缩略表 | 第1-11页 |
研究技术路线图 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-33页 |
引言 | 第12-13页 |
第一节 蜘蛛丝研究进展 | 第13-28页 |
·蜘蛛和蜘蛛丝 | 第13-16页 |
·蜘蛛丝的形态结构 | 第16页 |
·蜘蛛丝的物理化学机械性质 | 第16-17页 |
·蜘蛛丝的结晶结构 | 第17-18页 |
·蜘蛛丝蛋白和基因结构 | 第18-24页 |
·蜘蛛丝的开发应用历史、现状和进展 | 第24-27页 |
·蜘蛛丝的应用 | 第27-28页 |
第二节 转基因动物的研究进展 | 第28-33页 |
第二章 材料与方法 | 第33-61页 |
引言 | 第33页 |
第一部分 实验材料 | 第33-37页 |
第二部分 实验方法 | 第37-61页 |
第三章 拟蜘蛛牵丝蛋白在大肠杆菌和小鼠乳腺表达研究 | 第61-83页 |
第一节 拟蜘蛛牵丝蛋白基因单体设计、合成和多聚化 | 第61-65页 |
·拟蜘蛛牵丝蛋白基因设计合成 | 第61-64页 |
·拟蜘蛛牵丝蛋白基因单体多聚化 | 第64-65页 |
第二节 抗拟蜘蛛牵丝蛋白血清的制备 | 第65-66页 |
第三节 拟蜘蛛牵丝蛋白基因在大肠杆菌内的表达 | 第66-69页 |
·大肠杆菌表达载体的构建 | 第66-67页 |
·拟蜘蛛牵丝蛋白基因在大肠杆菌内诱导表达 | 第67-69页 |
第四节 拟蜘蛛牵丝蛋白基因在小鼠乳腺内的表达 | 第69-83页 |
·信号肽的设计合成 | 第69-70页 |
·信号肽与拟蜘蛛牵丝蛋白基因的连接 | 第70-71页 |
·小鼠乳腺表达载体构建 | 第71-73页 |
·显微注射法生产转基因小鼠 | 第73-74页 |
·转基因小鼠的PCR检测 | 第74-75页 |
·转基因小鼠的Southern blot检测 | 第75-77页 |
·转基因小鼠传代结果 | 第77-78页 |
·转基因小鼠乳汁Western blot检测 | 第78-80页 |
·Nothern blot分析 | 第80-81页 |
·小鼠乳汁中拟蜘蛛牵丝蛋白表达产物的定量 | 第81-83页 |
第四章 讨论和结论 | 第83-97页 |
第一节 拟蜘蛛牵丝蛋白基因的设计 | 第83-85页 |
第二节 拟蜘蛛牵丝蛋白基因在大肠杆菌内的表达 | 第85-90页 |
·影响大肠杆菌外源重组基因表达的因素 | 第85-87页 |
·拟蜘蛛牵丝蛋白基因在大肠杆菌内的表达 | 第87-90页 |
第三节 拟蜘蛛牵丝蛋白基因在小鼠乳腺中的表达 | 第90-94页 |
·乳腺表达载体选择和构建 | 第90-91页 |
·转基因在转基因小鼠基因组中的整合效率 | 第91-92页 |
·转基因小鼠传代分析 | 第92-93页 |
·表达产物分析 | 第93-94页 |
·外源基因整合拷贝数和基因整合位置效应对其表达的影响 | 第94页 |
第四节 结论 | 第94-97页 |
参考文献 | 第97-105页 |
附录: 载体构建过程中的重要的测序结果 | 第105-110页 |
个人简历 | 第110-111页 |
致谢 | 第111页 |