| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-25页 |
| ·生物固氮对于农业可持续发展的重要意义 | 第11-12页 |
| ·氮肥在农业生产中具有巨大作用 | 第11页 |
| ·我国土壤氮素总体水平缺乏 | 第11页 |
| ·生物固氮将在可持续农业生产中扮演重要角色 | 第11-12页 |
| ·联合固氮在生物固氮过程中具有重要作用 | 第12页 |
| ·解决联合固氮效率低下问题的主要途径是提高能源供应 | 第12-13页 |
| ·固氮菌中的四碳二羧酸运输系统 | 第13-23页 |
| ·Dct系统是生物固氮过程中的能量转运系统 | 第13-15页 |
| ·对共生固氮 | 第13-14页 |
| ·对联合固氮 | 第14-15页 |
| ·Dct系统的遗传组织结构及表达调控机制 | 第15-22页 |
| ·Dct系统的遗传组织结构 | 第15-20页 |
| ·Dct系统的表达调控机制 | 第20-22页 |
| ·Dct系统的底物范围及对生物体其他性状的影响 | 第22-23页 |
| ·Dct系统改造对生物固氮的意义 | 第23页 |
| ·本工作立题依据和研究内容 | 第23-25页 |
| 第二章 含额外拷贝dctPQM基因工程菌株的构建及其生理特性的研究 | 第25-42页 |
| ·实验材料 | 第25-27页 |
| ·菌株和质粒 | 第25-26页 |
| ·细菌培养 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·试剂 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-32页 |
| ·含dct基因克隆大片段的序列测定 | 第27页 |
| ·含固氮斯氏假单胞菌dctPQM基因穿梭转移质粒的构建 | 第27-29页 |
| ·含额外拷贝dct结构基因工程菌株的构建 | 第29页 |
| ·含额外拷贝dct结构基因工程菌株的鉴定 | 第29-31页 |
| ·细菌总DNA的提取 | 第30页 |
| ·工程菌株nptⅡ-PCR检测 | 第30-31页 |
| ·菌株固氮活性测定 | 第31-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-40页 |
| ·四碳二羧酸转移酶系编码基因dctPQM的结构分析 | 第32-35页 |
| ·不同菌属中四碳二羧酸结合蛋白序列同源性比较 | 第32-33页 |
| ·固氮斯氏假单胞菌四碳二羧酸转运蛋白的结构预测 | 第33-35页 |
| ·含额外拷贝dct结构基因工程菌株的构建 | 第35-37页 |
| ·固氮斯氏假单胞菌dct基因簇序列结构示意图 | 第35-36页 |
| ·携带dctPQM基因自杀性转移质粒的构建 | 第36页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第36-37页 |
| ·含额外拷贝dct结构基因工程菌株的鉴定 | 第37-38页 |
| ·含额外拷贝dct结构基因工程菌株固氮活性的测定 | 第38-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 含额外拷贝dct结构基因工程菌株与转pepc基因高光合水稻间的互作 | 第42-50页 |
| ·材料与方法 | 第42-44页 |
| ·供试材料 | 第43页 |
| ·试验处理 | 第43页 |
| ·光合生理指标测定 | 第43页 |
| ·植株~(15)N测定 | 第43页 |
| ·~(14)C-同化物的标记和测量 | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-48页 |
| ·施用不同固氮菌对转pepc基因水稻光合特性的影响 | 第44-45页 |
| ·水稻联合固氮菌对转含pepc基因水稻光合作用的影响 | 第45-46页 |
| ·施用不同固氮菌对转pepc基因水稻产量性状的影响 | 第46-47页 |
| ·转pepc基因水稻对P.stutzeri固氮能力的影响 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 固氮斯氏假单胞菌dctP基因表达调控机制的研究 | 第50-64页 |
| ·材料和方法 | 第50-56页 |
| ·菌株和质粒 | 第50页 |
| ·细菌培养 | 第50-51页 |
| ·试剂 | 第51页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第51-52页 |
| ·采用PCR扩增方法获得dctP基因启动子区 | 第52-54页 |
| ·dctP-lacZ融合基因导入野生型菌株A1501和RpON, DctB~(-)突变株 | 第54-55页 |
| ·β-半乳糖苷酶(β-Galactosidase)活性的测定 | 第55-56页 |
| ·结果和分析 | 第56-62页 |
| ·固氮斯氏假单胞菌dctP-lacZ融合基因的构建 | 第56-60页 |
| ·dctP-lacZ融合基因表达载体的接合转移 | 第60-61页 |
| ·固氮斯氏假单胞菌dctP基因的诱导表达 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 附录 | 第65-80页 |
| 附录1 水稻联合固氮工程菌在盐碱稻区应用效果研究 | 第65-73页 |
| ·试验材料与方法 | 第65-66页 |
| ·试验结果与分析 | 第66-72页 |
| ·不同处理对水稻株高及分蘖的影响 | 第66-67页 |
| ·不同处理对水稻根系活力的影响 | 第67-68页 |
| ·不同处理对水稻生物量的影响 | 第68-69页 |
| ·不同处理对水稻粗蛋白含量的影响 | 第69-70页 |
| ·不同处理对水稻产量及产量构成因素的影响 | 第70页 |
| ·固氮菌对土壤改良的效果 | 第70-72页 |
| ·讨论 | 第72-73页 |
| 附录2 | 第73-80页 |
| 参考文献 | 第80-88页 |
| 发表文章 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
