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从原始生殖细胞中分离克隆鸡胚胎生殖细胞

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-13页
英文缩略词第13-14页
1 引言第14-27页
   ·胚胎干细胞的研究进展第14-15页
   ·原始生殖细胞第15-21页
     ·PGCs的起源第15页
     ·维持PGCs全能性的分子机制第15页
     ·维持PGCs全能性的信号传导途径第15-16页
     ·PGCs的分化第16页
     ·自PGCs建立EG胞系的优势第16-17页
     ·自PGCs建立EG细胞系的一般方法第17-20页
       ·饲养层的制作第17-18页
       ·PGCs的分离第18页
       ·PGCs的培养条件第18-19页
       ·EG  细胞的鉴定第19-20页
         ·形态学方面第19页
         ·PAS染色第19页
         ·碱性磷酸酶(AKP)染色第19页
         ·核型分析第19页
         ·体内分化实验第19页
         ·体外分化实验第19-20页
         ·嵌合体实验第20页
         ·端粒酶活性第20页
         ·EG细胞表面标志物的检测第20页
         ·OCT-4转录因子表达产物的检测第20页
     ·EG细胞与ES细胞的区别第20-21页
   ·鸡的原始生殖细胞第21-27页
     ·鸡胚胎的早期发育第21-22页
     ·鸡PGCs的发生与迁移的途径和机制第22-24页
     ·鸡 PGCs的形态第24-25页
     ·鸡PGCs的研究进展第25-26页
     ·研究鸡EG细胞的意义第26-27页
   ·本研究的目的、意义及主要内容第27页
2 材料和方法第27-40页
   ·实验动物第27-28页
   ·主要仪器第28页
   ·主要试剂第28-29页
   ·有关溶液的配制第29-32页
   ·主要实验方法第32-40页
     ·4.5~7.5d鸡胚PGCs的分离第32页
     ·CEG细胞的传代第32-33页
     ·石蜡切片方法第33-34页
     ·原代鸡胚成纤维细胞(PCEG)的制备第34-35页
     ·原代鼠胚成纤维细胞(PMEF)的制备第35页
     ·饲养层的制备第35-36页
     ·PCEF、PMEF、STO及SNL细胞的冻存与复苏第36-37页
     ·CEG细胞的冷冻保存及解冻3l第37页
     ·CEG细胞的鉴定3l第37-39页
       ·形态学鉴定第37页
       ·PAS染色鉴定3l第37-38页
       ·AKP染色鉴定第38页
       ·体外分化实验第38页
       ·体内分化实验第38-39页
     ·血清质量的简要鉴定方法第39-40页
   ·统计分析第40页
3 结果与分析第40-45页
   ·CEG细胞的鉴定结果第40-42页
     ·形态学鉴定第40页
     ·PAS染色结果第40-41页
     ·AKP染色结果第41页
     ·体外分化结果第41页
     ·体内分化结果第41-42页
   ·FBS浓度不同对CEG细胞分离克隆效果的影响第42页
   ·细胞因子对CEG细胞分离克隆效果的影响第42-43页
   ·饲养层对CEG细胞分离克隆效果的影响第43页
   ·鸡胚日龄对CEG细胞分离克隆效果的影响第43-44页
   ·消化时间对CEG细胞生长效果的影响第44-45页
   ·左右侧生殖腺对CEG细胞分离克隆效果的影响第45页
   ·CEG细胞冷冻保存结果第45页
4 讨论第45-54页
   ·FBS浓度不同对CEG细胞的影响第45-46页
   ·饲养层及细胞因子对CEG细胞的影响第46-50页
   ·胚胎日龄对CEG细胞分离传代的影响第50-51页
   ·细胞消化液对CEG细胞生长的影响第51-52页
   ·左右侧生殖腺对CEG细胞分离克隆的影响第52页
   ·影响CEG细胞生长的其它因素第52-54页
     ·基本培养基的选择第52-53页
     ·添加剂的使用第53-54页
5 结论第54-55页
参考文献第55-66页
图版说明第66-71页
致谢第71-72页
作者简介第72页

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