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拟蜘蛛牵丝蛋白基因在大肠杆菌和小鼠乳腺表达研究

缩略表第1-11页
研究技术路线图第11-12页
第一章 文献综述第12-33页
 引言第12-13页
 第一节 蜘蛛丝研究进展第13-28页
   ·蜘蛛和蜘蛛丝第13-16页
   ·蜘蛛丝的形态结构第16页
   ·蜘蛛丝的物理化学机械性质第16-17页
   ·蜘蛛丝的结晶结构第17-18页
   ·蜘蛛丝蛋白和基因结构第18-24页
   ·蜘蛛丝的开发应用历史、现状和进展第24-27页
   ·蜘蛛丝的应用第27-28页
 第二节 转基因动物的研究进展第28-33页
第二章 材料与方法第33-61页
 引言第33页
 第一部分 实验材料第33-37页
 第二部分 实验方法第37-61页
第三章 拟蜘蛛牵丝蛋白在大肠杆菌和小鼠乳腺表达研究第61-83页
 第一节 拟蜘蛛牵丝蛋白基因单体设计、合成和多聚化第61-65页
     ·拟蜘蛛牵丝蛋白基因设计合成第61-64页
     ·拟蜘蛛牵丝蛋白基因单体多聚化第64-65页
 第二节 抗拟蜘蛛牵丝蛋白血清的制备第65-66页
 第三节 拟蜘蛛牵丝蛋白基因在大肠杆菌内的表达第66-69页
     ·大肠杆菌表达载体的构建第66-67页
     ·拟蜘蛛牵丝蛋白基因在大肠杆菌内诱导表达第67-69页
 第四节 拟蜘蛛牵丝蛋白基因在小鼠乳腺内的表达第69-83页
     ·信号肽的设计合成第69-70页
     ·信号肽与拟蜘蛛牵丝蛋白基因的连接第70-71页
     ·小鼠乳腺表达载体构建第71-73页
     ·显微注射法生产转基因小鼠第73-74页
     ·转基因小鼠的PCR检测第74-75页
     ·转基因小鼠的Southern blot检测第75-77页
     ·转基因小鼠传代结果第77-78页
     ·转基因小鼠乳汁Western blot检测第78-80页
     ·Nothern blot分析第80-81页
     ·小鼠乳汁中拟蜘蛛牵丝蛋白表达产物的定量第81-83页
第四章 讨论和结论第83-97页
 第一节 拟蜘蛛牵丝蛋白基因的设计第83-85页
 第二节 拟蜘蛛牵丝蛋白基因在大肠杆菌内的表达第85-90页
     ·影响大肠杆菌外源重组基因表达的因素第85-87页
     ·拟蜘蛛牵丝蛋白基因在大肠杆菌内的表达第87-90页
 第三节 拟蜘蛛牵丝蛋白基因在小鼠乳腺中的表达第90-94页
     ·乳腺表达载体选择和构建第90-91页
     ·转基因在转基因小鼠基因组中的整合效率第91-92页
     ·转基因小鼠传代分析第92-93页
     ·表达产物分析第93-94页
     ·外源基因整合拷贝数和基因整合位置效应对其表达的影响第94页
 第四节 结论第94-97页
参考文献第97-105页
附录: 载体构建过程中的重要的测序结果第105-110页
个人简历第110-111页
致谢第111页

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