中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-13页 |
英文缩略词 | 第13-14页 |
1 引言 | 第14-27页 |
·胚胎干细胞的研究进展 | 第14-15页 |
·原始生殖细胞 | 第15-21页 |
·PGCs的起源 | 第15页 |
·维持PGCs全能性的分子机制 | 第15页 |
·维持PGCs全能性的信号传导途径 | 第15-16页 |
·PGCs的分化 | 第16页 |
·自PGCs建立EG胞系的优势 | 第16-17页 |
·自PGCs建立EG细胞系的一般方法 | 第17-20页 |
·饲养层的制作 | 第17-18页 |
·PGCs的分离 | 第18页 |
·PGCs的培养条件 | 第18-19页 |
·EG 细胞的鉴定 | 第19-20页 |
·形态学方面 | 第19页 |
·PAS染色 | 第19页 |
·碱性磷酸酶(AKP)染色 | 第19页 |
·核型分析 | 第19页 |
·体内分化实验 | 第19页 |
·体外分化实验 | 第19-20页 |
·嵌合体实验 | 第20页 |
·端粒酶活性 | 第20页 |
·EG细胞表面标志物的检测 | 第20页 |
·OCT-4转录因子表达产物的检测 | 第20页 |
·EG细胞与ES细胞的区别 | 第20-21页 |
·鸡的原始生殖细胞 | 第21-27页 |
·鸡胚胎的早期发育 | 第21-22页 |
·鸡PGCs的发生与迁移的途径和机制 | 第22-24页 |
·鸡 PGCs的形态 | 第24-25页 |
·鸡PGCs的研究进展 | 第25-26页 |
·研究鸡EG细胞的意义 | 第26-27页 |
·本研究的目的、意义及主要内容 | 第27页 |
2 材料和方法 | 第27-40页 |
·实验动物 | 第27-28页 |
·主要仪器 | 第28页 |
·主要试剂 | 第28-29页 |
·有关溶液的配制 | 第29-32页 |
·主要实验方法 | 第32-40页 |
·4.5~7.5d鸡胚PGCs的分离 | 第32页 |
·CEG细胞的传代 | 第32-33页 |
·石蜡切片方法 | 第33-34页 |
·原代鸡胚成纤维细胞(PCEG)的制备 | 第34-35页 |
·原代鼠胚成纤维细胞(PMEF)的制备 | 第35页 |
·饲养层的制备 | 第35-36页 |
·PCEF、PMEF、STO及SNL细胞的冻存与复苏 | 第36-37页 |
·CEG细胞的冷冻保存及解冻3l | 第37页 |
·CEG细胞的鉴定3l | 第37-39页 |
·形态学鉴定 | 第37页 |
·PAS染色鉴定3l | 第37-38页 |
·AKP染色鉴定 | 第38页 |
·体外分化实验 | 第38页 |
·体内分化实验 | 第38-39页 |
·血清质量的简要鉴定方法 | 第39-40页 |
·统计分析 | 第40页 |
3 结果与分析 | 第40-45页 |
·CEG细胞的鉴定结果 | 第40-42页 |
·形态学鉴定 | 第40页 |
·PAS染色结果 | 第40-41页 |
·AKP染色结果 | 第41页 |
·体外分化结果 | 第41页 |
·体内分化结果 | 第41-42页 |
·FBS浓度不同对CEG细胞分离克隆效果的影响 | 第42页 |
·细胞因子对CEG细胞分离克隆效果的影响 | 第42-43页 |
·饲养层对CEG细胞分离克隆效果的影响 | 第43页 |
·鸡胚日龄对CEG细胞分离克隆效果的影响 | 第43-44页 |
·消化时间对CEG细胞生长效果的影响 | 第44-45页 |
·左右侧生殖腺对CEG细胞分离克隆效果的影响 | 第45页 |
·CEG细胞冷冻保存结果 | 第45页 |
4 讨论 | 第45-54页 |
·FBS浓度不同对CEG细胞的影响 | 第45-46页 |
·饲养层及细胞因子对CEG细胞的影响 | 第46-50页 |
·胚胎日龄对CEG细胞分离传代的影响 | 第50-51页 |
·细胞消化液对CEG细胞生长的影响 | 第51-52页 |
·左右侧生殖腺对CEG细胞分离克隆的影响 | 第52页 |
·影响CEG细胞生长的其它因素 | 第52-54页 |
·基本培养基的选择 | 第52-53页 |
·添加剂的使用 | 第53-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-66页 |
图版说明 | 第66-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
作者简介 | 第72页 |