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AHL酶基因的克隆及序列分析

第一章 文献综述第1-19页
   ·引言第9-16页
     ·群体感应第9-10页
     ·革兰氏阴性菌中的群体感应系统第10-11页
     ·革兰氏阳性菌中由寡肽介导的群体效应第11-12页
     ·AHLs酶的分子识别及其分子生物学功能第12-15页
     ·检测acyl-HSL信号分子的方法第15页
     ·国内外研究现状第15-16页
   ·AHLs调控系统与生物防治第16页
   ·研究的目的和意义第16-17页
   ·本论文研究的主要内容第17-19页
     ·菌种的筛选第17页
     ·提取基因组DNA第17页
     ·AHLs酶基因的分子克隆及序列分析第17-18页
     ·AHLs酶基因的体外表达和纯化第18页
     ·体外研究AHLs酶的水解特性和酶学特征第18页
     ·测定第18-19页
第二章 材料与方法第19-28页
   ·菌种和质粒第19-20页
     ·芽孢杆菌第19页
     ·农杆菌报告系统第19页
     ·大肠杆菌第19-20页
     ·质粒第20页
   ·培养基和培养条件第20页
     ·培养基第20页
     ·培养条件第20页
   ·试剂第20-21页
     ·酶类及试剂盒第20页
     ·其它药品试剂第20页
     ·显色剂第20-21页
   ·仪器第21页
   ·试验方法和步骤第21-28页
     ·病原菌萝卜E.C.C生长曲线第21页
     ·病原菌萝卜E.C.C致病实验第21-22页
     ·平板菌落计数第22页
     ·抑病实验第22-23页
     ·农杆菌报告系统实验第23页
     ·进一步的实验来验证芽孢杆菌第23页
     ·细菌基因组DNA提取第23-24页
     ·聚合酶链式反应(PCR)第24页
     ·PCR产物和酶切产物的回收第24-25页
     ·碱裂解法小量提取质粒DNA第25页
     ·PCR产物和大肠杆菌E.coli BL21质粒的酶切、电泳第25页
     ·酶切产物的回收第25页
     ·DNA的连接第25-26页
     ·大肠杆菌JM101感受态细胞的制备第26页
     ·转化大肠杆菌第26页
     ·阳性克隆第26页
     ·克隆片段DNA的测序及序列分析第26-27页
     ·构建表达载体第27页
     ·融合蛋白的诱导表达第27页
     ·融合蛋白的纯化第27-28页
第三章 结果分析第28-42页
   ·病原菌萝卜E.C.C的生长曲线第28页
   ·病原菌萝卜E.C.C致病实验第28-30页
   ·平板菌落计数第30-32页
   ·抑病实验结果分析第32-33页
   ·农杆菌报告系统实验结果分析第33-35页
   ·基因扩增和克隆第35-36页
   ·T-载体的酶切第36页
   ·重组质粒的双酶切鉴定第36-37页
   ·SS1和SS10的核苷酸序列及其编码氨基酸序列的同源性分析第37-41页
   ·SS1和SS10的表达和纯化第41-42页
第四章 讨论第42-44页
第五章 结论第44-45页
参考文献第45-48页
附录A第48-49页
附录B第49-50页
附录C第50-51页
致谢第51-52页
攻读学位期间所取得的相关科研成果第52页

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