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蒽高效降解菌的选育及其增强型绿色荧光蛋白标记

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-11页
第一章 前言第11-27页
 1 生物强化技术是污染环境生物修复的新技术第11-17页
   ·污染环境的生物修复第11-12页
   ·生物强化技术在生物修复系统中的应用第12-15页
   ·生物强化系统的设计与运行第15-16页
   ·蒽降解菌的研究概况第16-17页
 2 增强型绿色荧光蛋白标记第17-19页
   ·EGFP报告基因研究现状第17-18页
   ·绿色荧光蛋白基因的表达第18页
   ·绿色荧光蛋白报告基因的应用第18-19页
 3.诱变选育新技术——离子注入技术第19-22页
   ·离子注入诱变技术的发展第19-20页
   ·离子注入诱变机理第20页
   ·离子注入操作第20-21页
   ·离子注入技术在微生物诱变中的应用第21-22页
   ·离子注入技术选育微生物展望第22页
 4.原生质体在育种中的应用第22-23页
   ·影响原生质体形成的因素第22-23页
   ·影响原生质体再生的因素第23页
 5.课题设计第23-27页
   ·研究的目的第23-24页
   ·研究的意义第24-25页
   ·研究内容第25-27页
第二章 降蒽细菌的初筛及其紫外线诱变第27-39页
 1.引言第27页
 2.材料第27-28页
   ·药品及试剂第27-28页
   ·培养基第28页
   ·主要仪器设备第28页
   ·蒽降解菌来源第28页
 3.方法第28-33页
   ·蒽降解细菌的分离纯化及其生理特性检测第28-30页
   ·菌株降解活性测定第30页
   ·蒽浓度测定(分子荧光测定法)第30-32页
   ·紫外诱变育种第32-33页
 4.结果与分析第33-36页
   ·分离得到的蒽降解菌第33页
   ·分离菌株降解能力测定第33-35页
   ·分离到的蒽降解菌的诱变处理及再筛选第35-36页
 5.结论与讨论第36-39页
第三章 蒽降解菌的最优综合培养条件选择及其再驯化第39-48页
 1 引言第39页
 2 材料第39-40页
   ·蒽降解菌第39页
   ·培养基第39-40页
   ·药品与试剂第40页
   ·主要仪器设备第40页
 3.方法第40-42页
   ·正交法选择蒽降解菌的最优培养条件第40-41页
   ·检测共代谢基质对降解效果的影响第41页
   ·以最佳培养条件再驯化蒽降解菌第41-42页
 4 结果与分析第42-46页
   ·正交试验选择的最优培养条件第42-45页
   ·葡萄糖作为共代谢基质对降解效果的影响第45-46页
   ·最佳培养条件再驯化的蒽降解菌第46页
 5 结论与讨论第46-48页
第四章 离子注入法诱变选育蒽高效降解菌第48-61页
 1 引言第48页
 2 材料第48-49页
   ·出发菌株及原生质体制备第48页
   ·培养基第48-49页
   ·药品及试剂第49页
   ·主要仪器设备第49页
 3 方法第49-52页
   ·原生质体的制备及再生第49-50页
   ·低能离子注入诱变的有效育种程序第50-51页
   ·离子注入操作第51-52页
 4 结果与分析第52-59页
   ·制备原生质体第52-54页
   ·离子注入过程中真空对微生物存活率的影响第54页
   ·N~+离子注入对蒽降解菌存活能力和降解活性的影响第54-56页
   ·N~+离子注入蒽降解菌亲本株和原生质体的二次诱变效应第56-57页
   ·N~+离子注入诱变前后蒽降解菌的生长情况比较第57-58页
   ·突变菌株降解蒽性状的遗传稳定性检测第58-59页
 5 讨论第59页
 6 小结第59-61页
第五章 外源降解菌增强型绿色荧光蛋白标记第61-75页
 1.引言第61-62页
 2.材料第62-64页
   ·菌株和质粒第62页
   ·培养基第62页
   ·主要试剂第62-63页
   ·主要仪器第63-64页
 3.方法第64-70页
   ·大量拷贝pTnMod-Ocm(含Tn5 transposon)第64-65页
   ·EGFP基因的扩增第65-66页
   ·EGFP基因在ANI315中的克隆与表达第66-68页
   ·筛选和检测携带重组质粒的转化克隆第68-70页
 4.结果与分析第70-73页
   ·基因EGFP的PCR扩增第70页
   ·重组质粒的构建第70-71页
   ·EGFP基因的表达第71页
   ·EGFP基因的检测第71-73页
 5.结论和讨论第73-75页
第六章 标记菌株降解活性与存活能力研究第75-82页
 1 引言第75页
 2.材料第75-76页
   ·供试菌株第75页
   ·培养基第75页
   ·主要仪器设备第75-76页
   ·废水第76页
 3 方法第76-77页
   ·悬浮菌液的制备第76页
   ·实验分组设计第76页
   ·降解实验第76页
   ·分析方法第76-77页
   ·标记菌株与非标记菌株降解活性生长情况检测第77页
   ·外源降解菌在废水菌群存在条件下的活性检测第77页
 4 结果与分析第77-81页
   ·未标记菌株与标记菌株生长情况检测结果第77-79页
   ·单一高效降解菌降解实验结果第79页
   ·外源降解菌的在废水菌群中的竞争能力第79-80页
   ·代谢基质对降解效果的影响第80-81页
 5 结论与讨论第81-82页
参考文献第82-89页
附录第89-90页
致谢第90页

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