析 | 第28-42页 |
·病原菌萝卜E.C.C的生长曲线 | 第28页 |
·病原菌萝卜E.C.C致病实验 | 第28-30页 |
·平板菌落计数 | 第30-32页 |
·抑病实验结果分析 | 第32-33页 |
·农杆菌报告系统实验结果分析 | 第33-35页 |
·基因扩增和克隆 | 第35-36页 |
·T-载体的酶切 | 第36页 |
·重组质粒的双酶切鉴定 | 第36-37页 |
·SS1和SS10的核苷酸序列及其编码氨基酸序列的同源性分析 | 第37-41页 |
·SS1和SS10的表达和纯化 | 第41-42页 |
第四章 讨论 | 第42-44页 |
第五章 结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-48页 |
附录A | 第48-49页 |
附录B | 第49-50页 |
附录C | 第50-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
攻读学位期间所取得的相关科研成果 | 第52页 |