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茄青枯假单胞菌花生寄主特异性毒性基因的功能鉴定

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-10页
第一章 前言第10-22页
第二章 材料与方法第22-40页
   ·菌株及质粒第22-24页
   ·培养基及培养条件第24-25页
     ·培养基第24-25页
     ·培养条件第25页
     ·菌株保存第25页
   ·抗生素第25-26页
   ·溶液、缓冲液和试剂第26页
   ·DNA的提取第26-29页
     ·质粒DNA的提取第26-27页
       ·质粒DNA的小量提取第26-27页
       ·质粒DNA的大量提取第27页
     ·茄青枯假单胞菌质粒DNA的提取第27-28页
     ·茄青枯假单胞菌总DNA的提取第28-29页
       ·快速微量提取法第28页
       ·蛋白酶/SDS法第28-29页
   ·DNA的沉淀第29页
   ·DNA溶液中蛋白质及RNA的去除第29页
   ·琼脂糖凝胶电泳第29-30页
   ·DNA片段的回收第30-31页
     ·试剂盒法第30页
     ·电洗脱法第30-31页
   ·DNA连接第31-32页
     ·载体DNA的脱磷酸化第31页
     ·DNA连接第31-32页
   ·质粒DNA的转化-电脉冲法第32页
   ·DNA杂交第32-34页
     ·Southern转移第32-33页
     ·探针标记第33页
     ·Southern杂交第33-34页
   非放射性杂交第33-34页
       ·预杂交液第33-34页
       ·杂交步骤第34页
       ·杂交结果检测第34页
   ·聚合酶链式反应(PCR)第34-35页
   ·三亲本接合(triparental conjugation)第35页
   ·LPS的提取第35-36页
   ·LPS的电泳检测第36-38页
     ·LPS SDS-PAGE第36-37页
     ·LPS显色第37-38页
       ·贮存液的制备第37页
       ·凝胶染色第37页
       ·将凝胶照相或扫描第37-38页
   ·茄青枯假单胞菌的致病性检测第38页
   ·茄青枯假单菌在烟草上引起过敏反应能力检测第38页
   ·茄青枯假单胞菌在花生植株内的生长动力学检测第38-39页
   ·DNA测序第39-40页
第三章 结果与分析第40-61页
   ·引言第40-42页
   ·单独的ORF3能扩大对花生不致病的茄青枯假单胞菌菌株T2014的寄主范围第42-46页
     ·只含有ORF3的重组质粒的构建第42页
     ·将pGX6418导入对花生不致病菌株T2014得到接合子T6418第42-43页
     ·只含有ORF3的T2014的植株试验及其在花生体内的生长动力学第43-46页
   ·T2015 ORF3突变体的构建及其表型检测第46-54页
     ·ORF2表达质粒的构建第47-51页
     ·T2015的只有ORF3突变的突变体T2135/R的获得第51页
     ·T2135/R的致病性检测及其在花生体内的生长动力学第51-54页
   ·T2015等茄青枯假单胞菌菌株的植物过敏反应试验第54-55页
   ·ORF3在T2015在其他植物上致病过程中的作用第55-56页
   ·pGX1252的同源序列pGX1415的亚克隆pGX6240的获得第56-59页
   ·T2015的ORF3的产物在LPS生物合成中起0-特异性链与核心区连接酶作用第59-61页
第四章 讨论第61-64页
参考文献第64-72页
致谢第72页

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